علیرض افشاری فر
-
در این پژوهش به منظور به دست آوردن گیاهان تراریخته ی نارنج، از ریزنمونه های اپی کوتیل و هیپوکوتیل نارنج استفاده و بهبود اندام زایی مستقیم و تولید شاخساره در ریزنمونه ها با استفاده از تیمارهای مختلف بررسی شدند. تراریزش از طریق همکشتی ریزنمونه ها با Agrobacterium tumefaciens سویه EHA 105 حامل وکتور pFGC 5941 و ژن کد کننده ی پوشش پروتیینی ویروس تریستزای مرکبات (CTV) انجام شده. پس از تراریزش، ریزنمونه هابه محیط کشت انتخابی حاوی علف کش بستا با ترکیبی از سطوح تنظیم کننده رشد BAP(0، 1 و 2 میلی گرم در لیتر) و NAA (0، 0/25 و 0/5) منتقل شدند. اثر زخم زدن بر اندام زایی مستقیم و تولید شاخساره و اثر استفاده از وکیوم بر کارایی تراریزش، بررسی شدند. تایید تراریخته بودن شاخساره ها در محیط انتخابی حاوی علف کش بستا و انجام واکنش پی.سی.آر با ژن های اختصاصی صورت گرفت. بهترین کارایی اندام زایی یا تولید شاخساره (57 درصد) با استفاده از ترکیب تنظیم کننده های رشد به میزان 2 میلی گرم در لیتر BAP و0/25 میلی گرم در لیتر NAA حاصل شد ضمن این که، زخم زدن اثر معنی داری بر تولید شاخساره نداشت. بالاترین میزان شاخساره های تراریخته به میزان11/25درصد در تیمار وکیوم به دست آمد. در نهایت شاخساره های تراریخته بر روی دانهال های رشد یافته در شرایط in vitro ریزپیوند شدند.
کلید واژگان: Agrobacterium tumefaciens, اپی کوتیل, اندام زایی مستقیم, تنظیم کننده های رشد, زخم زنیin this study transgenic plants of sour orange (C. aurantium) that is an important citrus rootstock were produced by Agrobacterium-mediated transformation. Epicotyl and hypocotyl segments-derived explants were co-cultured with Agrobacterium strain EHA105 carrying pFGC5941 plasmid containsing CTV coat protein (p25) gene. One of the main objects of present research was to improve the direct in vitro organogenesis efficiency in C. aurantium. Therefore different combination of BAP (0, 1, 2 mg/L) and NAA (0, 0.25, 0.5 mg/L) were used in selective medium to culture transformed explants. The highest regeneration (57%) was obtained from explant treated with 2 mg/L BAP and 0.25 mg/L NAA. Effects of wounding and vacuum infiltration on transformation efficiency were evaluated either. The best transformation efficiency (11.25%) was obtained from explants that were vacuum infiltrated during transformation and subsequently were cultured in medium containing 2 mg/L BAP and 0.25 mg/L NAA. PCR analysis using two different genes were performed to confirm transformation. Micro grafting of transformed shoots were carried out on non-transgenic, in-vitro grown seedlings.
Keywords: Agrobacterium tumefaciens, Direct Organogenesis, Epicotyl, Growth Regulators, Wounding
- در این صفحه نام مورد نظر در اسامی نویسندگان مقالات جستجو میشود. ممکن است نتایج شامل مطالب نویسندگان هم نام و حتی در رشتههای مختلف باشد.
- همه مقالات ترجمه فارسی یا انگلیسی ندارند پس ممکن است مقالاتی باشند که نام نویسنده مورد نظر شما به صورت معادل فارسی یا انگلیسی آن درج شده باشد. در صفحه جستجوی پیشرفته میتوانید همزمان نام فارسی و انگلیسی نویسنده را درج نمایید.
- در صورتی که میخواهید جستجو را با شرایط متفاوت تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مطالب نشریات مراجعه کنید.