جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « Bovine ephemeral fever virus (BEFV) » در نشریات گروه « دامپزشکی »
-
گلیکوپروتئین G ویروس تب بیدوام گاوی (BEFV) به عنوان یک نامزد احتمالی جهت ایمنسازی حیوانات در برابر بیماری تب بی دوام شناخته شده است. در سالهای اخیر، این پروتئین جهت تولید یک واکسن نوترکیب مورد توجه ویژه بوده است. هدف از مطالعه ی حاضر، ساخت یک پلاسمید یوکاریوتی بیان کننده ی اپیتوپ G1 از ژن گلیکوپروتئین G ویروس تب بیدوام گاوی، برای استفاده به عنوان یک واکسن DNA احتمالی در مطالعات آینده بود. به این منظور، اپیتوپ G1 از ژن گلیکوپروتئین G در ناقل بیانی یوکاریوتی pEGFP-N1، تحت کنترل پروموتر سیتومگالوویروس انسانی (CMV) کلون شد. سپس سازه ی نوترکیب pEGFPN1-G1 به سلولهای جنینی کلیه ی انسان (HEK 293) انتقال یافت و کارایی بیان پروتئین با استفاده از روشهای ایمونوفلورسنس غیرمستقیم (IFA) و ایمنوبلات بررسی شد. مشاهده ی فلورسنس درون سیتوپلاسم سلولهای ترانسفکت شده و ظهور یک باند مجزا با وزن مولکولی تقریبی 26 کیلو دالتون در آزمایش ایمنوبلات در واکنش به یک سرم موش ضد پروتئین G1، نشاندهنده ی بیان موفق پروتئین G1 توسط این سازه ی نوترکیب در سلولهای میزبان بود.کلید واژگان: ویروس تب بی دوام گاوی (BEFV), پروتئین نوترکیب G1, واکسن DNA}The G glycoprotein of bovine ephemeral fever virus (BEFV) has been identified as a plausible candidate for immunization against BEF disease. In recent years, this protein has been investigated to produce a recombinant vaccine. The aim of the present study was to construct a eukaryotic plasmid, expressing G1 epitope of BEFV G glycoprotein gene, for application as a possible DNA vaccine in future studies. For this purpose, the G1 epitope of G glycoprotein gene was cloned in a eukaryotic expression vector, pEGFP-N1, under the control of the human cytomegalovirus (CMV) promoter. Then, the recombinant pEGFPN1-G1 construct was transfected into human embryonic kidney (HEK 293) cell line and the expression efficiency was verified by indirect immunofluorescent (IFA) staining and immunoblotting techniques. Observation of intracytoplasmic fluorescence in transfected cells and appearance of a distinct band at an approximate molecular weight of 26 kDa in immunoblotting in reaction to an anti-G1 mouse serum, indicated that G1 protein was successfully expressed by this recombinant construct in the host cells.Keywords: Bovine ephemeral fever virus (BEFV), Recombinant G1 protein, DNA vaccine}
-
تب بیدوام گاوی (BEF) یک بیماری غیر واگیردار در گاو و گاومیش میباشد که در مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری آسیا، استرالیا و افریقا پراکنده شده است. هدف از مطالعه حاضر، بررسی واکنشپذیری پروتیین همجوش MBP-G1 بیان شده در باکتری اشرشیاکلی در یک آزمایش الایزای غیر مستقیم خانگی بود. به این منظور پس از کلونینگ ژن G1 از گلیکوپروتیین G ویروس تب بیدوام گاوی در ناقل pMalc2x و متعاقبا بیان پروتیین در سویه Rosetta اشرشیاکلی، پروتیین نوترکیب MBP-G1 تولید شده به عنوان آنتیژن پوشاننده کف پلیت در یک آزمایش الایزا استفاده شد. نتایج آزمایش الایزا نشان داد که این پروتیین نوترکیب توانایی واکنش با سرم موشهای ایمن شده با واکسن تجاری تب بیدوام گاوی و شناسایی آنتیبادیهای ضد ویروس BEF را داشت. بنابراین میتوان پروتیین همجوش MBP-G1 بیان شده در اشرشیاکلی را به عنوان یک نامزد مناسب جهت طراحی کیت الایزا برای شناسایی گاومیشهای آلوده به ویروس BEF معرفی نمود.
کلید واژگان: اشرشیاکلی, آزمایش الایزا, پروتئین نوترکیب MBP-G1, گاومیش, ویروس تب بیدوام گاوی (BEFV)}Bovine ephemeral fever (BEF) is a non contagious disease of cattle and water buffalo, spanning in tropical and subtropical zones such as Asia, Australia, and Africa. The aim of this study was to investigate the reactivity of the fusion MBP-G1 protein expressed in Escherichia coli in an indirect in-house ELISA. In order to, after cloning of the G1 gene of bovine ephemeral fever virus (BEFV) G glycoprotein into pMalc2x vector and subsequently expression in Rosetta strain of Escherichia coli, recombinant MBP-G1 proteinwasused as a coating antigen to develop an ELISA. Results showed that the expressed G1 protein could react with immunized mice serum with commercial BEF vaccine and detect of antibodies against BEFV. Thus, the expressed fusion MBP-G1 protein can be introduced as an ideal candidate to develop an ELISA for detection of BEFV-infected water buffalo.
Keywords: Escherichia coli, Elisa, recombinant MBP-G1 protein, water buffalo, Bovine ephemeral fever virus (BEFV)}
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شدهاند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شدهاست. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که میخواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.