به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

تنها با پرداخت 70 هزارتومان حق اشتراک سالانه به متن مقالات دسترسی داشته باشید و 100 مقاله را بدون هزینه دیگری دریافت کنید.

برای پرداخت حق اشتراک اگر عضو هستید وارد شوید در غیر این صورت حساب کاربری جدید ایجاد کنید

عضویت

جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « روش تک عاملی » در نشریات گروه « زیست شناسی »

تکرار جستجوی کلیدواژه «روش تک عاملی» در نشریات گروه «علوم پایه»
  • ماتیاسادات برهانی، زهرا اعتمادی فر *، گیتی امتیازی، عیسی جرجانی
    اهداف: پروتئازهای قلیایی یکی از مهم ترین گروه از آنزیم های صنعتی هستند و کاربردهای فراوانی دارند. هدف مطالعه حاضر یافتن پارامترهای فیزیکوشیمیایی موثر بر تولید آنزیم پروتئاز قلیایی تولیدشده توسط باکتری باسیلوس پسودوفیرموس MSB22 به وسیله روش تک عاملی (OFAT) و سپس بهینه سازی تولید این آنزیم با روش سطح پاسخ در قالب طرح مرکب مرکزی چرخش پذیر بود.
    مواد و روش ها
    در مطالعه تجربی حاضر جداسازی میکروارگانیزم تولیدکننده پروتئاز قلیایی از نمونه های پساب کارخانه های سوسیس و کالباس اصفهان انجام شد. خصوصیات موفولوژیکی و بیوشیمیایی سویه طبق کتاب برگی و به وسیله تکثیر توالی ژن 16S rRNA صورت پذیرفت. تشخیص ژن متالوپروتئاز و سرین پروتئاز قلیایی با واکنش واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) و سنجش فعالیت آنزیم با معرف فولین انجام شد. غربالگری متغیرهای موثر در تولید آنزیم با روش تک عاملی و بهینه سازی تولید با روش سطح پاسخ و بررسی آماری صورت گرفت. نرم افزار MEGA 6 برای آنالیزهای فیلوژنتیکی به کار رفت. به منظور تحلیل داده ها نرم افزار Design Expert 7 و آزمون تحلیل واریانس یک طرفه به کار رفتند.
    یافته ها
    حداکثر تولید پروتئاز که به ترتیب 85/1برابر و 3/45 برابر بیشتر از مقدار تولیدشده حاصل بهینه سازی روش تک عاملی و شرایط غیربهینه بود، با استفاده از 1% قند زایلوز، 3% عصاره گوشت، 4% مایه تلقیح باکتریایی، در pH برابر 10 و دمای 30درجه سانتی گراد به دست آمد. مدل درجه دوم به دلیل بالابودن مقدار ضریب تشخیص پیش بینی، توانایی زیادی در پیش بینی داده های جدید داشت.
    نتیجه گیری
    روش تک عاملی و سطح پاسخ به ترتیب در غربالگری متغیرهای موثر و بهینه سازی تولید آنزیم مفید هستند و ژن های sub I و sub II (ژن های سرین پروتئازهای قلیایی) در باسیلوس پسودوفیرموس MSB22 وجود دارند.
    کلید واژگان: پروتئاز قلیایی, باسیلوس پسودوفیرموس, واکنش زنجیره ای پلی مراز, روش تک عاملی, طرح مرکب مرکزی چرخش پذیر, بهینه سازی}
    M.S. Borhani, Z. Etemadifar *, G. Emtiazi, E. Jorjani
    Aims
    Alkaline protease is one of the most important groups of industrial enzymes with many applications. The aim of this study was to determine the physicochemical parameters affecting the production of alkaline protease enzyme produced by Bacillus pseudofirmus MSB22 by one-factor-at-a-time (OFAT) method and optimize the production of this enzyme by the response surface methodology (RSM) in the form of a rotatable central composite design.
    Materials and Methods
    In the present experimental study, the isolation of microorganism producing alkaline protease from wastewater from sausage and lunch meat factories in Isfahan was carried out. The morphological and biochemical characteristics of the strain were performed according to the Bergey's book and amplification of 16S rRNA gene sequences. Detection of metalloproteinase gene and alkaline serine protease was done by polymerase chain reaction (PCR) reaction and enzyme activity measurement was performed by Folin reagent. Screening of variables effective in enzyme production was done, using one-factor-at-a-time method and optimization was performed by response surface methodology. MEGA 6 software was used for phylogenetic analyses. To analyze the data, the Design Expert 7 software and the one-way analysis of variance were used. Findings: The maximum protease production, which was 1.85 times higher than that of OFAT method and 3.45 times higher than unoptimized conditions was obtained, using 1% w/v xylose, 3% w/v beef extract, 4% v/v inoculation size, pH 10, and 30°C. The established quadratic model had a great ability to predict responses to new observations due to a high value of the predicted determination coefficient.
    Conclusion
    OFAT and RSM strategies are useful screening and optimization methods, respectively and sub I and sub II genes (alkaline serine protease genes) are detected in Bacillus pseudofirmus MSB22.
    Keywords: Alkaline Protease, Bacillus pseudofirmus, Polymerase Chain Reaction, One-factor-at-a-time method, Rotatable central composite design, Optimization}
  • ماتیا سادات برهانی، زهرا اعتمادی فر، عیسی جرجانی
    مقدمه
    پروتئازهای قلیایی خارج سلولی با منشا میکروبی، یکی از مهم ترین آنزیم های صنعتی بوده که کاربردهای فراوان در صنایع مختلف دارند. در این مطالعه، تولید پروتئاز قلیایی باکتری باسیلوس پسودوفیرموس MSB4 با استفاده از روش شناسی سطح پاسخ افزایش یافت.
    مواد و روش‏‏ها: چهار متغیر مستقل موثر، بر اساس نتایج به دست آمده از روش تک عاملی (غلظت زایلوز، غلظت عصاره گوشت، pH و دمای انکوباسیون)، به منظور تجزیه و تحلیل الگوی پاسخ و ساخت مدل با استفاده از روش طرح مرکب مرکزی چرخش پذیر انتخاب شدند. طراحی آزمایش، شامل 30 آزمایش دارای 4 تکرار در نقطه مرکزی می شد و هر متغیر در 5 سطح مختلف بررسی شد. به علاوه حضور ژن های پروتئازهای قلیایی خارج سلولی در سویه MSB4 با استفاده از PCR ارزیابی شد.
    نتایج
    حداکثر مقدار تولید آنزیم (U/ml 397/185) که حدود 2/2 برابر بیشتر از روش تک عاملی و 7/3 برابر بیشتر از شرایط غیر بهینه است، بر طبق نتایج طرح مرکب مرکزی چرخش پذیر با استفاده از 3 درصد عصاره گوشت، اسیدیته 9 و دمای 37 درجه سانتی گراد به دست آمد. همچنین ژن های sub I، II و apr با سایز مورد انتظار (به ترتیب با 319، 486 و 194 زوج باز) مسوول متالوپروتئاز و سرین پروتئاز قلیایی خارج سلولی در سویه MSB4 با استفاده از PCR تشخیص داده شدند.
    بحث و نتیجه گیری: نتایج آزمایشگاهی به خوبی با مدل به دست آمده سازگاری دارند (9982/0 Adj R2:) و این مدل توانایی زیادی برای پیش بینی متغیر پاسخ برای مشاهدات جدید خواهد داشت (9967/0Pred R2: ). نتایج این مطالعه نشان داد که روش تک عاملی و سطح پاسخ به ترتیب روش مفیدی برای غربال گری و بهینه سازی تولید پروتئاز در سویه MSB4 بودند
    کلید واژگان: باسیلوس پسودوفیرموس MSB4, پروتئاز قلیایی, روش تک عاملی, روش شناسی سطح پاسخ, طرح مرکب مرکزی چرخش پذیر}
    Matia Sadat Borhani, Zahra Etemadifar, Eisa Jorjani
    Introduction
    Microbial extracellularalkaline proteases are one of the most important industrial enzymes with a wide range of applications in various industries. In the present study, the production of an alkaline protease by Bacillus pseudofirmus MSB4 was evaluated using response surface methodology (RSM).
    Materials And Methods
    Four significant independent variables were selected, based on the results of one-factor-at-a-time (OFAT) approach (xylose concentration, beef extract concentration, pH and temperature), for rotatable central composite design (RCCD) to analyze the response pattern and to establish a model. The design consisted of total 30 runs, at five levels for each factor, with four replications of the center points. In addition, the presence of extracellular alkaline protease genes was evaluated by using PCR.
    Results
    Maximum protease production (185.397 U/ml), 2.2 times higher than that of OFAT method and 3.7 times higher than the unoptimized conditions, was obtained by using 3% w/v beef extract, at pH 9 and 37ºC according to the results of RCCD. Furthermore, the genes sub I, II and apr with the expected size (319, 486 and 194 bp, respectively) corresponding to the extracellular alkaline serine protease and metalloprotease were detected in MSB4 by using PCR.
    Discussion and
    Conclusion
    The experimental data well fitted the model (Adj R2: 0.9982) and the established quadratic model has a great ability to predict responses for new observations (Pred R2: 0.9967). The results showed that the OFAT and RSM strategies were a useful screening and optimization method for enhancing protease production of MSB4, respectively.
    Keywords: Bacillus pseudofirmus MSB4, Alkaline protease, One, factor, at, a, time strategy, Response surface methodology, Rotatable central composite design}
نکته
  • نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
  • کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
  • در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
درخواست پشتیبانی - گزارش اشکال