توسعه و بهینه سازی تکنیک مقرون به صرفه Tetra-primer ARMS PCR به منظور بررسی جهش g + 6723G> A ژن میوستاتین در گوسفند قره گل

میوستاتین که فاکتور رشد و تمایز 8 (GDF8) نیز نامیده می شود به عنوان یک تنظیم کننده منفی رشد و توسعه عضلات عمل می نماید. بنابراین نقش آن در رشد حیوانات و تولید گوشت حایز اهمیت است. مطالعات عملکردی نشان داده است که یک چندشکلی تک نوکلیوتیدی در ناحیه 3'UTR این ژن سبب حذف نقش مهاری میوستاتین و در نهایت بروز فنوتیپ ماهیچه مضاعف در گوسفند می شود. روش tetra primer ARMS PCR یک روش آسان، سریع، قابل اعتماد و ارزان برای شناسایی چندشکلی تک نوکلیوتیدی می باشد. مطالعه حاضر با هدف شناسایی جهش تک نوکلیوتیدی ژن میوستاتین (g + 6723G> A) با روش tetra primer ARMS PCR در 86 راس گوسفند قره گل انجام شد. بهینه سازی واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از 3 نمونه شاهد شامل هموزیگوت وحشی، هتروزیگوت و هموزیگوت جهش یافته گوسفند نژاد شاروله صورت گرفت. تمامی نمونه های قره گل مورد بررسی دارای آلل G برای چندشکلی تک نوکلیوتیدی ذکر شده بودند و آلل جهش یافته A مشاهده نشد، بنابراین فراوانی آلل جهش یافته (A) و آلل وحشی (G) به ترتیب صفر و 100 درصد می باشد. به منظور ارزیابی دقت تکنیکtetra primer ARMS PCR در این جایگاه، تمامی افراد آزمایش شده با روش PCR-RFLP نیز تعیین ژنوتیپ شدند. نتایج حاصل، حاکی از تطابق دو روش با یکدیگر می باشد و از این رو می توان در جهت تعیین ژنوتیپ از روش Tetra Primer ARMS PCR به عنوان روشی مقرون به صرفه استفاده نمود.