جداسازی و بهینه سازی آال-آراژز فاقد فعالیت گلوتامینازی سراشیا مارسسنس ازی هاز نمونه طبیعی

آنزیم ال-آسپاراژیناز بهعنوان یکی از بهترین داروهای ضد سرطان خون شناخته شده است. با توجه به این که آسپاراژینازهای داروئی موجود، از منابع باکتریایی میباشند، هدف از این تحقیق یافتن باکتری های تولید کننده این آنزیم از نمونه های طبیعی می باشد.
سویه های باکتریایی مولد ال-آسپاراژیناز از انواع مختلفی از نمونه های طبیعی جداسازی شدند. جداسازی اولیه با استفاده از محیط نوترینت آگار و سپس محیط آسپارژین دکستروز سالت آگار حاوی فنل رد انجام شد. کلنی های دارای هاله صورتی و مولد ال-آسپاراژیناز برای مطالعه فعالیت آنزیمی و نیز شناسایی با روش های بیوشیمیایی و مولکولی انتخاب گردیدند. فعالیت آنزیمی توسط روش نسلر اندازه گیری شد. به منظور بهینه سازی تولید آنزیم برخی از فاکتورها مانند منبع کربن، نیتروژن و pH مورد بررسی قرار گرفتند.
از میان 133 جدایه، سویه 100 جدا شده از چربی مرغ دارای فعالیت ال-آسپاراژینازی بالا (8.92 واحد بر میلی گرم) و فاقد فعالیت گلوتامینازی بود. جدایه انتخاب شده به عنوان سراشیا مارسسنس سویه 100 معرفی و باشماره دسترسی KX821734 در بانک ژنی NCBI ثبت گردید. شرایط بهینه محیط کشت جهت تولید این آنزیم شامل مالتوز 1.5 درصد به عنوان منبع کربن، آمونیوم سولفات یک درصد به عنوان منبع نیتروژن و pH برابر 6.8 بود.
با توجه به کاربرد آنزیم ال-آسپاراژیناز در زمینه های مختلف دارویی، پس از انجام مطالعات بیش تر بالینی بر روی این آنزیم، جدایه حاصل می تواند یک گزینه مناسب صنعتی برای تولید آنزیم ال-آسپاراژیناز باشد.