تهیه لیپوزوم های فوزوژنیک حاوی سیکلوسپورین A و ارزیابی اثرات ایمونوساپرسیوی آن در کشت سلول های T انسانی

لیپوزوم های فوزوژنیک یک سیستم دارورسانی ذره ای محسوب می شوند که بیشتر محتویات خود را در اختیار سیتوزول سلول قرار می دهند و اثبات شده است که جهت رساندن ماکرومولکول هایی نظیرDNA، پروتئین ها و پلی ساکاریدها به سلول ها حامل مناسبی هستند. این مطالعه با هدف استفاده از لیپوزوم های فوزوژنیک به عنوان یک سامانه دارو رسانی جهت سیکلوسپورین A صورت گرفت.
در این مطالعه ابتدا با استفاده از DPPC (Dipalmitoylphosphatidylcholine) و کلسترول به وسیله روش تبخیر حلال لیپوزوم های حاوی سیکلوسپورین تهیه شد و جهت تهیه لیپوزوم های فوزوژنیک DOPE (Dioleoylphosphatidylethanolamine) به مجموعه فسفولیپیدها اضافه شد. با عبور هر دو نوع لیپوزوم از فیلتر پلی کربنات لیپوزوم هایی با اندازه مشخص برابر 1000، 400 و 100 نانومتر تهیه شدند. جهت تعیین ویژگی های لیپوزوم های حاصله ابتدا اندازه این لیپوزوم ها به وسیله particle size analyzer و سپس درصد احتباس آنها در طی زمان تا دو ماه تعیین شد. در نهایت اثرات ایمونوساپرسیوی این لیپوزوم ها و محلول مایی سیکلوسپورین به صورت in vitro با کشت سلول های T انسانی با استفاده از تست MTT[3-(4,5- dimethylthiazol-2-yl)-2, 5- diphenyl terazolium bromide] مورد بررسی و مقایسه قرار گرفت.
بررسی میکروسکوپی فرمولاسیون های لیپوزومی نشان داد که لیپوزوم ها حاصل MLV (Multi Lamellar Vesicle) می باشند و اندازه لیپوزوم های غیر فوزوژنیک و فوزوژنیک به ترتیب برابر1.760±0.006 و 2.122±0.04 میکرومترمی باشد. درصد احتباس لیپوزوم های غیر فوزوژنیک و فوزوژنیک به صورت MLV در زمان تهیه به ترتیب برابر 79.71±3.00 و85.67±9.46 درصد بود و کاهش اندازه لیپوزوم ها تاثیری بارزی بر روی درصد احتباس نداشت. بررسی اثرات ایمونوساپرسیوی به وسیله تست MTT نشان داد که لیپوزوم های فوزوژنیک نسبت به لیپوزوم های غیر فوزوژنیک و محلول مایی سیکلوسپورین به مراتب اثرات مهاری بیشتری بر روی تکثیر سلول های T دارند. مقدار IC50 جهت لیپوزوم های فوزوژنیک MLV، با اندازه 1000، 400 و 100 نانومتر به ترتیب برابر6.151×10-6، 4.123×10-5، 1.461×10-4 و 1.276× 10-4 mM بود.
در طی این بررسی امکان تهیه لیپوزوم های حاوی سیکلوسپورین با درصد احتباس بالا و نسبتا پایدار حاصل شده است که نتایج نشان می دهد که لیپوزوم های فوزوژنیک یک سامانه دارورسانی مطلوب جهت سیکلوسپورین محسوب می شود