القای همزمانی سیکل سلولی در سلول های گرانولوزای گوسفند در محیط آزمایشگاه

بررسی روش های موثر همزمان سازی سیکل سلولی در فاز G0/G1 برای سلول های گرانولوزای گوسفند این مطالعه به روش مطالعه مداخله ای از نوع تجربی انجام شد. سلول های گرانولوزا با روش آسپیره کردن تخمدان به دست آمده و در محیط DMEM محتوی 15 درصد سرم (FBS) کشت داده شدند. پس از رسیدن سلول ها به 70 تا 80 درصد confluency محیط کشت سلول ها در کشت اولیه و پاساژ پنجم در گروه های حذف سرم به ترتیب با محیط 5/0 درصد سرم به مدت 24، 48 و 72 ساعت و درگروه تیمار با میموزین با محیط حاوی 5/0 میلی گرم میموزین به مدت 24 ساعت تعویض شد. در گروه آخر نیز کشت سلول ها در محیط اصلی به مدت 4 روزدیگر ادامه یافت (گروه confluency). سپس میزان توقف سیکل سلولی در فاز G0/G1 بعد از تیمار با استفاده از روش فلوسیتومتری، اثر تیمار بر تکثیر و آپوپتوز سلول ها با استفاده از روش نشاندار کردن با Brdu و روشTUNEL بررسی شد.
پس از 24 ساعت کاهش سرم در کشت اولیه و پاساژ پنجم تعداد سلول های فاز G0/G1، میزان تکثیر سلول ها و درصد سلول های آپوپتوز شده با گروه confluency مشابه بود. با کاهش سرم به مدت 48 و 72 ساعت درصد سلول های موجود در فاز G0/G1 به میزان قابل توجهی افزایش یافت (به ترتیب 83 و85 درصد در کشت اولیه و 89 و90 درصد در پاساژ پنجم). تیمار سلول ها با میموزین نیز باعث افزایش درصد سلول های موجود در فاز G0/G1 شد (p<0.05). درصد سلول های آپوپتوز شده پس از کاهش سرم به مدت 24 و 48 ساعت و تیمار سلول ها با میموزین نسبت به گروه confluency در هر دو گروه کشت اولیه و پاساژ پنجم چندان افزایش نداشت. اما 72 ساعت کاهش سرم باعث آپوپتوز سلول ها به شکل معنی دار شد (p<0.05).
کاهش سرم به مدت 48 ساعت و استفاده از میموزین به مدت 24 ساعت درصد سلول های موجود درفاز G0/G1 را افزایش می دهد و همزمان تعداد سلول های آپوپتوز شده نیز قابل قبول است.