جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « فاکتور رشد شبه انسولین » در نشریات گروه « بیوتکنولوژی و ژنتیک گیاهی »
تکرار جستجوی کلیدواژه « فاکتور رشد شبه انسولین » در نشریات گروه « کشاورزی »-
گیاهان تراریخت، بیورآکتورهای مناسبی برای تولید پروتئین های نوترکیب در سطوح بالا و با کیفیت بهتر می باشند. همسانه سازی ژن کدکننده پروتئین هدف در ناقل بیانی مناسب یکی از مراحل مهم در انتقال و بیان موفق پروتئین در گیاه مورد نظر می باشد. هدف از این تحقیق، همسانه سازی cDNAی فاکتور رشد شبه انسولین-1 (IGF1) در ناقلهای بیانی مناسب گیاهی بود. برای این منظور، ابتدا با استفاده از یک جفت آغازگر اختصاصی، cDNAی ژن IGF1 تکثیر و با استفاده از سایت های برشی تعبیه شده در ساختار آغازگر در ناقل پایه pMCS5 وارد گردید. با توجه به مزایای غلات بدلیل کشت وسیع، بیوماس بالا، قابلیت ذخیره دانه و قابلیت استفاده خوراکی برای تولید پروتئین های دارویی، پس از توالی یابی، cDNA در یک ناقل مناسب برای انتقال و بیان پروتئین در غلات همسانه سازی گردید. همچنین با توجه به اینکه کلروپلاست های تراریخت پتانسیل بیشتری برای تولید پروتئین نوترکیب عملکردی در سطوح بالا دارند، cDNAی توالی یابی شده در دو ناقل اختصاصی برای انتقال و بیان IGF1 در کلروپلاست توتون نیز همسانه سازی گردید. در یکی از این ناقلها، ژن گزینشگر بوسیله دو توالی مستقیم LoxP احاطه شده تا امکان حذف ژن انتخابگر از طریق سیستم Cre/Lox پس از گزینش گیاهان تراریخت فراهم گردد.کلید واژگان: فاکتور رشد شبه انسولین, 1, همسانه سازی, انتقال ژن, پروتئین نوترکیب, ناقل بیانی}Transgenic plants are suitable bioreactors for the production of recombinant proteins at high levels and qualities. Cloning of a gene encoding the target protein in proper expression vectors is one of the most important steps for successful integration and expression of target protein in plants. The purpose of this study was to clone insulin-like growth factor -1 (IGF1) cDNA in plant expression vectors. To this end, we amplified amplify IGF1 cDNA using a pair of specific primer followed by its cloning in pMCS5 basic vector. After sequencing, because of several advantages of cereals for production of biopharmaceuticals, such as high cultivation area and biomass, possibility of grain storage and usage as food and feed, we constructed suitable vectors for IGF1 integration and expression in cereals. In addition, as transgenic chloroplasts contain higher potential to produce elevated levels of functional recombinant proteins, the IGF1 cDNA was recloned in two chloroplast-specific vectors. In one of these vectors, selectable marker gene is flanked by two direct repeats of LoxP sequences, providing the marker gene excision after production of transgenic plants via Cre/Lox system.Keywords: Insulin-like Growth Factor -1, Cloning, Gene transfer, Recombinant proteins, Expression vectors}
-
توالی یابی فاکتور رشد شبه انسولین - یک IGF-I در فیل ماهی Huso huso و بررسی بیان آن در بافت های مختلففاکتور رشد شبه انسولین-یک، IGF-I، نقش حیاتی در فرایندهای مختلف زیستی ماهیان بر عهده دارد. هدف از اجرای این تحقیق دستیابی به توالی کامل ژن کدکننده IGF-I و بررسی الگوی بیان آن در بافتهای مختلف فیل ماهی Huso huso، به عنوان یکی از مهمترین گونه های ماهیان خاویاری بود. با استفاده از روش RACE-PCR، قطعه ای به طول 1229 نوکلئوتید به عنوان توالی کامل IGF-I در نمونه های کبدی فیل ماهی شناسایی و ثبت (1/512770AB) گردید. ناحیه کدکننده پروتئین در این توالی، شامل 483 نوکلئوتید است. پروتئین کاهش نیافته IGF-I (1/85795BAH) شامل 160 اسیدآمینه بوده که به طور کلی از دو بخش Signal peptide و پیش پروتئین IGF-I (proIGF-I) تشکیل شده است. ناحیه پیش پروتئین، خود شامل 5 حوزه B، C، A، D و E می باشد. مقایسه توالی IGF-I فیل ماهی با توالی این فاکتور در سایر موجودات، مبین شباهت نسبتا بالای IGF-I این ماهی با دیگر مهره داران خصوصا انواعی از پرندگان بود. بررسی بیان IGF-I در بافتهایی نظیر معده، آبشش، کبد، طحال، کلیه، عضله، پوست، روده، قلب و مغز با روش Real-time PCR نشان داد که اگرچه این فاکتور در تمامی بافتهای مورد مطالعه بیان می شود، اما مکانهای اصلی بیان آن به ترتیب کبد و روده می باشد. کمترین میزان بیان در بافت عضله اندازه گیری شد. نتایج این تحقیق می تواند به منظور بررسی فرایندهای فیزیولوژیکی فیل ماهی از دیدگاه مولکولی مورد استفاده قرار گیرد.
کلید واژگان: فیل ماهی, Huso huso, فاکتور رشد شبه انسولین, یک, توالی یابی, بیان ژن}Insulin-like growth factor I, IGF-I, plays important roles in different biological activities in fish. The present study was aimed at isolating cDNA encoding IGF-I and measuring relative gene expression levels in different tissues in the beluga, Huso huso one of the most important Iranian sturgeon. A fragment of 1229 nucleotides coding for IGF-I was cloned (AB512770.1) from liver using RACE-PCR. It included 483 nucleotides encoding sequences for deduced IGF-I protein (BAH85795.1). Deduced IGF-I involved 160 amino acids and included both the signal peptide and the proIGF-I. The proIGF-I consisted of B, C, A, D and E domains. Comparison of IGF-I in beluga and some animal species from different phyla showed high similarity especially with birds. Expression levels of IGF-I were analyzed in stomach, gill, liver, spleen, kidney, muscle, skin, intestine, heart and brain using real-time PCR. The results showed that although IGF-I expressed in all analyzed tissues, the highest IGF-I transcript levels were in the liver and intestine tissues. The lowest transcript level was measured in the muscle. The results of the present study can help scientists evaluate different aspects of molecular physiology in the beluga
نکته
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
©2000-2024 magiran.com All Rights Reserved.