فهرست مطالب mozdarani h
-
مقدمه ناباروری در مردان، عامل %30 ناباروری زوجین در بین دلایل دیگر می باشد. اختلال در مواد ژنتیکی حایز اهمیت است زیرا موجب انتقال ناقص اطلاعات وراثتی به جنین می شود. به همین دلیل، حفظ تمامیت و صحت DNA در هسته اسپرم، برای انتقال تمام و کمال ماده وراثتی از نسلی به نسل دیگر بسیار مهم است. هدف از این تحقیق ارزیابی و مقایسه میزان آسیب زمینه در DNA اسپرم چهار گروه افراد سالم و نابارور بوده است.روش کاربه این منظور نمونه اسپرم 30 نفر از هر گروه (مردان سالم و سه گروه از مردان نابارور) با روش سنجش ستاره دنباله دار (Comet assay) قلیایی مورد بررسی قرار گرفت. در این روش، ابتدا سلول ها در بستری از ژل آگارز روی لام قرار گرفته و پس از لیز در بافر در شرایط قلیایی الکتروفورز شدند. DNA آسیب دیده، تحت جریان الکتروفورز به سمت آند مهاجرت کرده و شکلی شبیه به یک ستاره دنباله دار را در زیر میکروسکوپ فلوئورسانس ایجاد نمود که به طور چشمی و درجه بندی استاندارد مورد بررسی قرار گرفت. میزان آسیب در DNA هر یک از گروه ها تعیین و تفاوت از نظر آماری با استفاده از آزمون های ANOVA و Post hoc test با یکدیگر مقایسه شد.نتایج درصد فراوانی آسیب DNA در اسپرم افراد سالم، کمتر از دیگر گروه های مورد بررسی بوده است. دو گروه اولیگواسپرم و اولیگو استنواسپرم به ترتیب از نظر میزان آسیب موجود در DNA بعد از گروه سالم قرار دارند. از مقایسه آماری به عمل آمده بین درصد آسیب DNA تعیین شده برای گروه ها مشخص شد که گروه های اولیگواسپرم و اولیگواستنواسپرم و استنواسپرم در مقایسه با گروه سالم از نظر آسیب زمینه در DNA با P<0.05 تفاوت معنی داری را نشان می دهند. در گروه افراد نابارور بیشترین آسیب زمینه در DNA مربوط به نمونه های استنواسپرم بوده است.نتیجه گیرینتایج بیانگر آن است که آسیب زمینه در DNA اسپرم افراد نابارور، بیشتر از افراد سالم است و در بین افراد نابارور، افراد آستنواسپرم آسیب DNA بیشتری را نشان می دهند. به نظر می رسد آسیب بیشتر مشاهده شده در افراد نابارور ناشی از کمبود سیستم آنتی اکسیدانتی در مراحل مختلف اسپرماتوژنز و مایع منی باشد. وجود عوامل آنتی اکسیدان مانع ایجاد آسیب در DNA توسط مواد اکسیداتیو می شود.
کلید واژگان: اسپرم مردان, آسیب DNA, روش سنجش ستاره دنباله دار (کامت), ناباروری}IntroductionMale infertility constitutes the primary cause of infertility for up to 30% of couples amongst many other reasons. Genetic disorders are too important because DNA integrity in sperm is necessary for having healthy next generation. The aim of this study was to evaluate the baseline DNA damage in sperm samples obtained from normal and infertile individuals.MethodsBaseline DNA damage in spermatozoa from fertile (n=30) and infertile (n=90) individuals was compared using a modified alkaline single cell gel electrophoresis (comet assay).This technique was used to assess DNA integrity in the cells by measuring damages reflected as strand break under alkaline conditions. The cells were embedded in agarose on glass slides followed by lysis of the cell membranes after which, damaged DNA strands migrate under electrophoresis from nucleus towards the anode and deposited to one side giving the appearance of a tail. DNA damage in each group was calculated following visual observation and grading of comets under a fluorescence microscope. The significance of inter-group differences was statistically evaluated using analysis of variance (ANOVA) and Post hoc tests.ResultsResults indicate that the average DNA damage in normal sample is less than any other groups. Samples from oligospermic, oligoasthenospermic and asthenospermic patients showed various degrees of DNA damage significantly different from normal (p<0.05). The highest degree of DNA damage was seen in asthenospermic samples.ConclusionDNA damage in infertile individuals is found to be higher than normal. The reason for this observation may be due to a deficiency in antioxidants which is essential present during spermatogenesis. The presence of antioxidants prevents DNA damages in sperms due to oxidative agents. -
برخی از عوامل محیطی موتاژن، موجب ناپایداری ژنومی شده و افزایش استعداد آسیب پذیری DNA سلولی را موجب می شوند. نمونه ای از این موتاژن ها، میتومایسین (MMC-Mitomycin C) C است که به عنوان یک آلکیل کننده، به DNA متصل شده و سلول های حساس به واکنش های احیا را تحت تاثیر قرار می دهد. این دارو در شیمی درمانی کاربرد وسیعی داشته و در درمان برخی از تومورها، موثر شناخته شده است. مطالعه ناپایداری ژنومی سلول های طبیعی در حضور غلظت های پایینMMC، علاوه بر تعیین میزان آسیب پذیری DNA، نشان دهنده میزان اثرات احتمالی این دارو بر سلول های طبیعی، در بیماران شیمی درمانی شده است. بدین منظور، استفاده از (Sister chromatid exchange) SCE که تعداد تعویض های کروماتید خواهری را در کروموزوم های متافازی نشان می دهد، روش قابل قبولی برای بررسی ناپایداری ژنومی است. در عمل، تعداد 105 سلول لنفوسیتی جداسازی شده با فایکول (Ficol) را، در هر یک از 5ml محیط کشت کامل 20-15) F12 درصد (FCS حاوی میتوژن PHA(فیتوهماگلوتنین)، که دارای غلظت های3ng/ml، 6ng/ml وMMC 9ng/ml بودند، به همراه یک نمونه بدون MMC به عنوان شاهد، کشت داده و بعد از 24 ساعت، محلولBromodeoxy uridine) BrdU) در غلظت های خاص، به محیط های کشت اضافه شده و پس از 48 ساعت، سلول های میتوزی در مرحله متافاز با استفاده ازکلشی سین متوقف گردید و با روش SCE رنگ آمیزی شده و از نظر تعداد تبادلات کروماتید خواهری مورد ارزیابی قرار گرفت. مطالعه صد پلاک متافازی تهیه شده، میانگین درصد SCE را در سلول های شاهد 3.35 درصد و در سلول های تیمار شده با غلظت های 3ng/ml، 6ng/ml و MMC 9ng/ml به ترتیب 5.43، 7.1 و 8.13 نشان داد. آنالیز نتایج حاصله با روش های آماری، معنی دار بودن اختلاف بین گروه مورد و شاهد را نشان داد ((P<0.001با توجه به نتایج حاصل، MMC در غلظت های پایین نیز موجب ناپایداری ژنومی و افزایش SCE گردیده، که در این میان، غلظت 3ng/ml کمترین و غلظت 9ng/ml بیشترین میزان SCE را باعث شده است. با توجه به ارتباط بین میزان SCE و آسیب پذیریDNA، می توان چنین نتیجه گیری نمود که قرارگیری سلول های سالم در معرض MMC زمینه را برای افزایش آسیب پذیری DNA مساعدتر می سازد یعنی ژنوم سلول های طبیعی در بیماران شیمی درمانی شده با MMC، بسیار مستعد آسیب ها و جهش های احتمالی ژن ها است. با توجه به نتایج، برای تقلیل اثرات کارسینوژنی MMC در سلول های طبیعی، استفاده ازغلظت های پایین تر از 3ng/ml مناسب تر به نظر می رسد.
کلید واژگان: میتومایسین c, تبادل کروماتید خواهری, Cancer}Some environmental mutagenic agents cause genomic instability and increase susceptibility of DNA damage. One of them is mitomycin C which is connected to DNA as an alkylating factor and affects susceptible cells to reduction reactions. This drug is used in chemotherapy and treatment of tumors. Study of genomic instability in the presence of different concentrations of MMC can show susceptibility of DNA damage in the patients who are under chemotherapy with this drug. For this purpose, SCE is a qualified method that shows the number of sister chromatid exchanges in the metaphasic chromosomes. The number of 10^5 lymphocytic cells which were separated with ficol, were cultured in media (5ml, F12 15%-20% FCS) that contains mitogen of PHA (Phytohemagglutinin) and MMC in the concentrations of 3 ng/ml, 6 ng/ml and 9 ng/ml and a control sample without MMC. The specific concentration of BrdU was added after 24 hours to cell cultures. Then metaphasic cells were halted in the metaphasic stage with colchicine after 48 hours and were stained with SCE method and were studied for the number of sister chromatid exchanges in each metaphasic plaques. Evaluation of 100 metaphasic plates showed that SCE was 3.35% in the control cells while it was 5.43%, 7.1% and 8.13% in the treated cells with MMC in the concentrations of 3 ng/ml, 6 ng/ml and 9 ng/ml. In view of the results, it is clear than MMC can causes genomic instability even in the low concentrations and it can increase SCE so that the level of SCE is become the most with the concentration of 9 ng/ml and the least with the concentration of 3 ng/ml. In view of relation between SCE and DNA damage, we can conclude that the genome of normal cells will be damaged in the presence of MMC and in the patients who are under chemotherapy with this drug. It means that the genome of cells will become sensitive to mutation in the presence of low concentrations of MMC. Therefore we can postulate that we should use the concentrations of less than 3 ng/ml in order to decrease mutagenic effects of MMC in normal cells. -
علی رغم تحقیقات گسترده ای که در رابطه با آثار بیولوژیک امواج فراصوتی انجام شده است، هنوز در موردآثار بیولوژیک آن به ویژه اثر بر مولکول DNA تردید وجود دارد. از آنجا که هر گونه تغییر در مولکول DNAمی تواند موجب آسیب های کروموزمی شود، بررسی آثار کلاستوژنیک (آسیب های کروموزومی) امواج فراصوتی حایز اهمیت است. در این مطالعه اثر سیتوژنتیک امواج فراصوتی درمانی پیوسته با فرکانس ZMH1 و توان های 5/0، 1 و 5/1 وات بر لنفوسیت های تحریک نشده انسان مورد بررسی قرار گرفت. لنفوسیت های نمونه خون هپارینه با استفاده از محیط جدا کننده «فایکول هایپاک» جداسازی شد و سپس تحت تاثیر امواج فراصوتی قرارگرفت. نمونه های تابش دیده در محیط RPMI 1640 کشت داده شد و سلول ها با فیتوهماگلوتینین تحریک شدند وبا استفاده از سیتوکلازین B سلول های دو هسته ای در مرحله سیتوکیناز متوقف گردیدند. برای هر نمونه فراوانی میکرونوکلئی در 1000 سلول دو هسته ای مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل از بررسی نمونه های شاهد، Shamو نمونه هایی که تحت تابش امواج فراصوتی با توان های مختلف از 5/0 تا 5/1 وات قرار گرفتند، نشان داد که بین گروه Sham و گروه تابش دیده با امواج فراصوتی با توان 5/0 وات اختلاف معنی داری وجود ندارد. فراوانی میکرونوکلئی در سلول هایی که تحت تابش 1 و 5/1 وات امواج فراصوتی قرار گرفتند، اختلاف معنی داری را باگروه شاهد و Sham نشان داد (05/0P<). در مطالعه حاضر به علت کوتاهی زمان تابش، افزایش دما محسوس نبود، لیکن پدیده های مکانیکی امواج فراصوتی شامل آثار شیمیایی که موجب تشکیل رادیکال های آزاد(احتمالا ناشی از پدیده حفره سازی در محیط تابش) می گردد و لرزش های مکانیکی مولکول های بزرگ که ساختمان نسبتا شکننده ای دارند، می تواند نقش عمده ای در ایجاد آسیب کروموزومی در توان های بالاتر امواج فراصوتی داشته باشد.
کلید واژگان: امواج فراصوتی پیوسته, اثر سیتوژنتیک, لنفوسیت انسان, میکرونوکلئی}In spite of wide spread investigations performed, the biological effects of ultrasound waves, specially on DNA molecule has not been fully understood. Since any alteration in DNA molecule can lead to chromosome abnormality, the study of clastogoenic effects of ultrasound is important. In this study, the effect of 1MHz frequency continuous waves with the power of 0.5, 1 and 1.5 Watts on G0- human lymphocytes was investigated. Lymphocytes were separated from heparinized peripheral blood by using lymphocyte separation medium and then were exposed to ultrasound waves. Exposed samples were cultured in RPMI-1640 treated with phytohaemaglutinin. (PHA) and then binuclei cells were harvested using cytochalasin B. For each sample 1000 binuclei were examined for the presence of micronuclei. Results obtained from control, sham control and samples exposed to various ultrasound waves with different powers from 0.5 to 1.5 W showed that there is no statistical difference between the frequency of micronuclei observed for sham, control and samples to 0.5 W. However cells exposed to 1 and 1.5 W ultrasound waves showed significantly higher micronuclei frequency compared to control and sham groups (P<0.05). In the present study, because of short exposure duration, temperature rise and hence thermal effect on cells was negligible. Therefore, mechanical process of ultrasound waves including chemical effects which lead to free radical formation (Probably due to cavitation in exposure field) and mechanical vibration of large molecules which are fragile structures may play a role in chromosomal aberration and micronuclei formation. -
IntroductionThe incidence of chromosomal abnormalities was investigated in untransfered embryos reuslted from in vitro fertilization (IVF) or intracytoplasmic sperm injection (ICSI) procedures.Materials And MethodsA total of 238 embryos of varying morphology between the pronucleated stage and 8-cells were analysed. The cytogenetic method of Dyban was used for chromosome preparation. Embryos were kept in a medium containing 0.2mg/mL colchicine for 4-6 hrs.Then cells were transferred into watch glass contaning hypotonic solution of 1.93% sodium citrate and 0.56% KCl for 25-60 min. Cells were fixed in three different fixatives sequentially, then they were stained in 10% Giemsa and examined with a light microscope at /Far/*/Lat/1000.ResultsThe cytogenetic analysis of 68 embryos resulted from IVF and 70 embryos from ICSI indicate that a total of 89.86% of embryos were cytogenetically abnormal and only 10.14% were normal. In both groups, aneuploidy was found to be the most frequent observed abnormality (43.48%). In addition to that various types of aberrations such as triploidy (2.2%), haploidy (1.5%), mosaicism (29.7%) or structural abnormalities (13.04%) were found.ConclusionThere is a progressive loss of the embryos with chromosomal abnormalities during preimplantation development. The maternal age may have an effect on the chromosome segregation in oocytes causing aneuploid embryos. This study also shows that both healthy and morphologically unhealthy embryos can have either normal or abnormal chromosome complements; therefore the embryo morphology is not always indicative of chromosome status.Keywords: Chromosomal Aberrations, Preimplantation embryo, In Vitro Fertilization}
-
در این تحقیق حساسیت آزمون میکرونوکلئوس برای مانیتورینگ آثار کلاستوژنیک نوترون های سریع در دزهای پایین مورد بررسی قرار گرفت. موش های سوری نر با سن 12 هفته تحت تابش نوترون های سریع صادره از منبع آمرسیوم-برلیوم قرار گرفتند. دزهای دریافتی، 1.5، 2.25، 3.375، 5.06 سانتی گری بود. در زمان های 24، 48 و 72 ساعت پس از تابش دهی، موش ها به روش Cervical dislocation کشته شده و استخوان ران آنها خارج گردید. با استفاده از سرم جنینی گوساله، مغز استخوانشان خارج و سوسپانسیون سلولی تهیه شده، به روش مای گرانوالد گیمسا رنگ آمیزی شد و مورد تحلیل میکروسکوپی قرار گرفت. برای هر نمونه، 2000 سلول پلی کروماتیک اریتروسیت (PCE) و به همین میزان، سلول نوروکروماتیک اریتروسیت (NCE) شمارش شدند و فراوانی میکرونوکلئی در سلول های PCE محاسبه شد. در این بررسی مشاهده شد با افزایش دز تابشی، میزان سلول های PCE واجد میکرونوکلئوس افزایش یافته است. در زمان 24 ساعت با افزایش دز تابشی اختلاف معنی داری بین گروه ها از لحاظ بسامد در MNPCE بوجود آمد (P=0.0003) بطوری که بسامد MNPCE دز 5.06 سانتی گری با گروه شاهد و گروه 1.5 سانتی گری دارای اختلاف معنی داری بود (P=0.05). نتیجه اصلی از این تحقیق گرفته شد آن بود که آزمون میکرونوکلئوس روشی کم هزینه و حساس برای مانیتورینگ آثار کلاستوژنیک پرتوهای LET بالا در دزهای پایین می باشد.
کلید واژگان: میکرونوکلئوس, آثار کلاستوژنیک, نوترون سریع}In this research we examined the sensitivity of micronucleus assay for monitoring clastogenic effects of low dose fast neutrons. Syrian mice (12 weeks old) were irradiated by fast neutrons emitted from a 241Am-9Be source. The absorbed dose was 1.5, 2.25, 3.375 and 5.06 cGy. Mice were scarified by cervical dislocation at different post irradiation times (24, 48 and 72 h). The results obtained show that the frequency of neutron-induced micronuclei in polychromatic erythrocytes (PCES) is significantly higher than those of control groups (P<0.05) at neutron dose used in this experiment. We concluded that micronucleus assay is an effective and also inexpensive method for monitoring clastogenic effects of high LET radiation in low dose levels. -
IntroductionThe incidence of sperm and oocyte premature chromosome condensation (PCC) in the failed fertilized oocytes that were taken after routine in viro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) programs were investigated.Materials And MethodsIn this study, 364 air-dried preparations of failed fertilized oocytes after either IVF or OCSI procedures were analyzed. The zona pellucida of the oocyte was removed by thyrod\rquote s acid. The oocytes then were subjected to a hypotonic solution for 15-20 minute. This solution consisted of sodium chloride. disTilled water and sodium citrate, which resulted in the swelling of the cell. The swelled oocytes were fixed sequentially in three different fixatives then they were stained in 10% Giemsa and examined with light microscope an x1000.ResultsA high frequency of intact sperm head were noticed in the failed fertilized oocytes. The number of intact sperm head was higher in ICSI procedure than IVF (46.5% versus 30.5%), however the difference was statistically not significant. On the Other hand, PCC of the sperm were significantly in ICSI higher than IVF (16.1% gersus 8.8%, P< 0.05). Oecondensed chromatins and degenerated) chromosome were also seen in some oocytes.ConclusionsAn abnormal chromatin decondensation or PCC of sperm head and oocyte nucleus occurs in the failed fertilized oocytes after IVF procedure. Several factors can be associated with the above abnormalities such as the failure of oocyte activation or an immature retrieval of oocytes. The presence of an intact sperm head may indicate that the sperm nucleus is not accessible to ooplasmic factors, where the sperm nucleus should interact with chromosome condensing factors. This may result in the induction of PCC because of the non-activated oocyte has remained in metaphase II.Keywords: Human oocytes, Failed, fertilized oocytes, premature Chromosome Condensation, Sperm head}
-
IntroductionFluorscence in situ hybridization (FISH) enables specific detection of unique sequences of varying length، chromosomal regions or entire chromosomes within metaphase or interphase cells. Recent developments in this technology permit the rapid mapping and ordering of DNA fragments on single metaphase chromosome bands. The technique of FISH incorporates several stages including: probe preparation and labeling، hybridization of probe with chromosome preparation and detection of signal، and imaging. Using this technique chromosomal alterations in ataxia telangiectasia lymphoblastoid cells which are highly sensitive to clastogenic and mutagenic effects of chemnical and physical agents were investigated. Materils andMethodsNormal and A-T cells were grown in RPMI – 1640 medium and irradiated at G2 and G1 phases of the cell cycle. After democolcine treatment and metaphase chromosome preparation، slides were prepared and FISH is performed for all samples using whole chromosome probe for chromosomes 5، 1، 4، 7 and 14. Fifty mitoses were analyzed for each sample by Zeiss fluorescent microscope attached to a computerized programme.ResultsAnalysis of normal and A – T mitoses before and after irradiation revealed a very low frequency of chromosomal abnormalities، for specific chromosomes 5 painted in this study. However، more aberration were found in A-T cells of various chromosomal rearrangements such as translocation، trisomy، Robertsonian translocation and chromatid type breaks.ConclusionIn routine cytogenetic methodologies visualisation of various chromosomal rearrangements is not always possible in a single preparation. Although detection sensitivity of FISH is limited to the specific chromosomes، but as seen for A – T cells، FISH can be considered as one of the most effective method for visualization of various chromosomal alterations. This technique can have wide application not only in human genome mapping and the genome of other organisms، but also in clinical cytogenetics، somatic cell genetics، cancer diagnosis and gene expression studies.Keywords: FISH technique_Chromosomal rearrangements_Ataxia – telangiectasia cells}
-
موضوع مورد بررسی در این طرح تعیین عوامل موثر بر شتاب باروری در شهر تهران بزرگ می باشد، بدین منظور 15 شبانه روز کلیه تولدهای تهران بزرگ در 61 زایشگاه و بیمارستان که شامل 6394 تولد می گردد مورد مطالعه قرار گرفت. در این مطالعه شتاب باروری که تعیین الگوی زمانی تولدها می باشد محاسبه گردید. همچنین تاثیر عواملی چون، سن مادر در هنگام زایمان نوزاد فعلی، سن ازدواج اول مادر و پدر، شغل و تحصیلات مادر و پدر با توجه به وجود داده های ناتمام و با استفاده از مدل کاکس بر احتمال تولد فرزند (i)ام با توجه به داشتن فرزند (1-i)ام محاسبه شد.
Biological behavior of Ornithodorus Tholozani in laboratory has been studied and a procedure using y-irradiation for sterilization of male ticks has been discussed.In this study, we attempted to determine the tolerance level of different stages of tick to various dose limits not lethal for athropod but capable to decrease its sexual activity or lead to its sterility.Results obtained in this study showed that male ticks which recieved a dose of 12000 rad were able to mate with normal females but their eggs did not hatch.However a dose of 16000 rad of y-rays, led to 99% sterility. But because of normal spermathophores, they were able to compete with normal males.
بدانید!
- در این صفحه نام مورد نظر در اسامی نویسندگان مقالات جستجو می‌شود. ممکن است نتایج شامل مطالب نویسندگان هم نام و حتی در رشته‌های مختلف باشد.
- همه مقالات ترجمه فارسی یا انگلیسی ندارند پس ممکن است مقالاتی باشند که نام نویسنده مورد نظر شما به صورت معادل فارسی یا انگلیسی آن درج شده باشد. در صفحه جستجوی پیشرفته می‌توانید همزمان نام فارسی و انگلیسی نویسنده را درج نمایید.
- در صورتی که می‌خواهید جستجو را با شرایط متفاوت تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مطالب نشریات مراجعه کنید.
©2000-2024 magiran.com All Rights Reserved.