جداسازی و تعیین خصوصیات باسیلوس های تولید کننده اندوتوکسین های حشره کش از خاک شمال ایران

هدف اصلی از انجام این مطالعه، جداسازی و تعیین خصوصیات آن دسته از باکتری های اسپورزای خاک می باشد که طی فاز سکون می توانند پروتئین های کریستالی پارا-اسپورال علیه لارو فلس بالان تولید کنند. دو روش مختلف برای جداسازی سویه های اسپورزا مورد استفاده قرار گرفت. از واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) برای شناسایی محتوای ژن های cry در سویه های جداسازی شده و از روش تعیین ترادف 16S rRNA برای شناسایی سویه های باکتریایی استفاده شد. کارایی سویه ها بعنوان حشره کش در یک آزمون زیست سنجی با استفاده از لارو حشرات انجام شد. با توجه به وجود کریستال های ذخیره ای و الگوهای الکتروفورزی (SDS-PAGE) ، ده سویه باکتریایی از 200 نمونه خاک جداسازی شد. آنالیز مخلوط های کریستال-اسپور با کمک SDS-PAGE طیف وسیعی از پروتئین ها با وزن مولکولی بین 11 تا 230 کیلودالتون را نشان داد. داده های آنالیز PCR نشان داد که فقط دو سویه RIPI6 و RIPI18 واجد ژن cry3 می باشند. همچنین، فقط سویه های RIPI21 و شاهد (باسیلوس تورنجیینسیس کورستاکی) واجد ژن cry1 بودند. ترادف یابی ژن های 16S rRNA تمام سویه های جداسازی شده وجود یک انطباق حداقل 96 درصدی با سویه های باسیلوس تورنجیینسیس ثبت شده در بانک ژنی را نشان داد. نتایج آزمون های زیست سنجی نشان دهنده کارایی سویه های RIPI7, 10 , 22 در کشتن لاروهای Anagasta kuehniella و Plutella xylostella بود. به طور خلاصه می توان گفت که برای کنترل بیولوژیک آفات گیاهی در شمال ایران می توان برخی از گزینه های باکتریایی را نیز مورد توجه قرار داد.