بهینه سازی القای سوسپانسیون سلولی در گون مولد کتیرا (Astragalus verus)

گون Astragalus verus یکی از گونه های خوب برای تولید کتیرا است. این مطالعه با هدف بهینه سازی کشت سوسپانسیون سلولی در این گیاه انجام شد. ابتدا بهینه سازی کالوس زایی و سپس بهینه سازی سوسپانسیون سلولی انجام شد. آزمایش کالوس زایی در قالب فاکتوریل با ریزنمونه های ریشه، هیپوکوتیل و کوتیلدون در محیط کشت MS حاوی BAP در ترکیب با 2,4-D و NAAدر پنج تکرار انجام شد. در آزمایش بهینه سازی سوسپانسیون سلولی، کالوس های حاصل از محیط کشت NAA و 2,4-D در قالب طرح پایه کاملا تصادفی با 16 تیمار هورمونی در سه تکرار بررسی شدند. همچنین کاربرد تیمار های تاریکی، اسیدآسکوربیک، پلی وینیل پیرولیدون و کلات کننده آهن EDTA جهت کنترل ترکیبات فنولی بررسی شد. بیشترین درصد کالوس زایی در محیط کشت 2,4-D از ریزنمونه ریشه با میانگین 67 درصد بدست آمد. بهترین تیمار هورمونی سوسپانسیون سلولی شامل سه میلی گرم در لیتر2,4-D در ترکیب با 5/0 میلی گرم در لیتر Kin با میانگین 277/0 زنده مانی، و 040/0 گرم وزن خشک (در پنج میلی لیتر) بود. در مطالعه تاثیر مهار کننده های قهوه ای شدن بیشترین وزن خشک از تیمار 100 میلی گرم در لیتر اسید اسکوربیک با میانگین 76/0گرم (در پنج میلی لیتر) بدست آمد که در جلوگیری از قهوه ای شدن بسیار موثر بود. نتایج این پژوهش نشان داد که 2,4-D می تواند به تنهایی جهت القای کالوس مناسب و در ترکیب با Kin برای تولید سوسپانسون سلولی گون قابل استفاده باشد. همچنین مشخص شد که اسید اسکوربیک می تواند به خوبی فرایند قهوه ای شدن سلول های سوسپانسیون سلولی را کنترل نماید. نتایج این مطالعه می تواند جهت تولید درون شیشه ای کتیرا مورد استفاده قرار گیرد.