جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه "آنتی بادی مونوکلونال" در نشریات گروه "پزشکی"
-
در دهه های اخیر، ظهور ناگهانی و گسترش سریع بیماری های عفونی ، اهمیت دستیابی به رویکردهای نوین در زمینه پیشگیری، شناسایی و درمان این بیماری ها را حائز اهمیت نموده است. بیماری های عفونی همواره یکی از چالش های اساسی در حوزه سلامت عمومی به شمار می روند . به عنوان مثال، اپیدمی های ویروس زیکا، ابولا و اخیرا پاندمی کووید- 19 نشان دادند که چگونه یک بیماری عفونی می تواند به سرعت از یک منطقه جغرافیایی به سایر نقاط جهان سرایت کرده و تهدیدی جدی برای سلامت عمومی و اقتصاد جهانی ایجاد نماید . در این راستا، شناسایی و مطالعه پاتوژن های پروتوتایپ و پاتوژن های اولویت دار به عنوان استراتژی های کلیدی برای پیشگیری، شناسایی و تولید فراورده های درمانی بیماری های عفونی از اهمیت ویژه ای برخوردار هستند. پاتوژن های پروتوتایپ، ویروس هایی در میان خانواده های ویروسی هستند که دارای پتانسیل طغیان می باشند و از این جهت مطالعه این پاتوژن ها امکان توسعه سریع تحقیقات و تولید محصولات مورد نیاز را در صورت بروز همه گیری فراهم می نماید. نتایج این دسته از تحقیقات روی SARS-CoV-1 و MERS-CoV منتج به توسعه سریع واکسن برای SARS-CoV-2 شد.
علاوه بر طغیان های ویروسی، مقاومت های آنتی بیوتیکی (AMR) در دهه های اخیر نیز منجر به طراحی و بکارگیری استراتژی هایی جهت شناسایی سویه های مقاوم باکتری ها و کنترل آنها شده است. بنابراین توجه همزمان به عوامل پاتوژن با قابلیت طغیان و برخورداری از آمادگی اولیه برای مقابله با آنها و نیز کنترل مقاومت های آنتی بیوتیکی از اولویت های حوزه سلامت شناخته می شوند. این مطالعه به بررسی گام های مهم در زمینه پیش گیری پاندمی ها و همچنین اقدامات مناسب در حین آن می پردازد.کلید واژگان: آمادگی همه گیری, پاتوژن پروتوتایپ, واکسن, آنتی بادی مونوکلونال, مقاومت آنتی بیوتیکیIn recent decades, the sudden emergence and rapid spread of infectious diseases has made it important to find new approaches in the field of prevention, identification and treatment of these diseases. Infectious diseases are always one of the basic challenges in the field of public health. For instance, the epidemics of the Zika virus, Ebola virus and recently the COVID-19 pandemic have shown the quick spread of an infectious disease from one geographical area to other parts of the world which could pose a serious threat to public health and the global economy. In this regard, the identification and study of prototype pathogens and priority pathogens are of particular importance as crucial strategies for the prevention, identification and production of therapeutic products for infectious diseases .
Prototype pathogens are viruses among virus families that have outbreak potential, and for this reason, the study of these pathogens enables the rapid development of research and the production of needed products in case of an epidemic. The results of this batch of research on SARS-CoV-1 and MERS-CoV led to the rapid development of a vaccine for SARS-CoV-2.
In addition to viral outbreaks, antibiotic resistance (AMR) in recent decades has led to the design and use of strategies to identify resistant strains of bacteria and control them. Therefore, simultaneously paying attention to pathogenic agents with the ability of outbreaks and having basic preparation to deal with them, as well as controlling antibiotic resistance, are known as priorities in the health field.
This study reviews the important steps regarding prevention outbreaks as well as the proper actions during them.Keywords: Pandemic Preparedness, Prototype Pathogen, Vaccine, Monoclonal Antibody, Antimicrobial Resistance -
مقدمه
سرطان ها از رایج ترین بیماری های شناخته شده در سراسر جهان می باشد که دارای ناهمگنی های بافتی و ساختاری زیادی هستند که این باعث می شود فرایند درمان در آن ها با مشکل همراه باشد. سرطان سینه از معروف ترین آن ها است که بسیاری از بیماران مبتلا به آن HER2 مثبت هستند. امروزه درمان های رایج سرطان به اندازه کافی در مهار مرگ ومیر افراد موثر نیستند. ایمونوتوکسین ها مولکول های هیبرید هستند که حاوی یک قسمت ایمنی، که یک آنتی بادی یا یک قسمت اتصالی از آنتی بادی و قسمت دیگر آن یک بخش سمی است. در این مطالعه، ما به دنبال طراحی یک ایمونوتوکسین جدید، از جمله ضد گیرنده HER2، تراستوزوماب، مشتق شده از یک قطعه متغیر تک زنجیره ای (scFv) با اتصال به بخشی عملکردی از زهر خانواده عنکبوتیان بنام نوروتوکسین هستیم.
روش ها:
ما به ترتیب با استفاده از ProtParam، PepCalc، خصوصیات فیزیکی شیمیایی، ساختار ثانویه و حلالیت پروتیین کایمریک مورد بررسی قرار گرفت. یک مدل سه بعدی (3D) با استفاده از سرورهای I-TASSER از پروتیین هیبرید ایجاد شد. سپس بررسی ساختار و حلالیت آن با استفاده از PROCHECK و protein-sol ارزیابی شد. از سرور AllergenFP v.1.0 برای پیش بینی حساسیت به ایمونوتوکسین استفاده شد و پایداری mRNA توسط RNAfold نیز ارزیابی شد. سرانجام داکینگ بین ایمونوتوکسین و HER2 با استفاده از سرور ClusPro صورت گرفت.
یافته هانتایج بدست آمده از تحلیل ها نشان داد که پروتیین هیبرید می تواند یک پروتیین با ساختار ثانویه پایدار در محلول باشد و دارای ساختار سه بعدی قوی است و همچنین دارای mRNA با ساختار نسبتا پایدار بود و می تواند به گیرنده HER2 متصل شود.
نتیجه گیری:
نتایج حاصل از ایمونوتوکسین طراحی شده بیانگر یک پروتیین پایدار و محلول با توانایی اتصال مطلوب به گیرنده های HER2 بود که این ویژگی ها آن را به عنوان یک کاندیدای ایمونوتوکسینی مناسب برای استفاده در درمان سرطان پستان تبدیل کرده است که اطمینان از آن ها نیازمند مطالعات و بررسی آن در فازهای بالینی می باشد.
کلید واژگان: سرطان, ایمونوتوکسین, بیوانفورماتیک, انتی بادی مونوکلونالIntroductioncancers are one of the most common diseases known worldwide that have many tissue and structural heterogeneities that make the treatment process difficult. Breast cancer is one of the most well-known, and many patients with it are HER2 positive. Conventional cancer treatments today are not effective enough in preventing death. Immunotoxins are hybrid molecules that contain a part of the immune system, one antibody or a binding part of the antibody, and the other part is a toxic part. In this study, we seek to design a new immunotoxin, including the anti-HER2 receptor, trastuzumab, derived from a single-strand variable fragment (scFv) that binds to a functional part of a spider family venom called a neurotoxin.
MethodsWe examined the physicochemical properties, secondary structure and solubility of chimeric proteins using ProtParam, PepCalc, respectively. A 3D model of the hybrid protein was created using I-TASSER servers. Then its structure and solubility were evaluated using PROCHECK and protein-sol. AllergenFP v.1.0 server was used to predict immunotoxin sensitivity and mRNA stability was assessed by RNAfold. Finally, docking between immunotoxin and HER2 was performed using the ClusPro server.
ResultsThe results of the analysis showed that the hybrid protein can be a protein with a stable secondary structure in solution and has a strong three-dimensional structure and also has a relatively stable structure mRNA and can bind to the HER2 receptor.
Discussion & ConclusionThe results of the designed immunotoxin indicated a stable and soluble protein with the ability to bind optimally to HER2 receptors, which makes it a suitable immunotoxin candidate for use in the treatment of breast cancer, the assurance of which requires studies. And its study is in clinical phases.
Keywords: Cancer, immunotoxin, bioinformatics, monoclonal antibodies -
شناسایی اسینتوباکتر بومانی فرصت طلب و بیمارستانی، عامل عفونت های اکتسابی از جامعه و ذات الریه، با آنتی بادی مونوکلونالپیشگفتار
اسینتوباکتر بومانی به یکی از علل مهم پنومونی بیمارستانی، به ویژه در بیماران دارای تهویه مکانیکی با ونتیلاتور (VAP) تبدیل شده است. این باکتری فرصت طلب نسبت به برخی از آنتی بیوتیک ها مقاومت ذاتی دارد اما به راحتی نسبت به بسیاری از داروهای دیگر نیز مقاومت پیدا می کند. اسینتوباکتر می تواند بر روی پوست یا مخاط تنفسی زندگی کند و یک نوع پاتوژن بیمارستانی است، بنابراین پیشگیری و کنترل آن به یک موضوع حساس تبدیل شده است. پروتیین A غشای خارجی (OmpA) در باکتری‌های گرم منفی وجود دارد، نقش‌های متعددی در تعامل با میزبان در طول عفونت دارد و بنابراین بعنوان یک هدف مناسب برای توسعه درمان‌های ضد باکتری به شمار می رود. تولید آنتی بادی مونوکلونال (MAb) با میل ترکیبی بالا یا دارای قدرت اتصال به یک آنتی ژن مثل OmpA می تواند ابزار قدرتمندی را برای رصد و ردیابی اسینتوباکتر بومانی در عفونت‌های سیستمیک فراهم نماید.
هدفدر این مطالعه، هدف ما تولید یک آنتی بادی مونوکلونال جدید از نوع موشی است که توانایی شناسایی اسینتوباکتر بومانی که عامل عفونت های فرصت طلب بیمارستانی است را داشته باشد.
روش هاابتدا ایمونیزاسیون موش ها با یک پپتید سنتتیک (پپتید مشتق شده از صفحات بتای پروتیین OmpA) که با یک پروتیین حامل کونژوگه شده بود صورت گرفت. سلول های تولید کننده ی آنتی بادی با یک روش هم جوشی سلولی با سلول های میلومای موشی Sp2/0 فیوژن شدند و پس از آن سلول های مثبت با روش الایزا غربالگری و ارزیابی شدند. سپس واکنش پذیری آنتی بادی مونوکلونال با اسینتوباکتر بومانی در روش ایمونوفلورسانس غیرمستقیم مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافته هاآنتی بادی تولید شده توانست در تست الایزا با پپتید اختصاصی واکنش پذیری دهد و نیز با پروتیین OmpA اسینتوباکتر بومانی در تست ایمونوفلورسانس واکنش نشان داد. هیچ واکنشی با سایر باکتری های گرم منفی مانند اشریشیا کلی مشاهده نگردید.
نتیجه گیریپنومونی ناشی از اسینتوباکتر بومانی به عنوان یک عارضه بیمارستانی نوظهور در حال گسترش است. نتایج مطالعه ما نشان داد که پروتیین سطحی OmpA در اسینتوباکتر بومانی با آنتی بادی تولید شده قابل شناسایی است. پیشنهاد می شود که در آینده از آنتی بادی های مونوکلونال که بوسیله مهندسی ژنتیک، مدل انسانی شده باشند برای اقداماتی نظیر درمان و پیشگیری از عفونت و به ویژه برای محدود کردن انتشار سویه های موجود در محیط های بیمارستانی استفاده شود.
کلید واژگان: اسینتوباکتر بومانی, مقاومت به آنتی بیوتیک, آنتی بادی مونوکلونال, پروتئین غشای خارجی, عفونت بیمارستانی, پنومونی -
بیماری ویروس کرونا 2019 (کووید-19) نوعی ذات الریه ویروسی است که در اثر سندرم حاد تنفسی کرونا ویروس-2 (SARS-CoV-2) ایجاد می شود. SARS-CoV-2 بعنوان سومین ویروس کرونا بسیار بیماری زا پس از کرونا ویروس سندرم حاد تنفسی (SARS-CoV) و کرونا ویروس سندرم تنفسی خاورمیانه (MERS-CoV) در جمعیت انسانی در قرن بیست و یکم مشخص شده است. تا به امروز (20 مهر 1399) بصورت رسمی بیش از سی و چهار میلیون نفر به این ویروس مبتلا و بیش از یک میلیون نفر جان خود را در اثر ابتلا به این ویروس از دست داده اند که نشان دهنده ی اهمیت پیشگری و درمان بیماری کووید-19 است. در این مقاله ی مروری ما ابتدا نیم نگاهی به تاریخچه ی کروناویروس های معروف داریم و سپس به معرفی جزیی تر SARS-CoV-2 از لحاظ ژنتیکی و پاتوفیزیولوژی می پردازیم. پس از معرفی تظاهرات بالینی افراد مبتلا، بر روش های درمانی مختلف که تا به امروز امتحان شده اند، تمرکز میکنیم. در انتها هم مروری بر واکسن های در حال توسعه و نتایج بدست آمده از آنان داریم. لازم به ذکر است که تیم تحقیقاتی ما در حال حاضر مشغول تحقیق و توسعه ی واکسنی خوراکی/تنفسی علیه SARS-CoV-2 است که مشتکل از نانوذرات کیتوزانی است که در سطح با پروتئین Spike این ویروس تزیین شده است.
کلید واژگان: داروهای ضد ویروسی, آنتی بادی مونوکلونال, سرم درمانی, طوفان سایتوکاینیCoronavirus disease 2019 (COVID-19) is a virally-induced pneumonia caused by severe acute respiratory syndrome coronavirus-2 (SARS-CoV-2). This is the third disease-causing coronavirus after severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) and the middle east respiratory syndrome coronavirus (MERS-CoV) which has been known in the human population in the 21st century. To this date (20th of Mehr, 1399), more than thirty-four million people have been infected by this virus and more than a million have lost their lives because of it which further signifies the importance of COVID-19 prevention and treatment. In this review article, we first take a look at the history of the famous coronaviruses and then introduce the genetic and pathophysiology of SARS-CoV-2 in a detailed manner. After discussing the related clinical manifestations, we shed a light on the treatments that have been assessed to this date. In the end, we will briefly discuss the vaccines that are currency being developed and highlight their success rate, so far. It is delightful to assert that out own research team is currently developing an oral and/or respiratory vaccine against SARS-CoV-2 which is composed of spike-surface decorated chitosan nanoparticles.
Keywords: COVID19, SARS-CoV-2, Vaccines, antiviral drugs, monoclonal antibodies, clinical manifestation, serum therapy, cytokine storm -
سابقه وهدفایمونوتوکسین ها از جمله راهبردهای امیدوار کننده در درمان هدفمند سلول های سرطانی هستند که بامکانیسم اتصال اختصاصی به آنتی ژن های توموری عمل می کنند. لذا واکاوی این نوع از آنتی ژن ها و پایش ویژگی های ساختاری و عمکردی آن ها فراهم کننده بستری در ارتباط با توسعه این نوع از داروها می باشد، که در این تحقیق، مطالعه خانواده آنتی ژنی MAGE بر اساس آزمون های بیوانفورماتیکی در دستور کار قرار گرفته است. موادوروشدر گام نخست، آنالیزآماری بیان آنتی ژن های خانواده MAGE در انواع سرطان ها با استفاده از برنامه SPSSانجام گرفت.بعدازتعیین MAGE-A4 به عنوان آنتی ژن برتر،براساس مرور منابع،اپی توپ های اتصالیMAGE-A4 با ایزوفرم های مختلف HLAشناسایی شد.سپس با استفاده از برنامه های BIMAS و SYFPEITHI اپی توپ های اتصالی گزارش شده در منابع تائیدشد.شاخص پایداری وایمونوژنسیتی اپی توپ ها به ترتیب با استفاده از برنامه های PROTPRAM وIEDB انجام شد. به منظورتعیین میل اتصالی وپایداری کمپلکس HLA-B37-peptide درشرایط شبه واقعی، نرم افزارهای اتوداک وینا وگرومکس 5.1 مورداستفاده قرارگرفت.یافته هانتایج حاصل از این آزمون منجر به آشکارسازی میزان و گستره بیانی بالای MAGE-A4 در مقایسه باسایر اعضای این خانواده شد. همچنین پپتید VDELAHFLLمشتق شده ازMAGE-A4 با بالاترین میزان پایداری وایمونوژنسیتی مطلوب آشکارشد.ازسوی دیگر کمپلکسHLA-B37-VDELAHFLL با پایین ترین میزان نمودار RMSD به عنوان پایدارترین کمپلکس ارزیابی گردید. استنتاج:به طورکلی نتایج حاصل از این تحقیق نشان دادکه پپتید مورد نظر VDELAHFLL از آنتی ژن MAGE-A4 ممکن است در تولید آنتی بادی مونوکلونال وتوسعه واکسن در درمان مدرن سرطان مدنظرقرارگیرد.کلید واژگان: ایمونوتوکسین, آنتی ژن MAGE4, داکینگ, شبیه سازی دینامیک مولکولی, آنتی بادی مونوکلونال, پپتیدBackground and aimImmunotoxins, one of the promising therapeutic agents can be used in targeted of cancer therapy based on specific binding to tumor-related antigen. Evaluating and specifying the structural and functional features of these antigens provide new perspectives in the field of cancer therapy. In this study, we decipher the structure and function of MAGE antigen family based on in-silico and bioinformatic evaluation.Materials and methodsIn the first step, using SPSS software statistical analysis of the MAGE family antigens expression in a variety of cancer types was performed. After determining the MAGE- A4 as a superior antigen with the highest expression level, based on the review of the literature, the MAGE-A4 binding epitopes were identified for HLA isoforms. Then bioinformatic databases such as BIMAS and SYFPEITHI programs were used to confirm the reported HLA-binding epitopes in literature. Stability index and immunogenicity of epitopes were defined by ProtPram and IEDB software respectively. To determine the binding affinity and stability of HLA-peptide complex, docking screening and molecular dynamic simulation was conducted using Autodock Vina and gromacs 5.1 softwares.ResultOur results revealed that the MAGE-A4 antigen had high expression compared with other MAGE family members.Also, MAGE-A4 derived peptide, VDELAHFLL, with the highest stability and favorable immunogenicity was appeared. On the other hand, the most stable of HLA-B37- VDELAHFLL complex with the lowest amount of RMSD plot was Obtained.ConclusionGenerally, our results indicated that VDELAHFLL desired peptide from MAGE-A4 antigen might be promising to generate the therapeutic monoclonal antibody and vaccine development in modern cancer therapy.Keywords: Immunotoxin, MAGE-A4 antigen, Docking, Molecular dynamic simulation, antibody monoclonal, peptide
-
سابقه و هدفبازار دارویی آنتی بادی های مونوکلونال از زمان تایید آنتی بادی بازدارنده سیستم ایمنی (Muromonab-CD3) در سال 1986 که با نام تجاری Orthoclone OKT3 معروف است، رشد چشمگیری یافته است. با این وجود، اثرات ناخواسته این مولکول های اختصاصی بزرگ باعث می شود که تلاش های بیش تری برای یافتن جایگزین موثرتر انجام گردد. VHH (variable domain of heavy chain)، کوچک ترین قطعه آنتی بادی است که از آنتی بادی های زنجیره سنگین شترسانان به وسیله تکنولوژی DNA نوترکیب مشتق می گردد که به نانوبادی نیز موسوم است.مواد و روش هادر این مطالعه ما به خلاصه ای از خصوصیات ساختاری و عملکردی ویژه نانوبادی ها می پردازیم. قسمت مهم این مقاله به بررسی تعدادی از کاربردهای درمانی نانوبادی علیه طیف وسیعی از بیماری ها از قبیل بیماری های عفونی، سموم حیوانات، بیماری های خودایمنی و سرطان در قالب سه فرمت مختلف عملکردی می پردازد. در این مقاله مروری، اطلاعات مربوط به ویژگی های ساختاری- عملکردی نانوبادی ها و اثرات درمانی آن ها از مقالات نمایه شده در پایگاه های اطلاعاتی PubMed، Science direct، Google scholar استخراج گردیده است.یافته هاایجاد و به کارگیری نانوبادی ها در پژوهش های مختلف نشان می دهد که خصوصیات منحصر به فرد فیزیکوشیمیایی این مولکول های زیستی، آن ها را به عنوان ابزار مفید برای کاربردهای زیست پزشکی و کشف دارو تبدیل نموده است. این مسئله به خاطر اندازه کوچک، تمایل اتصال بالا برای اپی توپ های مخفی، ایمونوژنسیته پایین و تولید مقرون به صرفه آن ها می باشد.
استنتاج: مقاله حاضر، بررسی اجمالی از موفقیت ها و کارآیی نانوبادی ها به عنوان یک عامل درمانی امیدبخش تر نسبت به آنتی بادی های معمول علیه بیماری های مختلف فراهم می آورد.کلید واژگان: نانوبادی, VHH, نمایش فاژی, آنتی بادی مونوکلونالBackground andPurposeMonoclonal antibodies market has grown since approval of Muromonab-CD3 (trade name Orthoclone OKT3) in 1986 as immuno- suppressor. Nevertheless, the undesirable effects of these large specific biomolecules calls for further attempts for more effective alternatives. Variable domain of heavy chain (VHH) are the smallest antibody fragments called Nanobody (Nb), derived from camelid heavy chain-only antibodies (HcAb) by DNA recombinant gene technology. In this study, some of the unique structural and functional features of Nbs are summarized. The main context of this review speculate about several experimental therapeutic applications of Nbs against a wide range of diseases ranging from infectious, animal toxin, autoimmune, and cancer disease in three different functional platforms. Data about structural and functional features of Nbs and their therapeutic effects were retrieved from articles indexed in PubMed, Science direct, and Google Scholar. Development and employment of Nbs in different researches show that their unique physicochemical properties make them a useful tool for biomedical applications and drug discovery. This is because of some exceptional feathers such as small size, extraordinary stability, high affinity even for occluded epitopes, and cost-effective production. This review provides an overview of efficacy and success of Nbs as more promising therapeutic agents over conventional antibodies against multiple diseases.Keywords: Nanobody, VHH, phage display, monoclonal antibodies -
سرطان معده به لحاظ شیوع چهارمین بیماری در جهان محسوب می شود و سالانه حدود یک میلیون نفر در جهان به این بیماری مبتلا می شوند و نزدیک به 700000 نفر هر ساله جان خود را به خاطر آدنوکارسینومای معده از دست می دهند. روند بیماری زایی سرطان معده از طریق چندین مسیر مولکولی تغییریافته صورت می گیرد، که می تواند از طریق آنتی بادی های مونوکلونال اختصاصی مورد هدف قرار گیرند. در سال های اخیر استفاده از آنتی بادی های مونوکلونال موفقیت قابل توجهی را در درمان سرطان مهیا کرده است. آنتی بادی های مونوکلونال مولکول های تولید شده آزمایشگاهی هستند که تغییراتی را در راستای اتصال دقیق به جایگاه های خاص، متحمل شده اند. این داروها عملکردی مشابه با آنتی بادی های تولید شده طبیعی در داخل بدن (به عنوان بخشی از پاسخ سیستم ایمنی) دارند. این مولکول ها در درمان بسیاری از بیماری ها نظیر انواعی از سرطان ها نقش دارند. در درمان سرطان، آنتی بادی های دارای عملکرد دوگانه برای هدفگیری مجدد سلول های افکتور ایمنی برای تخریب سلول توموری (ایمونوتراپی سرطان) یا خنثی سازی دو مسیر پیام رسانی مختلف از طریق غیرفعال سازی گیرنده یا لیگاند به کار گرفته می شوند. به نظر می رسد توسعه این نوع از ترکیبات درمانی در راستای درمان بهینه انواع سرطان ها از جمله سرطان معده امری اجتناب ناپذیر می باشد. هدف از این مطالعه، توصیف استراتژی های مبتنی بر هدف گیری مولکولی با استفاده از آنتی بادی ها و مهارکننده های نسل جدید برای درمان سرطان معده می باشد.کلید واژگان: سرطان معده, اهداف درمانی, آنتی بادی مونوکلونال, مهار کننده, نسل جدیدGovaresh, Volume:22 Issue: 4, 2018, PP 211 -223Gastric cancer (GC) is the fourth most common disease worldwide and approximately one million people are diagnosed as having gastric adenocarcinoma. Each year, nearly 700,000 people lose their lives because of GC. Several altered molecular pathways are involved in the pathogenesis of GC, which can be targeted by specific monoclonal antibodies (mAbs). In recent years, the use of mAbs has provided considerable success in the treatment of cancer. Such mAbs are laboratory-produced molecules that incur changes to precisely bind to specific sites. These drugs are similar to naturally produced antibodies as part of our immune systems response. They play an important role in the treatment of many diseases, such as the different types of cancer. In cancer therapy, bispecific antibodies are used for targeting immune effector cells to destruct tumor cells (cancer immunotherapy) or neutralize two different pathways through inactivation on the level of either receptors or ligands. It seems that the development of this type of therapeutic agents to effectively treat a variety of cancers such as GC, is inevitable. The aim of the present study was to describe molecular-targeted therapy by using new-generation mAbs and inhibitors for the treatment of GC.Keywords: Gastric cancer, Targeted therapy, Monoclonal antibody, Inhibitors, New generation
-
IntroductionNon-Hodgkin lymphoma (NHL) is a cancer that starts in lymphocytes. The main treatment for NHL is chemotherapy and radiation. Today immunotherapy is a promising therapeutic approach in the treatment of a variety cancers which is high specific unlike previous methods. Antibodies do not penetrate effectively into tumore tissues because of their large size. Whereas the small size of nanobodies (Camelid single-domain antibodies) allow them to efficiently enter into tissues and bind to the epitopes. Human CD20 over expression in the B-cell lymphoma makes this antigen as a validated target for immunotherapy. One major problem in production of full length CD20 is aggregation and misfolding. Therefore, production of a polypeptide is easer and favorable comparing to that of a full length transmembrane protein CD20.MethodsThe fragment consisting of human CD20 extra membrane loop and hinge and Fc of camelid IgG was constructed. Then it was facilitated by HindIII and XhoI restriction enzyme sites and fused to the 6× His tag for purifiction. The stop codon was engineered in the terminal sequence. The engineered coding sequence was synthesized by Generay Company and then inserted into the pcDNA3.1 () vector to obtain recombinant expression vector. The accuracy of ligation reaction was confirmed by colony PCR, sequencing and digestion.ResultsThe colony PCR result showed 1132 kb fragment. The results of digestion and sequencing showed that the protein was what we had hoped to acquire.ConclusionWe have obtained the recombinant expression vector inorder to express in mammalian cell which can be used to produce novel anti-human CD20 monoclonal antibody in future.Keywords: B, lymphocyte Antigen, Monoclonal Antibody, Non, Hodgkin's Lymphoma
-
پیش زمینه و هدفامروزه با پیشرفت فناوری هیبریدوما در تولید آنتی بادی های مونوکلونال این امکان فراهم شده که به واسطه این مواد، مارکرهای مختلف سلولی در سطح سلول های نرمال و بدخیم ارزیابی گردد. CD20، فسفوپروتئین غیر گلیکوزیله، یک مارکر مناسب در تشخیص لوسمی و لنفوم ها می باشد که تقریبا در 95 درصد از سلول های B نرمال و بدخیم به جز در سلول های اولیه و پلاسماسل، بیان می گردد. هدف این مطالعه تولید آنتی بادی مونوکلونال برعلیه مارکر CD20 و ارزیابی اتصال اختصاصی آن در سلول های بیان کننده CD20 می باشد.مواد و روش هاابتدا موش های Balb/c در چهار نوبت با 100 میکروگرم پپتید خارج سلولی CD20، ایمونیزه گردیدند و سپس فیوژن سلول های طحال ایمن ترین موش با سلول های میلومایی SP2/0 به وسیله پلی اتیلن گلیکول((PEG صورت گرفت. کلون مطلوب برای رقت سازی محدود ((limiting dilution انتخاب گردید. تولید انبوه آنتی بادی مونوکلونال به روش مایع آسیت صورت گرفت. تخلیص آنتی بادی مونوکلونال با روش افینیتی کروماتوگرافی پروتئین A انجام شد و با SDS-PAGE نیز تایید گردید. اتصال اختصاصی آنتی بادی با ارزیابی های ایمونولوژیکی مثل الایزا و ایمونوفلورسانس و فلوسایتومتری صورت گرفت.یافته هاپس از انجام فیوژن سلولی و غربالگری کلون ها، یک کلون مطلوب با جذب نوری((OD حدود 2 در آزمون الایزا به دست آمد. با تخلیص مایع آسیت با ستون افینیتی کروماتوگرافی پروتئین A، 5 میلی گرم آنتی بادی مونوکلونال خالص به دست آمد. نتایج SDS-PAGE خلوص محصول کروماتوگرافی را تایید نمود. نتایج الایزا و ایمونوفلورسانس و فلوسایتومتری اتصال اختصاصی به CD20 را نیز تایید نمود.نتیجه گیرینتایج نشان می دهد که از آنتی بادی مونوکلونال تولیدشده علیه CD20 می توان در ارزیابی های ایمونولوژیکی نظیر الایزا و ایمونوفلورسانس و فلوسایتومتری استفاده نمود.
کلید واژگان: آنتی بادی مونوکلونال, CD20, افینیتی کروماتوگرافی, فلوسایتومتریBackground and AimsNowadays, by advent of hybridoma technology in monoclonal antibodies production various cell markers could be evaluated in malignant and non-malignant cells. CD20, non-glycosylated phosphoprotein is as an ideal marker in leukemia and B-cell lymphoma diagnosis which is expressed on more than 95% of normal and neoplastic B-cells except for early B-cells and mature plasma. The prime aim of this study was to produce monoclonal antibody against CD20 and evaluation of specific binding to CD20 expressing cells.Materials and MethodsFirst, Balb/c mice were immunized 4 times with 100µg peptide from extracellular domain of CD20. Spleen cells of the most immune mouse were fused with SP2/0 by Poly Ethylene Glycol (PEG). The desired clones were selected for limiting dilution (L.D). Large scale of monoclonal antibodies was produced by ascetic fluid method. Monoclonal antibody was purified by Protein-A-Sepharose column affinity chromatography then confirmed by SDS-PAGE. Afterward, evaluation of specific binding of these antibodies was determined by immunological assay such as ELISA and Immunofluorescence and flowcytometry.ResultsAfter cell fusion and screening, one desired monoclone achieved with absorbance about 2. Protein-A-Sepharose column affinity chromatography yielded about 5 mg of purified monoclonal antibody. The SDS-PAGE results confirmed purification of antibody. The result of ELISA, direct immunofluorescence staining and flow cytometry confirmed specific attachment to CD20.ConclusionsThese results indicate that such monoclonal antibodies against CD20 can be used in diagnosis of CD20 in the cells surface by immunological assay such as ELISA and Immunofluorescence and flowcytometry.Keywords: Monoclonal antibodies, CD20, Affinity chromatography, Flowcytometry -
سابقه و هدفسایتوکاین تراپی، یکی از راهکارهای اصلی برای کنترل بیماری های التهابی شدید است. با توجه به اهمیت TNF-? در بسیاری از بیماری های التهابی و اتو ایمیون، این سایتوکاین یک هدف جذاب برای بسیاری از محققین بوده و بعنوان یکی از کاندیدهای مهم برای سایتوکاین تراپی مطرح است. یکی از راهکارهای مقابله با آثار زیانبار TNF-? استفاده از آنتی بادی های مونوکلونال است. یکی از تکنیک های مهم برای تهیه و تولید آنتی بادی های مونوکلونال تکنیک فاژ دیسپلی می باشد. هدف از این مطالعه تهیه و تولید آنتی بادی مونوکلونال بر ضد TNF-? می باشد.مواد و روش هابه منظور جداسازی قطعات کوچک نواحی متغیر آنتی بادی (scFv) از کتابخانه فاژی Tomlinson تکنیکBiopanning با استفاده از پلیت های الایزا انجام شد. پس از کوت نمودن پروتئین TNF-? در ته چاهک ها، کتابخانه فاژی اضافه شد. پس از مرحله شستشو، فاژهای اختصاصی با استفاده از تریپسین جدا و در باکتری TG1 تکثیر گردید. این پروسه جهت بدست آوردن فاژهای نوترکیب بسیار اختصاصی تا پنج بار تکرار گردید. ارزیابی کلون های بدست آمده حاوی قطعات کوچک آنتی بادی بر ضد TNF-? با استفاده از تست های مونوکلونال فاژ الایزا،PCR، RFLP، توالی یابی و وسترن بلات انجام گرفت.یافته هاتجزیه و تحلیل توالی ها با استفاده از نرم افزار های بیوانفورماتیکی نشان داد که پلاسمیدهای جدا شده از کلون های واکنشگر با TNF-? حاوی اینسرت بودند. بعلاوه تفاوت این توالی ها بیشتر در سه منطقه دا،غ دیده می شود که می تواند در فعالیت پروتئین تاثیر گذارد.نتیجه گیرینتایج مطالعه نشان داد که با استفاده از تکنیک آنتی بادی فاژ دیسپلی آنتی بادی مونوکلونال نسل چهار بر ضد TNF-? با موفقیت تولید می شود.
کلید واژگان: فاژ دیسپلی, TNF, ?, آنتی بادی مونوکلونال, قطعات مناطق متغیر آنتی بادی تک زنجیره ای (scFv)Background And ObjectiveCytokine therapy is a fundamental step for the control of the most severe inflammatory diseases. Considering the importance of TNF-? in most of autoimmune and inflammatory diseases، it has been as an attractive target for many researchers and is an important candidate for cytokine therapy. Using monoclonal antibodies is a major approach in contrast to deleterious effects of TNF-. Antibody phage display technology is a major technique for the preparation of monoclonal antibodies. Our goal in current study was production and preparation of monoclonal antibody against TNF-.MethodsFor Biopanning technique، we used ELISA plates for isolation of single chain variable fragments (scFv) from Tomlinson library. After coating of TNF-? protein in the wells، phage library was added. Specific phages were eluted using Trypsin after washing process and amplified in TG1 cells. Five rounds of panning were conducted for obtaining high specific phages. The evaluation of selected clones was done through monoclonal phage ELISA، PCR، RFLP and western blotting methods.FindingsAnalysis of sequences using bioinformatic softwares showed that separated plasmids from TNF-? reactive clones contained insertions. Furthermore، most of variations are seen in three hot regions which can affect protein function.ConclusionThe results of this study showed that forth generation of monoclonal antibodies against human TNF-? were successfully produced.Keywords: Phage display, TNF, ?, Monoclonal antibody, Single chain variable fragment -
سابقه و هدف
آنتی بادی های مونوکلونال (Monoclonal) با توجه به اتصال اختصاصی به آنتی ژن، امروزه به عنوان ابزار تحقیقاتی و عوامل تشخیصی بهسازی می شوند. در این تحقیق آنتی بادی های مونوکلونال بر علیه سلول های سرطان روده تهیه شده و نشان دارسازی آن ها با رادیوایزوتوپ تکنسیم- 99m صورت گرفت.
مواد و روش هااین پژوهش در سه مرحله انجام شد که شامل تهیه سلول های هیبریدوما علیه سلول های سرطانی روده (HT29)، تولید آنتی بادی مونوکلونال با رشد هیبریدوما در محیط کشت و به دست آوردن خصوصیات آن و نشان دارسازی آن با تکنسیم- 99m و انجام آزمایش های کنترل کیفی می باشد.
یافته هادر این پژوهش سلول هیبریدومای D2 جهت تولید آنتی بادی مونوکلونال به دست آمد که ایزوتایپ آنتی بادی IgG1 و ثابت پیوستگی(Affinity) آن M-1 109 × 2/7 تعیین شد. این آنتی بادی قادر به شناسایی آنتی ژن رویانی سرطان (CEA) بود. بازده نشان دارسازی آنتی بادی مونوکلونال با در نظر گرفتن نتایج حاصل از آزمایش های کنترل کیفی، بیش از90 درصد تعیین شد.
استنتاجآنتی ژن رویانی سرطان (CEA) پروتئینی غشایی با گلیکوزیلاسیون زیاد است. از کاربردهای بالینی رایج آنتی بادی ها علیه CEA، می توان به غربالگری سرطان در میان افراد جمعیت، تشخیص سرطان های بدخیم دستگاه گوارش، تکنیک های آسیب شناسی، تشخیص جایگاه تومور و درمان سرطان اشاره نمود. در این تحقیق یک آنتی بادی مونوکلونال نشان دار شده جدید تهیه شده است که می تواند در آینده به عنوان یک انتخاب مناسب برای ثبت تصاویر دو بعدی با پرتو- ایمنی (Radio Immunoscintigraphy) مورد استفاده قرار گیرد.
کلید واژگان: آنتی بادی مونوکلونال, رادیودارو, تکنسیم, 99m, رادیوایمونوسینتی گرافی, سرطان کولونBackground and
PurposeBinding a monoclonal antibody to tumor associated antigens is an effective method for cancer therapy because these agents can specifically target malignant cells. In fact, monoclonal antibodies are effective agents for diagnosis, grading and treatment of different kinds of cancers. In this research, a new monoclonal antibody against colon cancer cells was prepared and radiolabeling with technetium-99m evaluated.
Materials And MethodsThis research was done in three parts: preparation of hybridoma cell against colon cancer cell line (HT29), production of monoclonal antibody, determination of its characterizations and radiolabeling with technetium-99m.
ResultsmAb-D2 is an IgG1 with affinity constant of 7.2 × 109M-1 which can recognize CEA in tumor cells. Radiolabeling showed that 99mTc-HYNIC-mAb-D2 complex is stable, immunoradioactive, and has a desirable biodistribution.
ConclusionIn this study, we gained a new radiopharmaceutical that may be a good candidate for radioimmunoscintigraphy.
Keywords: Monoclonal antibody, Radiopharmaceutical, Technetium, 99m, Radioimmunoscintigraphy, Colon cancer -
هدفتولید کمپلکس آلکالین فسفاتاز-آنتی آلکالین فسفاتاز(APAAP) با هدف به کارگیری آن در یکی از کاربردی ترین روش های تعیین جایگاه آنتی ژن در بافت یا سلول (تکنیک APAAP) و مقایسه آن با محصولات مشابه خارجیمواد و روش هادر این مطالعه، آنتی بادی های ترشحی دو کلون هیبریدومایی A1G9G3 و A1G8F7 تولید شده در داخل کشور، تغلیظ و خالص سازی شدند و افینیتی آنها مشخص شد. سپس کمپلکس APAAP با غلظت های مناسب از آنتی بادی مونوکلونال ضد آلکالین فسفاتاز (AAP) و آنزیم آلکالین فسفاتاز(AP) تهیه شد و برای رنگ آمیزی ایمونوسیتوشیمی(ICC) و ایمونوهیستوشیمی (IHC) در مقایسه با نمونه تجارتی مشابه (شرکت DAKO، دانمارک) استفاده شد.یافته هاهر دوکلون سلولی توانایی تولید آنتی بادی مونوکلونال ضدآلکالین فسفاتاز با افینیتی بالا را حفظ کرده بودند و کمپلکس به دست آمده از آنتی بادی مونوکلونال و آنزیم در تکنیک APPAP بسیار کارا و از نظر کیفیت رنگ آمیزی قابل مقایسه با نمونه مشابه خارجی بود.نتیجه گیریبا توجه به افینیتی مناسب آنتی بادی های مونوکلونال محصول کلون های هیبریدومایی مورد مطالعه و پایداری کمپلکس حاصل از مخلوط آنتی بادی مونوکلونال و آنزیم آلکالین فسفاتاز برای زمان طولانی، می توان از این دو کلون سلولی برای تهیه کمپلکس APPAP در حد نیمه صنعتی و صنعتی کمک گرفت و از آن در رنگ آمیزی های ایمونوسیتوشیمی و ایمونوهیستوشیمی استفاده کرد.
کلید واژگان: آنتی بادی مونوکلونال, APAAP, ایمونوسیتوشیمی, ایمونوهیستوشیمی, آلکالین فسفاتاز -
مقدمهاتصال آنتی بادی های مونوکلونال به آنتی ژن های وابسته به تومورها روشی موثر در درمان سرطان می باشد، زیرا این عوامل قادرند بطور اختصاصی این سلول ها را هدف گیری کنند و در واقع به عنوان عاملی موثر برای تشخیص، درجه بندی و مرحله بندی و درمان انواع سرطانها محسوب می گردند.روش بررسیدر این تحقیق بر علیه سلول های سرطان کولون نوعی آنتی بادی مونوکلونال جدید تهیه شد و غلظت آنتی ژن در سلول های مختلف (گلبول های سفید، رده سلولی HT29، LS180 و MCF7) از طریق روش رایوایمونواسی با استفاده از پروتئین جی نشاندار شده با ید- 125 ارزیابی گردید.یافته هانسبت اتصال پروتئین جی نشاندار شده با ید- 125 به گلبول های سفید (WBC)، رده سلولی HT29، LS180 و MCF7 به ترتیب برابر 7.1، 91.2، 75.8 و 40.2 درصد بدست آمد.نتیجه گیریبا توجه به اهمیت آنتی بادی های مونوکلونال، لازم است تا روشی موثر برای ارزیابی قابلیت استفاده آنها در تشخیص و درمان انواع سرطان ارائه شود. در روش ارائه شده برای این منظور از مواد رادیواکتیو استفاده شده است که هیچگونه محدودیتی برای شمارش آن وجود ندارد و علاوه بر استفاده کیفی، بصورت کمی نیز می توان از آن استفاده کرد.
کلید واژگان: آنتی بادی مونوکلونال, هیبریدوما, تکنیک رادیوایمونواسی, پروتئین جیIntroductionBinding a monoclonal antibody to tumor associated antigens is an effective method for cancer therapy because these agents can specifically target malignant cells, in fact monoclonal antibodies are effective agents for diagnosis, grading and treatment of different kinds of cancers.MethodsIn this research, a new monoclonal antibody against colon cancer cells was prepared and antigen concentration in different cells determined by a radioimmunoassay method using iodine (I-125) labeled protein G.Results125I-labeled protein G percent binding to white blood cell, HT29, LS180 and MCF7 cell lines were 7.1%, 91.2%, 75.8% and 40.2%, respectively.ConclusionRegarding importance of monoclonal antibody applications, it is necessary to find an efficient method for their evaluation in cancer therapy. In this method, a radioactive agent with no count restriction was used. Also by this method, amount of the antigen can be easily quantified.Keywords: Hybridoma, Radioimmunoassay technique, Protein G -
مقدمه و هدفآنتی بادی مونوکلونال علیه آنزیم پراکسیداز دارای کاربردهای وسیعی است که از مهم ترین آن ها، تشکیل کمپلکس ایمنی پراکسیداز - آنتی پراکسیداز (PAP) است. این کمپلکس در بسیاری از روش های رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی و ایمونوسیتوشیمی کاربرد دارد. هدف از این مطالعه، تولید دودمان هیبریدومایی ترشح کننده آنتی بادی ضد پراکسیداز برای استفاده در کمپلکس ایمنی PAP است.روش کاربه این منظور ابتدا موش های Balb/c ماده تحت تزریقات منظم پراکسیداز ترب کوهی (HPR) قرار گرفتند. پس از اطمینان از ایمن شدن آن ها توسط آزمایش های الیزا، بین لنفوسیت های طحالی آن ها و سلول های میلومائی SP2/0 امتزاج سلولی برقرار شد و کلون های هیبریدومایی به دست آمده به وسیله محیط انتخابی HAT انتخاب شدند.یافته هااز هفت بار امتزاجی که صورت گرفت 224 کلون هیبریدومایی به دست آمد که از بین آن ها 6 کلون، تولید کننده آنتی بادی ضد پراکسیداز بودند. از میان این 6 کلون 2 کلون انتخاب و توسعه یافتند. پس از انجام مرحله رقیق سازی متوالی (Limiting dilution) (دو مرتبه)، تک کلون های اختصاصی موردنظر توسعه یافتند. با استفاده از کیت Iso Strip مشخص گردید که هر دو آنتی بادی مونوکلونال ضد پراکسیداز (3 F 6 F 2 P،2 D 11 F 1) P، از کلاس 1 IgG هستند. ضمنا با استفاده از آزمون الایزا مشخص گردید که هر دو آنتی بادی مونوکلونال فوق روی فعالیت آنزیم پراکسیداز تاثیری ندارند.
بحث: بنابراین به نظر می رسد برای تشکیل کمپلکس ایمنی PAP مناسب باشند. سایر مراحل این پژوهش تا تشکیل کمپلکس ایمنی PAP و استفاده عملی آن ها در روش های ایمونوهیستوشیمی و ایمونوسیتوشیمی در حال انجام است.
کلید واژگان: آنتی بادی مونوکلونال, پراکسیداز, کمپلکس PAP -
مقدمه
از انجا که آنتی بادی های مونو کلونال ابزارهای قدرتمندی جهت شناسایی آنتی ژن اختصاصی شان به صورت محلول و یا مستقر در سطح سلول می باشند، استفاده از آنها مدت هاست که در زمینه تحقیقات تولید مثل و نازایی جهت شناسایی مولکول های سطحی مستقر در غشای اسپرم مد نظر قرار گرفته است....
کلید واژگان: آنتی بادی مونوکلونال, آنتی ژنهای سطحی اسپرم انسانIntroductionAs monoclonal antibodies are potential tools for characterization of soluble or cellular surface antigens, use of these proteins has always been considered in infertility and reproduction research. Therefore, in this study, monoclonal antibodies against human sperm surface antigens were produced.
Material and MethodsTo produce specific clones against human sperm surface antigens, proteins were extracted using solubilization methods. Balb/c mice were immunized intraperitoneally with the proteins using complete Freund’s adjuvant in the first injection and incomplete Adjuvant in the following booster injections. Hybridoma cells producing ASA were cloned by limiting dilution.
ResultsFive stable ASA producing hybridoma clones were achieved and their antibody isotypes were determined by ELISA. All the isotypes were of IgG class. Their cross reactivity with rat and mice spermatozoa was examined but they did not have any cross reactivity.
ConclusionThe produced antibodies can be used in further studies to characterize and evaluate each of the antigens present on human sperm surface and determining their role in fertilization.
Keywords: Monoclonal Antibody, Human Surface Spermatozoa Antigens -
زمینه و هدفافینیتی آنتی بادی به آنتی ژن در بسیاری از موارد تاثیر بیولوژیکی مهمی در فعالیت آن آنتی بادی و همچنین در انجام سنجشهای آزمایشگاهی ایمونولوژیکی مانند رادیوایمونواسی (RIA) و ایمونوهیستوشیمی دارد. مطالعه حاضر با هدف سنجش افینیتی آنتی بادی مونوکلونال محصول کلون هیبریدومای A1G8F7 تولید شده نسبت به آنزیم آلکالین فسفاتاز (ALP) انجام گردید.روش بررسیدر این مطالعه تجربی، روش های متعددی برای تعیین افینیتی و آویدیتی آنتی بادی تا کنون ابداع شده اند. در همه این روش ها از سیستمی استفاده شده که در آن آنتی ژن و آنتی بادی با هم به تعادل برسند و آنگاه بدون تغییر دادن حالت تعادل، مقادیر آنتی ژن آزاد و آنتی ژن همراه شده با آنتی بادی سنجیده می شود. در این تحقیق از یک روش سریع الیزای رقابتی - که افینیتی آنتی بادی را در حالت محلول اندازه گیری می کند - برای سنجش میل پیوندی آنتی بادی مونوکلونال IgG ضد آلکالین فسفاتاز تولید شده از کلون A1G8F7 استفاده شد.یافته هاغلظت ثابت آنتی بادی برای استفاده در الیزای اختصاصی مرحله دوم تعیین Dissociation Constant (Kd) به روش کلاتز، توسط یک الیزای رقابتی برابر 1μg به دست آمد؛ با رسم نمودار کلاتز Kd کلون A1G8F7 برابر 3.8×10-9 تخمین زده شد.نتیجه گیریبا توجه به این که Kd آنتی بادی های طبیعی بدن برای بیشتر آنتی ژن ها بین 10-7 الی 10-11 متغیر است و با توجه به این که هر چه اندازه Kd کوچکتر باشد، افینیتی آنتی بادی بیشتر خواهد بود، آنتی بادی ترشحی از کلون A1G8F7 برای بیشتر سنجشهای ایمونولوژیکی مناسب به نظر می رسد. عملا در آزمایشهای ایمونوسیتوشیمی و ایمونوهیستوشیمی که با این آنتی بادی مونوکلونال - همراه با آنزیم ALP در لایه سوم - انجام گردید، نتیجه رنگ آمیزی بسیار عالی و قابل مقایسه با نمونه مشابه تجارتی APAAP) شرکت (Dako بود.
کلید واژگان: آنتی بادی مونوکلونال, افینیتی, آویدیتی, الیزا, آلکالین فسفاتاز -
سلولهای کشنده طبیعی (NK) بخشی از ایمنی ذاتی هستند که بعنوان اولین خط دفاعی، نقش بارزی در از بین بردن سلولهای سرطانی و سلولهای آلوده به ویروس دارند. هدف ما از این پژوهش بررسی تاثیرات ناشی از تغییر در ظاهر شدن مولکولهای HLA کلاس I بر سطح یاخته های سرطانی، در میزان حساسیت به عملکرد سایتوتوکسیسیته سلولهای NK است. در این بررسی یاخته های سرطانی رده MDA-MB-468 مشتق شده از آدنوکارسینومای پستان انسان، بعنوان نمونه انتخاب شدند که تمامی آللهای آنتی ژنهای لکوسیتی انسان (HLA کلاس I) را نشان می دهند. جهت آزمایش و تشخیص بروز HLA کلاس I از آنتی بادی مونوکلونال W6/32 متصل به فلوروکروم فلورسین F.I.T.C استفاده گردید. نتایج توسط تکنیک فلوسایتومتری تک رنگ مورد آنالیز قرار گرفت (سلولهای NK از “خون محیطی” افراد داوطلب بدست آمد). نتایج مطالعات ما نشان داد که میزان ظاهر شدن مولکولهای HLA کلاس I بر سطح یاخته های رده سرطانی MDA-MB-468، پس از کشت در مجاورت اینترفرون گاما، افزایش می یابد و بین این افزایش با فعالیت سایتوتوکسیسیته طبیعی سلولهای NK همبستگی مستقیم (r = 1) و کامل وجود دارد. بنابراین بر پایه یافته های موجود، این احتمال وجود دارد که بر سطح سلولهای NK گیرنده هایی حضور داشته باشند که با شناسایی مولکولهای HLA کلاس I غیر خودی و یا لیگاندهای نا شناخته دیگری که با القای اینترفرون گاما افزایش می یابند، سبب فعال شدن سلولهای NK و در نتیجه باعث از بین رفتن یاخته های هدف شوند.
کلید واژگان: آنتی ژنهای لکوسیتی انسان (HLA), سلولهای کشنده طبیعی (NK), رده سلولهای سرطانی, آنتی بادی مونوکلونال, مجموعه اصل سازگارنسجیNatural Killer cells (NKs), are considered an important first line of defence and were originally defined by their ability to kill certain tumor cells and virally infected cells. Our aim is to study expression of HLA class-Ia on tumor cell lines and their susceptibility of NK cells. In this study MDA-MB-468 tumor cell line (NCB1, C208) That derived from human breast adenocarcinoma, is selected as a model which expresses total alleles of HLA class I. To test HLA class I expression, we used the F.I.T.C conjugatedm Ab W6/32 which recognize assembled HLA-A, B and C locus products. Surface expression of HLA class I on the cell line are determined with single- color flowcytometry analysis. NK cells are obtained from PBL of healthy donors. Results of our study indicate that expression of HLA class I molecules on MDA- MB- 468 Tumor cell line are increased after IFN-γ Treatment. Cytolytic activity of NK cells have direct correlation (r =1) with up- regulation of HLA class I expression on the MDA- MB- 468 tumor cell line. Therefore, on the basis of this results, we suggest that, on the surface of NK cells may exsist activating receptors that recognize allogenic HLA class I molecules and/or non HLA class I ligand that is upregulated by IFN- & treatment, and cause lysis of target cells.Keywords: Human Leukocyte Antigen (HLA), Natural killer cell (NK), Tumor cell line (TCL), Monoclonal Antibody (m AB), Major Histo compatibility complex (MHC)
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
©2000-2025 magiran.com All Rights Reserved.