تولید ویتامین 12B غیرنشان دار و نشان دار توسط باکتری استرپتومایسس گریزئوس

در این کار تحقیقاتی، تولید ویتامین 12B نشان دار با استفاده از گونه ای از اکتینومیست در یک محیط کشت جدید به روش تخمیر ناپیوسته مورد بررسی قرار گرفته است. پس از تولید و آزادسازی ویتامین 12Bاز سلول های میکروبی، محلول حاوی ترکیبات کوبالامین روی ستونی از رزین XAD-4 تثبیت شده و ستون توسط محلول های مختلف شسته شد. مقدار ویتامین 12B موجود در محلول خروجی از ستون، به روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا اندازه گیری شد و جهت تایید وجود ترکیبات کوبالامین در نمونه ها، از روش کروماتوگرافی لایه ی نازک استفاده گردید. نتایج نشان داد که میزان تولید ویتامین 12B توسط این میکروارگانیسم 1456 میکروگرم در لیتر است. اتانول و استون، به عنوان بهترین محلول های شستشوی ستون برای جداسازی ویتامین 12B تعیین شدند. اندازه گیری های کروماتوگرافی لایه ی نازک نشان داد که مقادیر Rf سیانوکوبالامین و متیل کوبالامین تولید شده توسط باکتری با مقادیر استاندارد مطابقت می کنند. فعالیت ویژه ی 12B نشان دار، پس از انجام مراحل واجذب آن با استفاده از عوامل مختلف استن، الکل خالص، الکل 25% و آب، به ترتیب، برابر با 55/8، 90/6، 79/0 و 75/5 بکرل در میلی لیتر اندازه گیری شد. در نهایت، محلولی از 12B نشان دار با فعالیت ویژه ی 99/21 بکرل در میلی لیتر به دست آمد.