به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

تنها با پرداخت 70 هزارتومان حق اشتراک سالانه به متن مقالات دسترسی داشته باشید و 100 مقاله را بدون هزینه دیگری دریافت کنید.

برای پرداخت حق اشتراک اگر عضو هستید وارد شوید در غیر این صورت حساب کاربری جدید ایجاد کنید

عضویت

جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « الیزا » در نشریات گروه « گیاهپزشکی »

تکرار جستجوی کلیدواژه «الیزا» در نشریات گروه «کشاورزی»
  • ساسان قاسمی *، عادله عابدی فیروزجایی

    ویروس موزاییک لوبیا و نژادهای وابسته به آنها از مهمترین بیماری های ویروسی لوبیا هستند و تقریبا در تمام مناطق کشت لوبیا وجود دارند.به منظور بررسی اثرات تیمار سالیسیلیک اسید بر واکنش رقم حساس لوبیا (اختر) به ویروس موزاییک معمولی لوبیا (BCMV)، آزمایشی در قالب طرح کاملا تصادفی با 4 تکرار در شرایط گلخانه اجرا شد. تیمارهای آزمایشی شامل غلظت های صفر، 200، 400 و800 میکرومولار سالیسیلیک اسید در نظر گرفته شد. تیمارهای مورد نظر سه روز قبل از مایه زنی با عامل ویروس مربوطه انجام شد. با انجام آزمون سرولوژیکی ELISA با استفاده از آنتی سرم BCMV آلودگی 3/83 درصد نمونه به این ویروس تایید گردید. نتایج نشان داد سطوح مختلف سالیسیلیک اسید توانستند شدت بیماری را در مقایسه با شاهد آلوده به ویروس کاهش دهند. کمترین شدت بیماری در تیمار کاربرد اسید سالیسیلیک با غلظت 800 میکرومولار (5/15درصد) بدست آمد. میزان فنل برگ در تیمار اسید سالیسیلیک با غلظت 800 میکرومولار (92 درصد) بالاترین مقدار را نشان داد که به لحاظ آماری با شاهد آلوده اختلاف آماری معنی داری نشان نداد که این صفت می تواند نشانگر القاء مقاومت با بهبود سطوح فنل در اثر کاربرد سالیسیلیک اسید باشد. سالیسیلیک اسید توانست در بهبود پارامتر های مرفولوژیک مانند وزن تر بخش های هوایی بوته و وزن خشک ریشه موثر باشد و در شرایط بیماری مانع از آسیب های بیشتر در طول دوره ی آزمایشی شود به حدی که این میزان در تیمار اسید سالیسیلیک با غلظت 800 میکرومولار در شرایط بیماری تفاوت معنی داری با شاهد سالم نشان ندادند.

    کلید واژگان: شدت آلودگی, الیزا, لوبیا, ویروس موزاییک لوبیا, سالیسیلیک اسید}
    Sasan Ghasemi *, Adeleh Abedi Firoozjaei

    Bean common mosaic virus and related races are one of the most important bean viral diseases and are present in almost all bean growing regions. In order to investigate the effects of salicylic acid treatment on the reaction of sensitive bean variety (Akhtar) to common bean mosaic virus (BCMV), an experiment was conducted in the form of a completely randomized design with 4 replications in greenhouse conditions. The experimental treatments included concentrations of zero, 200, 400 and 800 micromolar salicylic acid. The desired treatments were performed three days before inoculation with the respective virus agent. ELISA test using BCMV antiserum showed 83.3% of samples were infected with this virus. The results showed that different levels of salicylic acid could reduce the severity of the disease compared to the control infected with the virus.The lowest severity of the disease was obtained in the treatment of salicylic acid with a concentration of 800 micromolar (15.5%). The amount of phenol in the leaves in the treatment of salicylic acid with a concentration of 800 micromolar showed the highest value (92%), which did not show a statistically significant difference with the infected control, and this trait can be an indicator of the induction of resistance with the improvement of phenol levels due to the use of salicylic acid. Salicylic acid was effective in improving the morphological parameters such as the wet weight of the aerial parts of the plant and the dry weight of the root, and in disease conditions it prevented further damage during the experimental period to such an extent that this amount in the treatment of salicylic acid with a concentration of 800 µM in the conditions of the disease did not show any significant difference with the healthy control.

    Keywords: Disease severity, Elisa, Salicylic acid, BCMV, Bean}
  • Emad Afzali-Goroh, Roohallah Saberi-Riseh*, Ahmad Hosseini, Masoumeh Vatankhah

    The current study evaluated Pseudomonas fluorescens VUPf5 and three isolates of Bacillus subtilis (GB32, GB12, and VRU1) for induction of resistance against Cucumber mosaic virus (CMV) in cucumber Cucumis sativus L. (cultivar Sultan) plants. Seed treatment with plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) strains significantly reduced the number of symptomatic plants when CMV was mechanically inoculated. Serological analysis using double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (DAS-ELISA) also showed a significant reduction in the CMV accumulation in plants treated with PGPR strains. In every treatment, growth indices, leaf chlorophyll content, leaf carotenoid content, leaf, and root Iron, Zinc, Copper, and Manganese concentration of virus-infected plants were significantly increased. The highest reduction in CMV concentration was observed in plants treated with VRU1. The maximum chlorophyll concentration, leaf Iron, copper, and manganese were observed in plants treated with GB32.
    Nevertheless, the highest carotenoid content was measured in the VUPf5 treatment. In the case of growth indices, the best results were obtained by VUPf5 compared to untreated control. In addition, the production of lipase, siderophore, protease, cellulase, HCN, auxin, and phosphate carbonate was determined under in vitro conditions. All four strains were positive for siderophore and auxin production. These results suggest that P. fluorescens and B. subtilis should be further evaluated for their potential to contribute to CMV management under in vivo and in situ conditions.

    Keywords: Bacillus subtilis, Cucumber mosaic virus, DAS-ELISA, Pseudomonas fluorescens}
  • کاوس ایازپور*، فرید ریاحی
    به منظور بررسی ویروس وای سیب زمینی از مزارع مختلف خانواده سیب زمینی از قبیل سیب زمینی، گوجه فرنگی، بادنجان و تنباکو در منطقه جهرم، طی فصول بهار و تابستان سال های 1391 و 1392 تعداد 350 نمونه گیاهی با علایم موزاییک و زردی برگ ها، لکه های نکروتیک روی رگبرگ ها و کوتولگی جمع آوری شد. بررسی آلودگی نمونه ها با آزمون سرولوژیکی الیزا و آزمون مولکولی RT-PCR انجام گردید. در بررسی نمونه های مشکوک با آزمون سرولوژیکی DAS-ELISA با استفاده از آنتی سرم پلی کلونال ویروس وای سیب زمینی، تعداد 60 نمونه که تنها از سیب زمینی بودند آلوده به ویروس تشخیص داده شدند. برای تشخیص ویروس در آزمون RT-PCR از جفت آغازگرهای P1 و P2 که ژنوم پوشش پروتیینی ویروس را تکثیر می کردند، استفاده شد. در نهایت دو نمونه مورد بررسی که در محدوه 1000 جفت بازی ایجاد باند کرده بودند ترادف یابی گردید. نتایج نشان داد که از بین گیاهان مورد بررسی، آلودگی فقط در سیب زمینی دیده می شود و گیاهان دیگر، عاری از آلودگی به PVY بودند. مقایسه توالی نوکلیوتیدی پوشش پروتیینی دو جدایه با 19 توالی نوکلیوتیدی PVY موجود در بانک ژن جهانی نشان داد که یکی از جدایه های جهرم با بیشتر جدایه های اروپایی در گروه الف و جدایه دیگری با تعدادی معدود در گروه ب قرار می گیرند. بنابراین آلودگی به این ویروس فقط در گیاهان سیب زمینی در این منطقه مشاهده شد که احتمالا حاصل استفاده از غده های بذری آلوده می باشند. این اولین گزارش از حضور آشکار ویروس وای سیب زمینی و نژاد NTN آن در منطقه جهرم و استان فارس می باشد.
    کلید واژگان: آنالیز فیلوژنتیکی, الیزا, خانواده سیب زمینی, مگا 6, نژادNTN, ویروس وای سیب زمینی, جهرم}
    Kavous Ayazpour *, Farid Riahi
    In this study three hundred fifty samples collected from diseased potato, tomato and eggplant plants that showed virus suspected symptoms such as: mosaic and yellowing of leaves, necrotic spots on veins and stunting from Jahrom region of Fars province. The samples were detected by using enzyme linked immunosorbent assay (DAS-ELISA) method with polyclonal antibodies for serological distinguishing of Potato Virus Y (PVY). Almost sixty samples collected from potato were infected by PVY in this phase. For molecular diagnostic of the virus, RT-PCR assay were used for infected samples with primer pairs of P1 and P2. These primers could amplify the coat protein region of virus genome. Eventually PCR products of two samples were sequenced and compared with 19 sequences available in GenBank using Blast search. The MEGA6 software and UPGMA method were used to draw phylogenetic tree. The drawn tree showed that the isolates of jahrom-Iran and the most isolates of Europe were placed in separate clusters.This results showed that in this area, virus infected only found in potato plants so it is possible that crop infections were related to use of infected seed tubers. This is the first report of in Jahrom area.
    Keywords: Phylogenetic analysis, DAS-ELISA, MEGA6, Solanaceae, Strain NTN}
  • طیبه کشاورز*، حسن حاج نجاری

    کلکسیون ملی ارقام تجاری بومی و وارداتی سیب مستقر در ایستگاه تحقیقات باغبانی کمال شهر از اهمیت خاصی برای برنامه های سالم سازی با هدف تامین هسته های اولیه و پیش تکثیر جهت تولید نهال سالم برخوردار است. تاکنون مطالعه متمرکزی در زمینه غربالگری درختان سیب موجود در این کلکسیون از نظر آلودگی به بیماری های ویروسی صورت نگرفته است. ویروس لکه سبزرد سیب (Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV) ویروس مهمی است که باعث ایجاد آلودگی درختان میوه در سراسر جهان می شود. جهت ارزیابی وقوع و میزان شیوع این ویروس در کلکسیون سیب کمال شهر از مجموع 50 رقم سیب جدید، امیدبخش، بومی پر محصول و ارقام وارداتی سازگار بر روی پایه های بذری، نمونه برداری انجام شد و به روش الایزای مستقیم با آنتی بادی اختصاصیACLSV  ارزیابی گردید و جهت تایید نتایج الیزا، تعدادی از این ارقام با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز به روش نسخه برداری معکوس (RT-PCR) و جفت آغازگر تکثیر کننده بخشی از پروتئین پوششی ACLSV مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج الیزا نشان داد که تعداد 39 رقم از 50 رقم مورد بررسی، به این ویروس آلوده بوده و در آزمون RT-PCR نیز از 18 رقم مورد بررسی تنها پنج رقم، آلوده به ویروس تشخیص داده شد. تعدادی از ارقام شامل مکینتاش، ردرم بیوتی، استارکینگ، اردبیل 1، نایان ارنگه، خورسیجان، رداسپور کوپر، یلو ترنسپارنت 1، IR6-1 و اردبیل 2، در هر دو آزمون الیزا و RT-PCR عاری از ویروس تشخیص داده شدند. بنابراین این ارقام پس از بررسی از نظر آلودگی به سه ویروس مهم دیگر شامل ویروس ساقه گودی سیب (Apple stem pitting virus, ASPV)، ویروس ساقه شیاری سیب (Apple stem grooving virus, ASGV) و ویروس لکه حلقوی گوجه فرنگی (Tomato ring spot virus, ToRSV) می توانند در برنامه تولید مواد تکثیری سالم و گواهی شده مورد استفاده قرار گیرند.

    کلید واژگان: الیزا, کلکسیون ارقام سیب, واکنش زنجیره ای پلی مراز, ویروس لکه سبزرد سیب}
    Tayyebeh Keshavarz*, Hassan Hajnajari
    Introduction

    Pome fruits are affected by many viruses that cause diseases with adverse effects in orchards worldwide. Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV) is one of the most widespread and economically important latent viruses that naturally affect many Prunus species, apples (Malus domestica Borkh.), pears (Pyrus communis L.) and the other rosaceous species. ACLSV infection rates of up to 80–100% in many commercial apple cultivars with yield losses of the order of 30–40% have been reported. In most commercial apple cultivars, the infection generally is latent, but insensitive cultivars, such as apple trees grown on Marubakaido (Malus prunifolia cv. Ringo) rootstocks, malformation and reduction in leaf size and chlorotic rings or line patterns are common. The severity of symptoms induced by ACLSV depends largely on the plant species and virus strains. Some virus isolates induce a severe disease in apricot and plum characterized by depressions and protuberances that deform the fruit, often confused with the “sharka” disease due to Plum pox virus (PPV), and named for this reason as “pseudopox.” ACLSV is a filamentous virus, 680–780 nm long and 12 nm in width as the type species of the genus Trichovirus in the family Betaflexiviridae. ACLSV contains a single-stranded, positive-sense RNA about 7.5–8 kb in size, with a polyadenylated 3" terminus and a cap at its5"-end, and also contain multiple copies of a single coat protein (CP) of 21–24 kDa. The economic importance of ACLSV is largely due to its worldwide distribution and its capacity to induce severe graft incompatibilities in some Prunus combinations, causing major problems in nurseries. In apple trees, ACLSV frequently is detected in coinfection with Apple stem grooving virus and Apple stem pitting virus. ACLSV is mainly transmitted by grafting. No natural virus vectors are known for this virus and are not known to be seed or pollen transmitted. The older National Apple Collection of Native and Imported apple cultivars in Kamalshahr Horticulture Research Station located in Karaj includes 85 cultivars and promising genotypes on seed stocks benefit a high genetic variability. Though the cultivars were screened for more biotic and abiotic factors, but no screening has been achieved yet for virus diseases, while this valuable germplasm comprises a wide range of newly released cultivars or in releasing procedure, high yield natives and those imported selected as adapt to Iranian climate, so a great need of healthy primary nucleus to establish mother orchards for certified plant material. As this valuable germplasm is very important in providing healthy primary nucleus to establish mother orchards for certified plant material so the aim of this research was an evaluation of native and imported apple tree cultivars of this Collection to ACLSV infection.

    Material and Methods

    To assess the occurrence and the prevalence of this virus in the collection, a total of fifty accessions were collected. The sample collection was carried out in summer (2016) and spring (2017). The collecting method consisted of sampling leaves homogeneously distributed around the canopy of the plant. All samples were screened for the presence of ACLSV by DAS-ELISA using the ACLSV specific polyclonal antibody using commercial kits purchased from Bioreba Company, Switzerland. To confirm ELISA results some cultivars were subjected to reverse transcription-polymerase chain reaction. Total RNA was isolated from some apple cultivars using CTAB RNA extraction method and was used as a template for RT-PCR. Specific oligonucleotide primers corresponding to a region of the ACLSV genome that encodes part of the CP, were used in RT-PCR. The amplified PCR products were analyzed in 1% agarose gel stained by ethidium-bromide and visualized under UV light after electrophoresis.

    Result and Discussion

    The ELISA results showed that 39 out of 50 cultivars were infected by ACLSV. RT-PCR on total RNA from the ELISA positive samples resulted in the amplification of an expected 358 bp DNA fragment. In RT-PCR out of 18 tested cultivars, five were infected. Some cultivars including Makintash, Red Rome Beauty, Starking, Ardebil1, Nayan Arangeh, Khorsijan, Red spur cooper, Yellow transparent 1, IR6-1 and Ardebil2 recognized ACLSV free in ELISA and RT-PCR, so could be used in the production and employment of virus-free propagating material program after infection testing to the other three important viruses Apple stem pitting virus, Apple stem grooving virus and Tomato ringspot virus. The results showed a high rate of ACLSV infection of native and imported apple cultivars in the older National Apple Collection in Kamalshahr Horticulture Research Station. Previous studies, in apple gardens and nurseries of Iran, have shown a high percentage of ACLSV infection too. Similar results have also been obtained on the percentage of infection with this virus in the Czech Republic, Romania, Albania, and Bosnia and Herzegovina. As germplasm exchanges are the main source of transmission of new viruses to countries, one of the most important strategies to control viruses in fruit trees is to prevent the introduction of virus-infected germplasm into the country.

    Keywords: Apple germplasm collection, Apple chlorotic leaf spot virus, ELISA, RT-PCR, Virus}
  • Mohammad Reza Safarnejad*, Kaveh Bananej, Yalda Sokhansanj
    The legume crops such as chickpea and lentils are mainly cultivated in semi-arid tropical lands. Chickpea chlorotic dwarf virus (CpCDV) causes major losses to legumes throughout the world. Producing of specific antibody against this virus is crucial for surveys of disease in the fields and assessment of vial resistance in plant cultivars. Present article describes developing of specific antibody against the CpCDV virus by applying recombinant protein. In this study, coat protein of CpCDV was selected as a target for detection and preparation of polyclonal antibody. To achieve this aim CP gene encoding coat protein of CpCDV was initially PCR-amplified and inserted into bacterial expression vector. Expression of recombinant protein was performed in Bl21 strain of Escherichia coli. Purification was carried out under native conditions and the accuracy of recombinant protein production was confirmed by electrophoresis. The purified recombinant coat protein of CpCDV was used for immunization of rabbit. Purification of immunoglobulin molecules was performed by affinity chromatography using protein A column followed by conjugating of IgG to alkaline phosphatase enzyme. The capability of purified antibodies and conjugates for efficient detection of infected plants was assessed by double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (DAS-ELISA), western blotting and dot immunosorbent assay (DIBA). These results proved that prepared IgG and conjugate are able to distinguish with high efficiency CpCDV infected plants. To the best of our knowledge, this is the first report for production of anti-CpCDV antibodies raised through recombinant protein technology.
    Keywords: antibody, chickpea, CpCDV, ELISA, recombinant protein}
  • مهسا آبادخواه، داود کولی وند*
    پیشگیری از خسارت بیماری های گیاهی نیازمند استفاده از ابزارهای جدید، توانمند، ساده و قابل حمل برای تشخیص سریع عوامل بیماریزا است. امروزه فناوری بیوسنسور ابزاری توانمند برای ارزیابی روش های مرسوم در علوم کشاورزی است. از ویژگی های مهم بیوسنسورها حساسیت، گزینندگی و قابل حمل بودن آن ها می باشد که برای تجزیه و تحلیل سریع ترکیبات پیچیده با مقدار کم نمونه بکار می روند. هر بیوسنسور مرکب از سه بخش عنصر زیستی، مبدل و آشکارساز است. مهم ترین کاربرد آنها در بیماری شناسی گیاهی تشخیص سریع بیمارگرهای گیاهی برای کاهش مصرف مواد شیمیایی گران قیمت و آسیب رسان به محیط زیست است. این مقاله به معرفی انواع بیوسنسورها و کاربردهای آنها در بیماری شناسی گیاهی می پردازد.
    کلید واژگان: الیزا, باکتری, قارچ, ویروس, کروماتوگرافی}
    Mahsa Abadkhah, Davoud Koolivand *
    Preventing plant disease damage requires the use of new, powerful, simple and portable tools to quickly diagnose pathogens. Today, biosensor technology known as a powerful tool for evaluating conventional methods in agricultural sciences. Sensitivity, selectivity and portability of biosensors made it possible to develop them as special tools for rapid analysis of compounds in samples with low concentration. Biosensors have three main components, biological element, transducer and readout system. The most important application of biosensors in plant pathology is rapid detection of plant pathogens, in order to reduce the use of expensive and environmentally-damaging chemicals. This article introduces different types of biosensors and their applications in plant pathology.
    Keywords: ELISA, Fungus, Virus, Chromatography}
  • طیبه کشاورز، مسعود شمس بخش، کرامت ایزدپناه
    ویروس کوتولگی زرد کدوئیان(CYSDV) عضو جنس Crinivirus از تیره Closteroviridae، یکی از ویروس های خسارت زا در تیره کدوئیان می باشد. بکارگیری واریته های مقاوم بهترین راه مدیریت خسارت ناشی از این ویروس است. در تحقیق حاضر واکنش 25 توده بومی خربزه و طالبی(Cucumis melo) جمع آوری شده از مناطق مختلف ایران تحت شرایط مایه زنی کنترل شده به جدایه بوشهر CYSDV ارزیابی شدند. مایه زنی بوته ها در مرحله سه برگی توسط سفید بالک Bemisia tabaci حامل ویروس انجام و واکنش نمونه های فوق بر اساس میانگین شدت شاخص بیماری 8 هفته پس از مایه زنی، زمان ظهور علایم (درصد آلودگی 20 روز پس از مایه زنی) و میانگین جذب در آزمون الیزا 8 هفته پس از مایه زنی مورد ارزیابی قرار گرفت. تنها دو نمونه چروک زرد و تیل زرد تاخیر در ظهور علایم، شاخص شدت بیماری پایین و میزان جذب پایین در آزمون الیزا نشان دادند و بر این اساس مقاوم به ویروس و متحمل به بیماری قلمداد شدند. نمونه های زرد خارجی، زرد مشبک درشت و زرد طلایی به دلیل غلظت پایین ویروس در آزمون الیزا و نمونه های سیرجان، خاکستری خط دار و کاشفی به دلیل تاخیر در ظهور علایم در گروه نمونه های مقاوم به ویروس قرار گرفتند در حالی که نمونه های یزدی، زرد طلایی، سیرجان، زرد معطر و سفید که شاخص شدت بیماری پایین داشتند و علایم خفیف تری نسبت به سایر ژنوتیپ ها نشان دادند در گروه متحمل به بیماری قرار گرفتند. سایر نمونه های بررسی شده حساسیت بالایی به ویروس نشان دادند.
    کلید واژگان: مقاومت, شدت بیماری, الیزا}
    Cucurbit yellow stunting disorder virus (CYSDV)، a member of the genus Crinivirus (family Closteroviridae)، causes considerable losses in cucurbits. Using of the resistant cultivars is a potential option for control of the disease induced by CYSDV. In this research twenty five accessions of Cucumis melo، including local melons، collected from different regions in Iran، were evaluated under controlled conditions for their reaction to Iranian CYSDV isolate، (Bushehr). Inoculations were made at first true leaf-stage with Bemisia tabaci. Assays included mean of disease severity index 6 weeks after inoculation، time of symptoms development (infection percentages 20 days after inoculation) and virus concentration in plant (mean ELISA value 8 weeks after inoculation). Only two accessions Chorook zard and Til zard showed delay in symptom development، low disease severity index and low concentration of the virus. They were considered resistant to the virus and tolerant to the disease. The accessions Zard khareji، Zard moshabbak dorosht، Zard talaee and Sefid because of low concentration of the virus in ELISA and Sirjan and Kashefi because of delay in symptoms development were resistant to virus. Yazdi، Zard talaee، Sirjan، Zard moattar and Sefid had low disease severity index and rated tolerant. Other accessions were highly sensitive to the virus.
    Keywords: Resistance, Disease severity, ELISA}
  • Amir Amiri Sadeghan, Masoud Shams, Bakhsh, Bagher Yakhchali
    Citrus tristeza virus (CTV) is among the most destructive pathogens of citrus and causes substantial economic losses in citrus-growing industry worldwide. Considering recent distribution of this pathogen and its capability of transmission by existing aphid vectors in Iran, detection of this virus is enforceable for controlling the damage caused by this pathogen in Iran, as one of the major citrus producing countries. Toward this aim, developing a reliable and sensitive detection method such as enzyme- linked immunosorbant assay (ELISA) would be the first step to detect CTV in large scale screenings of field samples. As the serological method requires great amounts of specific antibody, the consequent preparation of a large scale antigen source for immunization process is necessary. In this study the coat protein gene of CTV (CP25) was amplified by polymerase chain reaction from a cloned CP25 gene in pTZ57R/T and subcloned in pET26b expression vector and named pET-CP25. Two Escherichia coli strains of BL21 and Rosetta Gami (DE3) were transformed by pET-CP25. Expression of recombinant protein was induced by IPTG. The authenticity of recombinant protein was confirmed by western immunoblot analysis using a polyclonal antiserum against CTV particles. The results indicated that CTV coat protein gene was expressed in E.coli. This recombinant protein could be used as a source of antigen for immunization process.
    Keywords: recombinant protein, western blot analysis, ELISA}
  • شاهین نوری نژاد، مسعود شمس بخش، نعمت سخندان بشیر، مقصود پژوهنده
    ویروس برگ بادبزنی مو (Grapevine fanleaf virus (GFLV)) از مخرب ترین ویروس های مو در سراسر جهان می باشد. بهترین روش کنترل خسارت این ویروس جلوگیری از انتشار قلمه های آلوده و نیز استفاده از اندام تکثیری عاری از ویروس برای احداث تاکستان های جدید می باشد، بنابراین ردیابی دقیق این ویروس از اهمیت بالایی در کنترل آن برخوردار است. به منظور معرفی یک روش حساس در ارزیابی پایه های مادری، طی سال 1387 از گیاهان موی تاکستان های مناطق مختلف کشور نمونه برداری انجام و آلودگی آنها به GFLV با استفاده از DAS-ELISA بررسی شد. سپس آلودگی 14 نمونه الیزا مثبت با استفاده از آرتی- پی سی آر و با به کارگیری آغازگرهای موجود در منابع و طراحی شده در این پژوهش بررسی شد. نتایج نشان داد که اکثر آغازگرهای موجود در منابع قادر به ردیابی در تمامی نمونه های بررسی شده نبودند. درحالی که آغازگرهای طراحی شده در این پژوهش ویروس را در همه نمونه ها ردیابی کردند. کارایی آغازگرهای طراحی شده روی 35 نمونه الیزا مثبت جمع آوری شده از سایر استان ها در سال بعد (1388) بررسی و تایید شد. هم چنین در این پژوهش برای اولین بار روش پیوند سبز برای بررسی آلودگی به GFLV انجام و آلودگی ویروسی را تایید کرد. نتایج این پژوهش نشان داد که ترکیب پیوند سبز و آرتی- پی سی آر با آغازگرهای معرفی شده در این بررسی روشی دقیق برای ردیابی GFLV است.
    کلید واژگان: کنترل, الیزا, طراحی آغازگر}
    Grapevine fanleaf virus (GFLV) is one of the most destructive grapevine viruses worldwide. The best strategy to control the virus is to cultivate virus free plant material in non-infested soils. Therefore, detection of the virus plays a key role in control of GFLV. To establish a reliable and sensitive technique for detection of GFLV in the stock grapevines or in preparation of virus free grapevines, samples from different vineyards of Iran were collected in 2009 and their infection by GFLV was assessed by DAS-ELISA. Fourteen ELISA positive samples were subjected to RT-PCR using GFLV published primers and the primers designed in this study. Most of the primers available in literature failed to detect GFLV in all 14 tested samples, whereas the primers designed in this study detected the virus in all mentioned samples. The efficacy of the designed primers in this study was confirmed by detection of the virus in further 35 ELISA positive samples collected from other provinces in 2010. Moreover, GFLV infectivity of grapevines for the first time was confirmed by green grafting. The results revealed that the combination of the green-grafting with RT-PCR method, using the introduced primers in this study, offers a reliable method for detection of GFLV isolates.
    Keywords: Control, ELISA, Primer designing}
  • طبسی نژاد، جعفرپور، فلاحتی رستگار، قارونی کاردانی
    ویروس خاکزاد چغندرقند (BSBV)، یکی از اعضای جنس پوموویروس بوده و دارای ذرات میله ای شکل و سه قطعه آر. ان. ای تک رشته ای مثبت می باشد. این ویروس از نظر مورفولوژی بسیار شبیه به ویروس عامل بیماری رایزومانیای چغندرقند است و همانند آن بوسیله قارچ خاکزاد پلی میکسا بتا منتقل می شود که سال های متمادی می تواند در خاک پایدار باقی بماند. دامنه میزبانی این ویروس محدود به خانواده سلمه است. به منظور شناسایی و تعیین پراکنش این ویروس در استان خراسان رضوی، در تابستان و پاییز 1384، حدود 600 نمونه از مزارع مختلف استان از غده های مشکوک به آلودگی جمع آوری و به آزمایشگاه منتقل گردید. نمونه های آلوده به ویروس، با استفاده از آزمون تاس- الیزا مشخص شدند. همچنین برای اثبات دقیقتر نتایج، آزمون آر. تی- پی. سی. آر صورت گرفت که در آن استخراج آر. ان. ای ویروس از غده های آلوده، به روش رسوب با PEG6000 انجام شد. سپس بدنبال آن آزمون آر. تی با استفاده از پرایمرهای تصادفی هگزامر جهت سنتز دی. ان. ای مورد استفاده قرار گرفت. واکنش زنجیره ای پلی مراز با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ویروس انجام گردید. الکتروفورز محصول پی. سی. آر در ژل آگارز 5/1 درصد، قطعه تکثیر شده 399 جفت باز مربوط به این ویروس را در نمونه های آلوده نشان داد. وجود این ناحیه تکثیر شده در نمونه های آزمایشی، آلودگی به ویروس مذکور را در مناطق مورد بررسی تایید می کند.
    کلید واژگان: ویروس خاکزاد چغندرقند (BSBV), پوموویروس, آزمون تاس, الیزا, واکنش زنجیره ای پلی مراز}
    Beet soilborne virus (BSBV) is a member of the genus Pomovirus, with rod shaped particles and three plus single - stranded of RNA. BSBV is morphologically similar to Beet necrotic yellow vein virus (BNYVV) and both are transmitted by the soilborne fungus, Polymyxa betae Keskin that survives in soil for many years. Host range of BSBV is limited to the family of Chenopodiaceae. In order to detect and determine distribution of BSBV in Razavi Khorasan Province, in fall and summer of 2005, samples with distinct symptoms of the infection were collected from different fields. Infection of samples with BSBV was confirmed by Triple antiboby sandwich (TAS) ELISA. Also RT-PCR test was performed and its results confirmed the results from the ELISA. Total RNA was extracted from roots of infected samples by PEG6000 precipitation method and cDNA was synthesized using random hexamer primers. PCR was performed with the virus specific primers. After electrophoresis on 1.5% agarose, a ~ 400 (399) bp segment was amplified from the infected samples.
نمایش نتایج بیشتر...
نکته
  • نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
  • کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
  • در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
درخواست پشتیبانی - گزارش اشکال