تهیه آنتی بادی چندهمسانه ای در برابر پروتئین پوششی نوترکیب جدایه B13 ویروس موزاییک خیار

ویروس موزاییک خیار یکی از ویروس های گیاهی شایع با دامنه میزبانی وسیع بیش از 1200 گونه گیاهی است. یکی از مولفه های محدودکننده ردیابی این ویروس در دسترس نبودن آنتی بادی اختصاصی ویروس علی الخصوص در کشورهای در حال توسعه است. تکنولوژی دی ان ای نوترکیب امکان سهل تر تولید آنتی بادی را بدون نیاز به تجهیزات پیشرفته فراهم کرده است. در تحقیق حاضر ژن پروتئین پوششی ویروس موزاییک خیار که در سازه pTZ57CMVCP همسانه-سازی شد درون ناقل بیانی pET21a همسانه سازی شد و درون استرین Rosetta باکتریEscherichia coli منتقل شد. بیان CMV CP توسط الکتروفورز در ژل پلی آکریل آمید (SDS-PAGE) بررسی و با استفاده از وسترن بلات، سنجش لکه گذاری نقطه ای و الیزا توسط آنتی بادی ویروس موزاییک خیار تایید شد. پروتئین بیان شده با استفاده از کیت خالص سازی T7.Tag تخلیص و به منظور تهیه آنتی بادی در بدن دو عدد موش استفاده شد. IgG تخلیص و IgG کانژوگه شده علیه پروتئین پوششی ویروس موزاییک خیار دارای اختصاصیت و حساسیت مناسب برای ردیابی پروتیئن پوششی بیان شده و هم چنین گیاهان کدو آلوده به CMV در الایزای غیرمستقیم، الایزای دوطرفه و وسترن بلات بودند. آنتی بادی های تهیه شده می توانند در تست های سرولوژیکی و سرومولکولی در مطالعه ویروس و غربال گیاهان آلوده استفاده شود. این اولین گزارش از تهیه آنتی بادی در برابر پروتیئن پوششی یک جدایه بومی ویروس موزاییک خیار می باشد.