Extraction and purification of the H9N2 virus nucleoprotein: A simple and practical method
Message:
Article Type:
Research/Original Article (دارای رتبه معتبر)
Abstract:
Background
Avian Influenza disease annually entails a significant economic loss to the poultry industry around the world. Influenza virus is a polymorphic virus of the orthomyxoviridae family (single-stranded RNA genome), and nucleoprotein (NP) is the structural and internal protein of the virus. The aim of the work was to purify nucleoprotein for further investigations with a simple, low-cost, fast and practical method.
Methods
In this study, H9N2 influenza virus was isolated in specific pathogen-free embryonated chicken eggs by allantoically inoculating 103 to 105 egg-infective doses (EID50) for 9 to 11 days, purified by 10% (W/V) polyethylene glycol (PEG) 6000 with a sucrose gradient of 60% to 30%. The influenza virus proteins were collected and prepared as fractions by preparative electrophoresis. Finally, the purified NP was subjected to sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and Western blot procedures.
Results
The protein analysis with SDS-PAGE and silver nitrate staining indicated that the desired samples contained purified nucleoprotein and lacked other viral proteins. The results of the investigation of lyophilized fractions containing nucleoprotein on the SDS-PAGE revealed the absence of viral RNA in nucleoprotein and its high purity.
Conclusion
According to this study, purified nucleoprotein can be used to produce nucleoprotein vaccines, as well as to study structural, molecular and diagnostic and therapeutic materials.
Language:
English
Published:
Medical Journal Of the Islamic Republic of Iran, Volume:32 Issue: 1, Winter 2018
Pages:
754 to 759
magiran.com/p1935548  
دانلود و مطالعه متن این مقاله با یکی از روشهای زیر امکان پذیر است:
اشتراک شخصی
با عضویت و پرداخت آنلاین حق اشتراک یک‌ساله به مبلغ 990,000ريال می‌توانید 70 عنوان مطلب دانلود کنید!
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی نامحدود همه کاربران به متن مطالب تهیه نمایند!
توجه!
  • حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران می‌شود.
  • پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانه‌های چاپی و دیجیتال را به کاربر نمی‌دهد.
دسترسی سراسری کاربران دانشگاه پیام نور!
اعضای هیئت علمی و دانشجویان دانشگاه پیام نور در سراسر کشور، در صورت ثبت نام با ایمیل دانشگاهی، تا پایان فروردین ماه 1403 به مقالات سایت دسترسی خواهند داشت!
In order to view content subscription is required

Personal subscription
Subscribe magiran.com for 50 € euros via PayPal and download 70 articles during a year.
Organization subscription
Please contact us to subscribe your university or library for unlimited access!