بررسی اثر غلظت های مختلف نانوذرات اکسیدآهن بر بیان ژن p53در سلول های بنیادی مشتق شده از غشای آمنیوتیک انسانی

نانوذرات سوپر پارامغناطیس اکسیدآهن، پیشرفت های گسترده ای را در نانوتکنولوژی ایجاد کرده است. خصوصیات منحصر به فرد این ذرات موجب گسترش روزافزون کاربرد آن ها در زمینه های مختلف از جمله حوزه های پزشکی شده است. یکی از این کاربرد ها، امکان تجزیه و تحلیل غیرتهاجمی برای ردیابی سلول ها است. با این حال، احتمال ایجاد سمیت در سلول ها توسط این نانوذرات گزارش شده است. با توجه به این که آسیب سلولی ناشی از نانوذرات اکسید آهن وابسته به غلظت است، بنابراین پیدا کردن غلظت مناسب نانوذرات اکسید آهن برای جلوگیری از آسیب سلولی یا مرگ سلولی ناشی از آپوپتوز بسیار مهم است. هدف از این مطالعه یافتن غلظتی از نانوذرات سوپر پارامغناطیس اکسیدآهن است که منجر به ایجاد آپوپتوز در سلول ها نشود. این مطالعه با هدف بررسی اثر غلظت های مختلف نانوذره اکسید آهن بر بقای سلول، تاثیر بر افزایش بیان ژن دخیل در آپوپتوز در سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از غشای آمنیوتیک انسان مورد ارزیابی و بررسی قرار گرفت. ابتدا سلول های بنیادی از بافت غشای آمنیوتیک انسانی استخراج و کشت داده شدند و جهت اثبات ویژگی مولتی پوتنت بودن این سلول ها به رده های سلولی چربی، استخوانی و غضروفی متمایز شدند. سپس درصد زنده مانی سلول های تیمار شده با غلظت های مختلف نانوذره اکسید آهن (200، 150، 100، 50، 0 میکروگرم در میلی لیتر) در بازه زمانی 24 و 48 ساعت به روش MTT مورد ارزیابی قرار گرفت. سپس اثر غلظت های 0، 100،150 و 200 میکروگرم بر میلی لیتر از نانوذره بعد از 24 ساعت در hAMSCs از نظر بیان ژن p53 با روش Real-time PCR سنجیده شد. سلول های hAMSC استخراج شده در کشت دو بعدی ظاهری دوکی شکل داشتند که در بررسی مارکرهای سطحی توسط فلوسایتومتری، مشخص شد که این سلول ها CD29، CD90 و CD105 را بیان کرده و در مقابل CD34 و CD45 را قادر به بیان نبودند. نتایج حاصل از بررسی توانایی چند توانی hAMSCs نشان داد که این سلول ها قابلیت تمایز به رده های سلول های چربی، استخوانی و غضروفی را دارا هستند. نانوذره اکسید آهن در غلظت 50 و 100 میکروگرم در میلی لیتر در مدت زمان 24 ساعت تاثیری معنادار بر بقا سلول ها نداشت. در حالی که از غلظت 150 به بعد بقا سلولی به شکل قابل ملاحظه ای کاهش یافت (%4/1±42، 001/0 >P). نتایج حاصل از آنالیز Real-time PCR نشان داد که بیان ژن p53 ناشی از مواجه سلول با نانوذره با غلظت های 150 میکروگرم در میلی لیتر (1/0±4/2، 001/0 >P) و 200 میکروگرم در میلی لیتر (11/0±1/4، 001/0 >P) به شکل قابل ملاحظه ای افزایش می یابد. با توجه به نتایج، نانوذرات مورد استفاده در این مطالعه در غلظت ≤ 100 میکروگرم در میلی لیتر برای ردیابی سلول ها مناسب هستند.