جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه "transient expression" در نشریات گروه "زراعت"
تکرار جستجوی کلیدواژه «transient expression» در نشریات گروه «کشاورزی»جستجوی transient expression در مقالات مجلات علمی
-
باکتری اسپورزای Bacillus anthracis عامل بیماری سیاه زخم (آنتراکس) است. سه جزء پروتئین شامل پادگن (آنتی ژن) حفاظتی (PA)، عامل کشنده (LF) و عامل آماس (EF) عامل های بیماریزای این باکتری به شمار می آیند. به منظور تولید واکسن بر پایه گیاه، پروتئین امتزاجی دمین چهارPA و دمین یک LF، با سایت برش فورینی به زیر واحد B سم Vibrio cholera (CTB) به عنوان محرک سامانه ایمنی متصل شد. همچنین در این تحقیق برای ساخت ناقل دوتایی از خاصیت ناحیه ′3 و ′5 غیرترجمه شونده ویروس موزاییک لوبیا چشم بلبلی به عنوان تشدیدکننده ترجمه و از ژن بازدارنده خاموشی ویروس موزاییک خیار (2b) استفاده و ترکیب پادگن ساخته شده به گیاه منتقل شد. انتقال موقت سازه ها با کمک اگروباکتریوم به توتون و کاهو انجام و بیان موقت در سطح ترانسکریپتوم از روش PCR RT- و در سطح پروتئوم از روش آزمون الایزا تایید شد.کلید واژگان: الایزا, بیان موقت, CPMV, CMVBacillus anthracis as a spore-forming bacterium is the causative agent for anthrax. Three proteins from B. anthracis including protective antigen (PA), lethal factor (LF) and edema factor (EF) are causative factors of this bacteria. To produce plant-based vaccine, fusion protein of PA 4 domain and LF 1 domain via furin cleavage site joined to subunit B Vibrio cholera toxin (CTB) as an inducer of immune system. In this research we used 3and modified 5 untranslated regions of cowpea mosaic virus (CPMV) as translation enhancer and silencing inhibitor gene 2b of cucumber mosaic virus (CMV) to construct binary vector and transfer gene. Transient expression of tobacco and lettuce performed via agrobacterium and transient expression was confirmed at the level of transcriptome and proteome through RT-PCR and ELISA assay, respectively.Keywords: CMV, CPMV, ELISA, transient expression
-
بیان موقت در بافت برگ با ناقل های دوتایی روش سریعی برای تولید پروتئین در گیاهان است. عامل های رونویسی باعث تغییر بیان همزمان چند ژن می شوند. به همین دلیل می توان از آنها برای اصلاح صفات کمی مانند سوخت وسازگر (متابولیت)های ثانویه که با چند ژن کنترل می شوند، استفاده کرد. گیاه Artemisia annua گیاهی یک ساله، بومی آسیا و به احتمال بسیار زیاد چین است و یکی از مهم ترین سوخت وسازگر های دارویی یعنی ترکیب سسکویی ترپن آرتمیزینین را که دارای خواص ضدمالاریایی و ضدسرطانی بالایی است تولید می کند. برای بررسی میزان تاثیر عامل های رونویسی مختلف مورد بررسی (سه عامل رونویسی متعلق به خانواده WRKY و دو عامل رونویسی متعلق به خانواده MYB) و آنزیم های DBR2 و OPR3 روی میزان بیان ژن های مسیر زیست ساخت (بیوسنتز) آرتمیزینین و تولید سوخت و سازگرهای حدواسط، از روش بیان موقت با اعمال نفوذپذیری تدریجی آگروباکتریوم (آگرواینفیلتریشن) استفاده شد. ژن های مختلف مورد بررسی از برگ گیاه A. annua استخراج و در آغاز در ناقل pJET1.2 همسانه (کلون) و آن گاه در حامل بیانی ویروسی pEAQ-HT همسانه سازی شده و در برگ های دو کموتایپ (chemotype) وحشی ایران و آنامد (anamed) به صورت موقت بیان شدند. نتایج تجزیه سوخت وسازگر های مسیر زیست ساخت آرتمیزینین با استفاده از دستگاه GC-MS نشان داد که عامل های رونویسی مورد بررسی نقش مهمی در تولید دو سوخت وسازگر AA و DHAA در گیاهان آگرواینفیلتره شده نسبت به کنترل داشتند. این نتایج نشان می دهد که عامل های رونویسی بالا قادر به تنظیم رونویسی ژن های دخیل در زیست ساخت آرتمیزینین هستند.
کلید واژگان: آرتمیزینین, بیان موقت, عامل های رونویسی, GC, MSArtemisia annua is an annual herb native to Asia most probably China produce one of the most important sesquiterpene namely artemisinin which has antimalarial and anticancer activity. Three transcription factors belonging to WRKY family, two transcription factors belonging to MYB family and two enzymes DBR2 and OPR3 were isolated from A. annua leaves and first inserted into pJET1.2 vector then sub cloned into cowpea mosaic virus (CPMV) based viral vector (pEAQ-HT). Thegenes were transiently expressed in A. annua young leaves of two different chemotypes ANAMED and Iranian wild type under the control of a constitutive cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter as vacuum infiltration. An agroinfitration method was carried out for transient expression of different genes. The analysis of metabolites by GC-MS method showed that the transcription factors which have expressed transiently, could effect on the rate of DHAA and AA metabolites. The results show that the TFs (WRKY and MYB) are involved in artemisinin biosynthesis pathway.Keywords: Artemisinin, Transcription factors, transient expression, GC, MS -
پیشبرها یکی از عناصر کلیدی مهندسی ژنتیک برای هدفمندی بیان ژن ها محسوب می شوند. به منظور بیان اختصاصی ژن در غده های سیب زمینی عمومی ترین پیشبر مورد استفاده پیشبر Patatin است. پاتاتین گروهی از گلیکوپروتئین ها هستند که به وسیله یک خانواده چندژنی رمزسازی می شوند. این پروتئین ها بیش از 40% پروتئین های محلول در غده سیب زمینی را به خود اختصاص می دهند. پیشبرهای کلاس I به طور عمده مسئول بیان پاتاتین های غده بوده و بنابراین الگوی بیان اختصاصی برای غده داشته و در بخش بافت پارانشیمی آن به مقدار زیاد وجود دارند. هدف از این تحقیق همسانه سازی پیشبر اختصاصی غده سیب زمینی (پاتاتین کلاس I (pat1)) و بررسی بیان اختصاصی آن می باشد. پس از استخراج DNA ژنومی از گیاه سیب زمینی، پیشبر Pat1 با استفاده از پرایمرهای اختصاصی همسانه سازی شد. قطعه مورد نظر با دو آنزیم برشی Bam HI و Hind III جدا و خالص سازی شده و جایگزین پیشبر دایمی CaMV35S در ناقل دوگانه pBI121 گردید. پلاسمید نوترکیب به روش شوک حرارتی به Agrobacterium tumefaciens سویه LBA4404 منتقل گردید. با استفاده از روش اگرواینفیلتریشن بیان اختصاصی ژن gus در بافت های گیاه سیب زمینی مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل نشان داد که در مقایسه با پیشبر CaMV35S، پیشبر PatI نیز با کارایی بالایی باعث بیان ژن gus در غده ها می شود.
کلید واژگان: اگرواینفیلتریشن, بیان موقت, پیشبر patatin, همسانه سازیTo achieve the high level of gene expression، promoters are key elements. Patatin promoter has been used as a specific gene expression in potato tubers. Patatin is a group of glycol protein in potato tuber which is code by a multiple family genes. This protein makes up more than 40% of soluble proteins of potato tubers. Class I Promoters mainly responsible for tuber -specific expression pattern of proteins and located high amount in tuber parenchyma tissue s. The purpose of the present study is the cloning and expression assay of tuber specific promoter، patatin class I (pat1). Total DNA of the potato tissue samples was extracted and the pat1 promoter was amplified using specific primers and pfu polymerase by polymerase chain reaction (PCR). The fragment was isolated by two restriction enzymes (BamHI، HindIII) and was replaced with CaMV35S promoter in pBI121 vector. The recombinant plasmid was transferred to Agrobacterium tumefaciens LBA4404 strain using freez-thaw method. The specific expression of gus gene in potato tissue was evaluated using agro-infiltration method. The results of the this experiment confirmed the specific expression of the gene.Keywords: Agro, infiltration, Cloning, Pat1, Transient expression
نکته
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
©2000-2025 magiran.com All Rights Reserved.