تولید آنتی بادی ضد لیپوپلی ساکارید توسط لنفوسیت های B پریتونئال و طحال موش Balb/c در شرایط آزمایشگاه

تحت گروه لنفوسیتی CD5+ B-1 در مواقع لزوم قادر به تولید آنتی بادی های طبیعی با خاصیت واکنشی متعدد بوده و اصلی ترین لیگاند آنها، لیپوپلی ساکارید (LPS) است. از آنجایی که تولید آنتی بادی ها در شرایط آزمایشگاهی و خارج از بدن موجود زنده می تواند کاربرد بسیاری در تکنولوژی تخلیص مواد داشته باشد، این تحقیق با هدف جداسازی، کشت و تعیین غلظت آنتی بادی در مایع رویی کشت این لنفوسیت ها انجام شد.

این تحقیق با طراحی اکتشافی انجام گردید. با خون گیری مستقیم از قلب، پرفیوژن طحال و خارج سازی سلول های آن و لاواژ پریتونئال موش های نژاد Balb/c سلول ها گرفته شدند و با کمک گرادیان فایکول و ستون نایلون وول، لنفوسیت های B تخلیص گردیدند و در دو گروه مورد و شاهد در محیط کامل کشت سلولی توسط LPS تحریک شدند و در سه زمان 24،48 و 72 ساعت در انکوباسیون قرار گرفتند. مایع رویی کشت به منظور اندازه گیری غلظت IgM با تکنیک الایزا سنجیده و فعالیت حیاتی و قدرت تکثیر توسط آزمون MTT بررسی شد. بررسی های ایمونوفنوتایپینگ برای تایید خلوص سلول ها به کمک مارکر CD3 و CD5 صورت پذیرفت.

کشت 24 ساعته لنفوسیت ها در دو ارگان طحال و پریتوئن، بالاترین فعالیت ترشحی IgM را داشتند که اختلاف معنی داری را با گروه های شاهد نشان دادند. در بررسی ایمونوفنوتایپینگ، لنفوسیت های B تخلیص شده از پریتوئن در مقایسه با طحال و خون، درصد بالاتری از مارکر CD5 را نشان دادند.

سلول های پریتوئن و طحال منبع بسیار خوبی برای تهیه IgM با اختصاصیت متعدد در شرایط داخل لوله ای آزمایشگاهی می باشند. تخلیص این سلول ها و فراهم نمودن شرایط مناسب کشت سلولی می تواند راهگشای انجام مطالعات جامع تری باشد.