مطالعه اجزای آلرژی زای کلادوسپوریوم هرباروم با روش ایمونوبلاتینگ

مطالعات متعددی بر روی آنتی ژن ها کلادوسپوریوم هرباروم (ک. هرباروم) نشان داده است که این آنتی ژن ها نقش مهمی در تولید IgE اختصاصی در افراد آتوپیک داشته و موجب بدتر شدن وضعیت کلینیکی این گونه بیماران از جمله درماتیت آتوپیک می شوند. لذا در مطالعه حاضر اجزای آلرژی زای ک. هرباروم با روش ایمونوبلاتینگ مورد بررسی قرار گرفته است.
ک. هرباروم در محیط سابورو دکستروز آگار کشت داده شد. توده میسیلیومی جمع آوری شده با استفاده از ازت مایع و دانه های شیشه ای (glass bead) شکسته شد. سپس نمونه ها سانتریفیوژ شده و محلول رویی (عصاره خام) با روش SDS-PAGE تفکیک شد. پس از انجام بلاتینگ، اجزا پروتئینی با سرم بیماران مورد مطالعه مجاور شدند و باند های پاسخ دهنده به IgE با آنتی بادی های ضد IgEانسانی که به وسیله آنزیم نشان دار شده بود، در یک سوبسترای رنگی نمایان شد.
در SDS-PAGE عصاره خام ک. هرباروم تعداد 16 باند با وزن مولکولی بین 15.1 تا110 کیلودالتون را نشان داد. باند های 15.1، 18.4، 25.1، 36.3، 45 و 54 کیلودالتونی به عنوان باندهای قوی معین شدند. در ایمونوبلاتینگ، باندهای پروتئینی با وزن های مولکولی 15.1، 18.4، 42 و 110 کیلودالتونی با IgE سرم های بیماران مبتلا به درماتیت آتوپیک واکنش قوی نشان دادند.
نتایج فوق نشان داد که باندهای قوی در SDS-PAGE، بیشترین واکنش را با آنتی بادی های IgE ضد ک. هرباروم در تکنیک ایمونوبلاتینگ داشته اند. لذا قدرت باند ها در SDS-PAGE می تواند در پاسخ به IgE اثرگذار باشد. مانند دیگر مطالعات، ما نیز تصور می کنیم که آنتی ژن های ک. هرباروم می تواند شروع کننده واکنش های آلرژیک در بیماران مبتلا به درماتیت آتوپیک باشد.