غربال گری آنتی بادی انسانی بر علیه توکسین کزاز با روش نمایش فاژی

توکسین کزاز یکی از سمی ترین موادی است که بر روی سیستم اعصاب مرکزی تاثیر دارد و باعث انقباض شدید عضلات می شود. بنابراین، تشخیص سریع و درمان نورو توکسین های تتانوس ضروری به نظر می رسد. امروزه آنتی بادی ها در حوزه های تشخیص و درمان جایگاه ویژه ای را به خود اختصاص داده اند. در این میان، آنتی بادی های منوکلونال کاملا انسانی به دلیل عدم برانگیختن پاسخ ایمنی در بدن و کارایی بالا در درمان بیماری ها مورد توجه قرار گرفته شده است. بلوغ تمایلی آنتی بادی ها کاربرد آن ها را در پزشکی و پروژه های تحقیقاتی تسهیل نموده است. در این مطالعه، هدف ما غربال گری آنتی بادی کزاز با استفاده از روش نمایش فاژی و یافتن کاربرد قطعات آنتی بادی جدا شده از کتابخانه ایمن در ابزار تشخیصی و درمانی می باشد.
در تحقیق پیش رو، به وسیله ی روش نمایش فاژی غنی سازی و غربال گری آنتی بادی منوکلونال نوترکیب انسانی از یک فرد واکسینه با توکسوئید کزاز انجام گرفته شد. کتابخانه با وکتور بیانیpSEX81 ساخته و برای غربال گری در این کتابخانه، غنی سازی با استفاده از روش نمایش فاژی انجام شد.
فاژ کمکیM13K07 با تیتر pfu/ml 1013آماده و توکسین تتانوس در میکروپلیت پوشش داده شد. روند غنی سازی با استفاده از ذرات فاژ انجام و دقت فرآیند غنی سازی توسط فاژ ELISA تایید گردید. تنها کلون با جذب نوری بالا از چرخه غنی سازی جدا شد. برای جداسازی آنتی بادی های کزاز، ابتدا استخراج وکتور از کتابخانه انجام شد. پس از آن، پنج مرحله غنی سازی صورت گرفت. قوی-ترین غنی سازی در چرخه چهارم رخ داد و وجود آنتی بادی کزاز را تایید نمود. در مجموع 50 تک کلنی به صورت تصادفی از این چرخه انتخاب و 20 کلون با اتصال قوی انتخاب و توالی یابی شدند.
در این مطالعه، هدف ما غربال گری آنتی بادی کزاز با استفاده از روش نمایش فاژی و یافتن کاربرد قطعات آنتی بادی جدا شده از کتابخانه ایمن در ابزار تشخیصی و درمانی می باشد.