فهرست مطالب kambiz najafi
-
زمینه و اهداف
مطالعه حاضر با هدف بررسی شرایط بهینه برای استخراج و خالص سازی آنزیم پنی سیلیناز انجام شد. منبع آنزیم، با
کتری 6346Bacillus licheniformis بدست آمده سازمان پژوهش های علمی - صنعتی ایران بود.مواد و روش کارباکتری B. licheniformisدر محیطی حاوی نمک های معدنی، ترکیبات نیتروژن دار و منابع کربنی کشت داده شد. بعد از برداشت و آماده سازی سوسپانسیون باکتری، تخریب دیواره سلولی باکتری به روش تلفیقی از لیزوزیم و اولتراسونیکاسیون ضعیف جهت تهیه عصاره خام سلولی، صورت گرفت. سپس با روش کروماتوگرافی و الکتروفورز مقدار آنزیم تعیین شد. علاوه بر این، بهترین دمای رشد و بهترین زمان انکوباسیون بر اساس میزان جذب نمونه ها در طول موج 240 نانومتر، میزان فعالیت آنزیمی ، بهینه سازی شدت هوادهی، بهینه سازی زمان تولید آنزیم و pH بهینه مشخص شد.
یافته هادر هر لیتر کشت حدود 8 گرم سلول بازیابی شد. pH بهینه 6/5 تعیین گردید. ارزیابی پایداری حرارتی آنزیم در زمان های مختلف نشان داد که، آنزیم برای بیش از 1 ساعت در دمای 20 تا 45 درجه سانتی گراد پایدار است، در حالی که در 60 درجه سانتی گراد در 10 دقیقه غیرفعال می شود. همچنین بهترین زمان انکوباسیون برای باکتری 9 ساعت در دمای 30 درجه سانتی گراد است. همچنین از لحاظ شدت هوا دهی بالاترین میزان تولید آنزیم در ارلن های 250 میلی لیتری با حجم 50 میلی لیتر محیط کشت، در دورRPM 200، به دست آمد. میزان تولید آنزیم در این شرایط به unit/ml 2394 رسید، هوا دهی بیشتر باعث اثر مهار کنندگی اکسیژن و کاهش فعالیت آنزیم تولید شده، گردید.
نتیجه گیریباکتری B. licheniformis میکروارگانیسم مناسبی برای استخراج آنریم پنی سیلیناز است.
کلید واژگان: پنی سیلیناز, باسیلوس لیچنی فورمیس, خالص سازی, شرایط بهینه}Background and ObjectiveThe present study aimed to evaluate the optimum conditions for extracting and purifying penicillinase enzyme. The enzyme source was Bacillus licheniformis 6346 obtained from the Iranian Research Organization for Science and Technology.
Materials and MethodsB. licheniformis was cultured in a medium containing mineral salts, nitrogen compounds, and cultured carbon sources. Following the harvesting and preparation of bacterial suspension, the destruction of the bacterial cell wall and crude cell extraction was completed using a combination of lysozyme and weak ultrasonication. Afterward, enzyme amount was determined utilizing chromatography and electrophoresis. Furthermore, the optimum growth temperature and incubation time were assessed based on the absorbance of samples at 240 nm, enzyme activity, aerification intensity optimization, enzyme production time, and optimum pH.
ResultsApproximately 8 g of cells were retrieved in one liter of culture. The optimum pH was determined as 6.8. The heat stability evaluation of the enzyme at different times revealed that the enzyme was stable for more than 1 h at 20°C-45°C, while it is inactivated in 10 min at 60°C. Moreover, the best incubation time for this bacterium was obtained as 9 h at 30°C. In terms of aerification intensity, the highest enzyme production rate of 2394 U/mL was achieved in a 250 mL Erlenmeyer flask with a 50 mL culture medium at 200 RPM. More aerification led to the inhibitory effect of oxygen and reduced enzyme activity.
ConclusionOur findings showed that the bacterium B. licheniformis 6346 can be used for producing penicillinase enzyme in optimum conditions.
Keywords: Bacillus licheniformis, Optimum conditions, Penicillinase, Purification}
- در این صفحه نام مورد نظر در اسامی نویسندگان مقالات جستجو میشود. ممکن است نتایج شامل مطالب نویسندگان هم نام و حتی در رشتههای مختلف باشد.
- همه مقالات ترجمه فارسی یا انگلیسی ندارند پس ممکن است مقالاتی باشند که نام نویسنده مورد نظر شما به صورت معادل فارسی یا انگلیسی آن درج شده باشد. در صفحه جستجوی پیشرفته میتوانید همزمان نام فارسی و انگلیسی نویسنده را درج نمایید.
- در صورتی که میخواهید جستجو را با شرایط متفاوت تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مطالب نشریات مراجعه کنید.