جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه "پاسخ های سیتوتوکسیک" در نشریات گروه "پزشکی"
جستجوی پاسخ های سیتوتوکسیک در مقالات مجلات علمی
-
مقدمهبا وجود این که ویروس هپاتیت C (Hepatitis C virus یا HCV) یکی از عوامل مهم ایجاد کننده ی بیماری های مزمن کبدی می باشد، هنوز واکسن مناسبی برای آن تهیه نشده است. هدف از این مطالعه ساخت یک سازه ی بیان کننده ی توالیCore (aa: 1-122) ویروس هپاتیت C متصل به آنتی ژن s ویروس هپاتیت B (HBsAg یا Hepatitis B surface antigen) و تایید بیان آن در سلول های یوکاریوتی می باشد.روش هادر ابتدا توالی Core این ویروس با استفاده از پرایمرهای دارای جایگاه برش آنزیمی BamHI/EcoRV از روی وکتور pIVEX2.4a حاوی این ژن تکثیر شد و در وکتور pCDNA3.1 حاوی HBsAg خطی شده با آنزیم های مذکور کلون شد. ارزیابی و تایید ساختار نوترکیب به وسیله ی برش آنزیم های محدودکننده ودر نهایت تعیین توالی صورت گرفت. پلاسمید ساخته شده ی نهایی (pCHCORE) در رده ی سلولی HEK293T ترانسفکت شد و ارزیابی نهایی بیان توسط تست وسترن بلات بر روی سلول های HEK293T ترانسفکت شده به وسیله ی آنتی بادی پلی کلونال آنتی HBsAg موشی صورت گرفت.یافته هاتوالی ژن Core (1-122) ویروس هپاتیت C با موفقیت تکثیر گردید و نتایج ارزیابی برش آنزیمی و تعیین توالی تاییدکننده ی صحت ساختار نوترکیب pCHCORE و کلونینگ انجام شده، بود. نتیجه ی وسترن بلات بیانگر انتقال موفق پلاسمید و بیان ژن هدف در سلول های یوکاریوتی بود.نتیجه گیریبا توجه به ساخت و بیان موفقیت آمیز ساختار HBS-core در سلول های یوکاریوتی و به دلیل احتمال افزایش پاسخ های ایمنی توسط آنتی ژن HBS به صورت فیوژن با پروتئین Core (بر اساس تحقیقات قبلی)، سازه ی بیانی حاوی ژن Core ویروس هپاتیت C متصل شده به این آنتی ژن، ممکن است باعث القای بیشتر پاسخ های ایمنی علیه پروتئین Core شود و بتواند به عنوان واکسن موثر به منظور کنترل عفونت HCV به کار رود.
کلید واژگان: ویروس هپاتیت C, پروتئین Core, واکسن DNA, آنتی ژن HBs, پاسخ های سیتوتوکسیک, سلول های لنفوسیتی TBackgroundWhile hepatitis C virus (HCV) is the major cause of acute and chronic hepatitis, cirrhosis, and hepatocellular carcinoma worldwide, no vaccine against this infection has been proved to date. Cellular immune responses play an important role for eradicating persistent viral infections. Among different vaccine strategies, the use of DNA vaccine has been shown to be a promising approach for enhancing cellular immune responses. In spite of their advantages, DNA-based vaccines might induce weaker antibody and cytotoxic T-lymphocyte responses compared to protein immunization. To overcome this obstacle, several methods such as different immunization regimens, fusion of particle forming units [like hepatitis B surface antigen (HBsAg)] and co-expressing cytokines have been tested. The aim of this study was to design, construct, and evaluate an HBsAg-fused core-based DNA vaccine against HCV infection.MethodsThe HCV core gene was amplified by polymerase chain reaction (PCR) and cloned in BamHI/EcoRV sites of pcDNA3.1 containing HBsAg. The constructed plasmid (pCHCORE) was analyzed by restriction enzyme and sequencing analyses and evaluated for the protein expression in HEK293T cell line by western blot analysis with anti-HBsAg polyclonal antibody.FindingsThe correctness of the constructed DNA vaccine was shown by restriction enzyme analysis and sequencing. Western blotting results confirmed the expression of HBsAg-HCV fusion protein with an expected molecular weight in HEK239T cell line.ConclusionIn accordance with previous studies, the constructed vector (pCHCORE) compromising the fusion of HBsAg to HCV core in pCDNA3 plasmid might be used as a HCV DNA vaccine (due to proper expression in cell lines) to induce augmented cellular immune responses.Keywords: Hepatitis C virus_H C virus core protein_DNA vaccine_Hepatitis B surface antigen_Cytotoxic T_cell response
نکته
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شدهاند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شدهاست. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که میخواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.