جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « Glutamate-specific endopeptidase » در نشریات گروه « زیست شناسی »

تکرار جستجوی کلیدواژه «Glutamate-specific endopeptidase» در نشریات گروه «علوم پایه»

انتخاب همه

بهینه سازی بیان و تخلیص آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز از باکتری هالوترموتولرانتBacillus licheniformis SL-1

صبا بابکان، اعظم صفری، رضوان منیری، مریم حمزه میوه رود، سیاوش دستمالچی

فصلنامه تازه های بیوتکنولوژی سلولی مولکولی، پیاپی 34 (بهار 1398)، صص 23 -30

سابقه و هدف

آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز (EC 3.4.21.19) متعلق به خانواده سرین پروتئازها است. این آنزیم می تواند با هیدرولیز اختصاصی پیوندهای پپتیدی در آنالیز ساختار پروتئین، سنتز پپتیدها به روش فاز جامد و تهیه نانوتیوب ها مورد استفاده قرار گیرد. هدف از این مطالعه تولید آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز باکتری Bacillus licheniformis SL-1 مقاوم به حرارت که بومی ایران است است.

مواد و روش ها

در این مطالعه بیان آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز از باکتری Bacillus licheniformis SL-1 در E. coli BL21 i به صورت پری پلاسمی در دماهای 16، 20 و 37 درجه سانتی گراد و غلظت های 4/0، 1 و 2 میلی مولار القاگر بهینه سازی شد. با توجه به این که آنزیم نوترکیب تولید شده دارای دنباله هیستیدینی (His-tag) است از ستون نیکل سفارز برای تخلیص به روش کروماتوگرافی تمایلی استفاده گردید.

یافته ها

شرایط مختلف برای بیان آنزیم نوترکیب گلوتامات اندوپپتیداز بررسی گردید و بهترین نتایج برای بیان پری پلاسمیک و محلول آنزیم در میزبان E. coli BL21 در دمای 37 درجه سانتی گراد با غلظت 2 میلی مولار IPTG به دست آمد.

نتیجه گیری

بررسی کیفی نتایج حاصل از بیان آنزیم تحت شرایط مختلف حاکی از آن ست که بیان پروتئین نوترکیب وابسته به دما بوده و نیازمند غلظت های بالای القاگرIPTG است. مطالعه حاضر نتایج اولیه بررسی امکان تولید نوترکیب آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز در سیستم بیانی E. coli BL21 است. برای تولید هر چه بهتر آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز سایر پارامترهای موثر مانند سیستم های بیانی و روش های تخلیص جایگزین قابل بررسی و بهینه سازی است.

کلید واژگان: گلوتامات اندوپپتیداز, بیان پری پلاسمی, باکتری B, licheniformis SL-1}

چکیده مشاهده متن مقاله پژوهشی/اصیل زبان: فارسی

Expression Optimization and Purification of Glutamate Endopeptidase from halo-thermo tolerant Bacillus licheniformis SL-1

Saba Babakan, Azam Safary, Rezvan Moniri, Maryam Hamzeh, Mivehroud, Siavoush Dastmalchi

New Cellular & Molecular Biotechnology Journal, Volume:9 Issue: 34, 2019, PP 23 -30

Aims and Background

Glutamate-specific endopeptidase (GSE, EC 3.4.21.19) is belonging to the serine protease family enzymes. A glutamate-specific endopeptidase has the ability to cleavage peptide bonds for the protein structure analysis, solid phase synthesis of peptides and preparation of nanotubes. The purpose of this investigation was to produce glutamate endopeptidase enzyme from the Bacillus licheniformis SL-1from isolated from Aran-Bidgol salt lake in Iran.

Material and Methods

In this study, the expression of glutamate-endopeptidase enzyme from the B. licheniformis SL-1 wasinvestigated in periplasmic spaces of E. coli BL21 in different temperature (16ᴼC, 20ᴼC, 37ᴼC) and different concentrations of inducer (0.4, 1, 2 mM).

Results

Analysis the results demonstrated that periplasmic and soluble expression of glutamate endopeptidase was observed in E. coli BL21at 37ᴼC and 2 mM concentration of IPTG.

Conclusion

Qualitative investigation of the expression results revealed that the expression of the enzyme is temperature-dependant and requires higher concentrations of IPTG. This preliminary study provides the possibility of recombinant enzyme production in E. coli BL21 expression system. In order to produce large scale of this enzyme, other expression systems as well as alternative purification systems can be studied.

Keywords: Glutamate-specific endopeptidase, Periplasmic expression, Halo-thermo tolerant B. licheniformis SL-1}

Abstract View Paper Research/Original Article Original: Persian

نکته

نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.

به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « Glutamate-specific endopeptidase » در نشریات گروه « زیست شناسی »