فهرست مطالب arsalan afrasiabi
-
زمینه مطالعه
جهت ساخت واکسن هاری دامی از سلول BHK-21 و ویروس سویه پاستور استفاده می شود. اگرچه پروتکل های مختلفی برای خالص سازی در پروسه تولید واکسن پیشنهاد شده است لیکن این پروتکل ها اثرات منفی بر محصول نهایی دارند و نیازمند بهینه سازی می باشند.
هدفدر مطالعه حاضر تلاش شد تا روش تغلیظ و خالص سازی ویروس مورد استفاده جهت ساخت واکسن هاری دامی بهینه سازی گردد.
روش کارابتدا ویروس هاری سویه پاستور در سلول های BHK-21 به مدت 5 روز با کمکDMEM ، 7 درصد سرم جنین گاوی کشت داده شد. سپس خالص سازی با استفاده از فیلتراسیون جریان مماسی (TFF) انجام شد. کیفیت ویروس های خالص سازی شده از طریق تیتراسیون ویروسی و الکتروفورز عمودی سنجیده شد. سپس غیرفعال شدن نمونه ها توسط بتاپروپیولاکتون انجام و در شرایط درون تنی و برون تنی مورد بررسی قرارگرفت. در نهایت، قدرت و کارایی واکسن فرموله شده با روش NIH مورد ارزیابی قرار گرفت.
نتایجمطالعه تیتراسیون ویروسی در نمونه های TFF نشان دهنده افزایش تیتر ویروسی در مقایسه با گروه کنترل بود (05/0<p). تجزیه و تحلیل ژل الکتروفورز عمودی نمونه های خالص شده و تغلیظ شده نشان دادند ویروس هایی که با استفاده از TFF خالص سازی و تغلیظ شده بودند در مقایسه با نمونه های تغلیظ نشده از خلوص بیشتری برخوردارند. علاوه بر این، در مطالعه ارزیابی قدرت و پتانسی واکسن افزایش 10 برابری قدرت و کارایی واکسن نیز مشهود بود.
نتیجه گیری نهاییمطالعه حاضر نشان داد که استفاده از روش TFF برای حجم بالای مایع ویروسی جهت تغلیظ و تخلیص بسیار مناسب است و قابلیت اجرا در مقیاس صنعتی جهت افزایش میزان قدرت و کارایی واکسن تولید شده را دارد.
کلید واژگان: ویروس هاری, تخلیص, فیلتراسیون جریان مماسی (TFF), قدرت و کارایی واکسن, واکسن}BACKGROUNDThe veterinary Rabies vaccine was produced using BHK-21 cells and PV strain. Although various protocols have been suggested for virus purification, they have an adverse effect on the final production and require further optimization.
OBJECTIVESThe present study aimed to optimize the concentration and purification of the virus for rabies vaccine production.
METHODSFirst of all, the Pasteur virus strain (PV) was cultured by using BHK 21 cells with DMEM media contain bovine fetal serum (7 %) for five days. Subsequently, the virus purification was done via tangential flow filtration (TFF) system. The quality of purifying viruses was an assessment with titration and SDS-PAGE. Secondly, the virus inactivation was optimized using Minitab software based on three factors, namely time, temperature, and concentration. Afterwards, the inactivity of the samples was tested on mice. Finally, the virus potency was evaluated by the National Institute of Health (NIH) method.
RESULTSThe viral titration test in TFF samples revealed that viral titer increased in comparison with the control group (P<0.05). The SDS-PAGE analysis of the purified and concentrated samples showed that the purified virus via TFF had a higher purity compared to the not-concentrated samples. Moreover, the NIH test indicated a 10-fold increase in potency result in the TFF group.
CONCLUSIONSThe present study implied that the TFF method is highly suitable for condensation and purification of a high volume of viral fluid and could be applied on an industrial scale to increase the potency of the vaccine produced.
Keywords: Rabies virus, purification, Tangential flow filtration (TFF), Potency, Vaccine}
- در این صفحه نام مورد نظر در اسامی نویسندگان مقالات جستجو میشود. ممکن است نتایج شامل مطالب نویسندگان هم نام و حتی در رشتههای مختلف باشد.
- همه مقالات ترجمه فارسی یا انگلیسی ندارند پس ممکن است مقالاتی باشند که نام نویسنده مورد نظر شما به صورت معادل فارسی یا انگلیسی آن درج شده باشد. در صفحه جستجوی پیشرفته میتوانید همزمان نام فارسی و انگلیسی نویسنده را درج نمایید.
- در صورتی که میخواهید جستجو را با شرایط متفاوت تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مطالب نشریات مراجعه کنید.