بهینه سازی آزمون کامت قلیایی برای مطالعه DNA سلول های منفرد کبدی در ماهی سفید دریای خزر (Rutilus frisii kutum)

الکتروفورز سلول های منفرد روشی است که برای سنجش آسیب DNA استفاده می شود. این روش به علت سهولت و سرعت بالا نسبت به روش های دیگر مورد توجه قرار گرفته است. در مطالعه حاضر با اعمال برخی از تغییرات، روش مرسوم سنجش کامت قلیایی با استفاده از سلول های منفرد کبد ماهی سفید دریای خزر(Rutilus frisii kutum) بهینه سازی شد. برای این منظور 10 عدد ماهی انگشت قد با وزن متوسط 1±7 گرم و میانگین طول کل 2±10 سانتی متر تهیه شد و از بافت کبد آن ها نمونه برداری شد. نمونه ها تا شروع آزمایش ها در فریزر 80- قرار داده شدند. در بهینه سازی روش مذکور برای دستیابی به سلول های انفرادی مراحل مختلف سانتریفیوژ حذف شد، مدت زمان انجماد ژل روی اسلاید ها کاهش و مدت زمان حذف دیواره سلولی با بافر لیز کننده افزایش پیدا کرد و در نهایت روشی ساده برای آرشیو لام های رنگ آمیزی شده با اتیدیوم بروماید به مدت حداقل دو هفته ارائه شد. نتایج نشان داد علاوه بر کاهش مدت زمان و مواد و وسایل مصرفی، احتمال خطا نیز کاهش یافت. همچنین شاخص های آزمون کامت مانند طول کامت، ارتفاع کامت، طول دنباله، درصد DNA در دنباله و Tail Moment در مقایسه با روش بهینه سازی شده اختلاف معنی داری را نشان نداد (05/0P>).