معرفی باکتری همزیست داخلی در قارچ میکوریز آربوسکولار Gigaspora margarita در ایران

در این تحقیق، وجود باکتری همزیست داخلی در برخی از تشتک های کشت درون شیشه ای قارچ Gigaspora margarita از طریق مورفولوژیکی و مولکولی مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور اقدام به جداسازی اندام های مختلف قارچ شامل اسپور، ریسه های رویشی، سلول های کمکی و ریشه های میکوریزایی شده قارچ در شرایط کشت درون شیشه ای گردید. جهت حذف آلودگی های سطحی از ساختارهای قارچی شامل هیف ها، اسپورها و سلول های کمکی، تمامی اندام های قارچی ضدعفونی سطحی شده و جهت اطمینان از عدم وجود آلودگی سطحی توسط کیت ارزیابی قوه نامیه باکتریایی مورد بررسی قرار گرفتند. اندام های قارچی خرد شده، سپس محتویات سیتوپلاسمی آن رنگ آمیزی گردید. باکتری های زنده زیر نور آبی میکروسکوپ فلورسنت به رنگ زرد تا سبز روشن و میله ای شکل و باکتری های مرده به رنگ قرمز مشاهد شدند. باکتری های همزیست داخلی در اندام های مختلف قارچ شامل اسپورها، لوله تندشی، هیف های خارج ریشه ای و سلول های کمکی مشاهده شد. همچنین سلول های باکتریایی در حال تقسیم در تمامی اندام های قارچی مورد بررسی به ویژه در اسپورهای در حال تندش قابل تشخیص بود. نتایج بررسی مولکولی با استفاده از مجموعه آغازگرهای اختصاصی نیز حاکی از وجود باکتری همزیست داخلی در اندام های مختلف قارچ در تعدادی از تشتک های کشت درون شیشه ای G. margarita شامل اسپورها، میسلیوم ها، سلول های کمکی و ریشه های میکوریزایی بود. در عین حال، در برخی دیگر از تشتک های قارچ، اثری از پیکره های باکتریایی همزیست به چشم نمی خورد که نشان دهنده تفاوت در بین نمونه های قارچی از نظر حضور یا عدم حضور باکتری همزیست بود.