جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « spermatogonial stem cell » در نشریات گروه « پزشکی »
-
Introduction
Decellularizing testis tissue and recellularizing with spermatogonial stem cells (SSCs) seems to be a promising approach to restore fertility in prepubertal boys who undergoes cytotoxic therapies.
MethodTestis tissue decellularization was performed by adding 1% SDS and confirmed by histological analysis and DNA quantification. The MTT assay was performed for biocompatibility analyses. SSCs were derived from male mice and cultured in αMEM medium for two weeks. Expanded SSCs were seeded onto the DTM scaffold. The recellularized DTM scaffold disc was cultured in a static cultivation system for one week, then transferred in a dynamic mini-perfusion bioreactor for two weeks. The expression of Id4, Plzf, Gfrα, Prm, Sycp3, ABP, Ki67, Bax, and Bcl2 genes were assessed in SSCs and recellularized DTM after static and dynamic cultivations.
ResultDNA qualification indicated that approximately 99% of the DNA components were removed from DTMs. Hematoxylin-eosin, Masson's trichrome, and DAPI staining confirmed the effective recellularization. Dynamic cultivation of recellularized DTMs at the flow rate of 10 ml/h provided optimum conditions. The expression of SSCs-specific genes of Id4, Plzf, and Gfrα-1 and post-meiosis genes of Scp3, prm1, and ABP was insignificantly higher in the DTMs group than in the control group. Ki67 expression was shown no difference between groups. An insignificant lower expression of the Bax and higher expression of Bcl2 genes was detected in the DTMs group compared to the control.
ConclusionOur results indicated that SSCs could successfully be attached to the DTMs and effectively proliferate in the mini-perfusion bioreactor.
Keywords: Spermatogonial Stem Cell, Decellularized Testicular Matrix, Mini-Perfusion Bioreactor} -
Background
In mammals, spermatogenesis is the main process for male fertility that is initiated by spermatogonial stem cells (SSCs) proliferation. SSCs are unipotent progenitor cells accountable for transferring the genetic information to the following generation by differentiating to haploid cells during spermato-and spermiogenesis. DEAD-box helicase 4 (DDX4) is a specific germ cell marker and its expression pattern is localized to, spermatocytes, and spermatids. The expression in the SSCs on the basement membrane of the seminiferous tubules is low.
MethodsImmunohistochemistry (IHC) and Fluidigm reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) were used to analyze the expression of DDX4 in testis tissue of fertile and sterile mice and human cases with non-obstructive azoospermia.
ResultsOur immunohistochemical findings of fertile and busulfan-treated mice showed expression of DDX4 in the basal and luminal compartment of seminiferous tubules of fertile mice whereas no expression was detected in busulfan-treated mice. The immunohistochemical analysis of two human cases with different levels of nonobstructive azoospermia revealed more luminal DDX4 positive cells.
ConclusionOur findings indicate that DDX4 might be a valuable germ cell marker for analyzing the pathology of germ cell tumors and infertility as global urological problems.
Keywords: DDX4 protein, Seminiferous tubule, Spermatogonial Stem Cell, Testicles} -
سابقه و هدف
سلول های بنیادی اسپرماتوگونی (SSCs) مدلی عالی برای کمک به درک بیشتر روند تمایز، رشد و عملکرد بیضه ها می باشد و در نتیجه امکان استفاده بیشتر از این سلول ها در درمان نازایی، تولید حیوانات تراریخته و داروهای نوترکیب را فراهم می کنند. هدف از این مطالعه بررسی اثرات غلظت های مختلف ملاتونین بر القاء کلونی زایی SSCs است.
مواد و روش هاسلول های اسپرماتوگونی از بیضه بره های نابالغ با استفاده از هضم آنزیمی دو مرحله ای استخراج گردید و سپس به مدت 10 روز در 3 گروه شامل گروه شاهد (کشت ساده در محیط پایه DMEM حاوی 1٪ آنتی بیوتیک و 5٪ سرم گوساله جنینی(FBS)) و تیمارهای 1 و 2 (به ترتیب کشت در محیط کشت پایه مذکور توام با اضافه کردن 1 میکرومول و 1 نانومول ملاتونین) کشت شدند. تعویض محیط کشت هر 72 ساعت یکبار انجام شد و همزمان تعداد و قطر کلونی ها با استفاده از میکروسکوپ معکوس ارزیابی شد.
نتایجماهیت بنیادینگی سلول های اسپرماتوگونی با استفاده از رنگ آمیزی ایمنوسیتوشیمی علیه آنتی ژن PGP9.5 تایید گردید. تعداد و مساحت کلونی های اسپرماتوگونی در روز هفتم کشت در تیمار 1 به طور معنی داری بیشتر از گروه شاهد بود (05/0<P) .
نتیجه گیرییافته های حاصل از این مطالعه نشان داد که افزودن ملاتونین با دوز 1 میکرومول تاثیر مثبتی بر القاء کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه دارد.
کلید واژگان: سلول های بنیادی اسپرماتوگونی, کلونی زایی, ملاتونین}BackgroundSpermatogonial stem cells (SSCs) use as an excellent model system for differentiation, development and functioning of testes and provide a source of cells for infertility treatment and production of transgenic animals and recombinant drugs. The aim of present study was to determine the effects of different concentration of melatonin on prepubertal lamb’s spermatogonial colony formation.
MethodsAn experimental study was conducted. Each treatment was replicated 5 times. Testicular cells were isolated from testes of prepubertal lambs by two-step enzymatic digestion then cultured for 10 days. Control cells (C) were grown in basic DMEM media with 1% antibiotic and 5% FBS. Treated cells were grown in basic media with 1 µmol/ml (T1) or 1 nmol/ml (T2) melatonin. Culture media was changed every 72h and SSCs colony formation was monitored by inverted microscope. The data were analyzed by one way ANOVA. P value less than 5% was considered statistically signifent.
ResultsSSCs were identified by immunocytochemistry assay against PGP9.5. Number and Surface area of colonies were greater in T1 group than C and T2 groups at day 7 (P=0.04587).
ConclusionThe findings suggest that simultaneous addition of 1 µmol/ml melatonin to culture media may increase In vitro colony formation of prepubertal sheep SSCs. So addition of above dose of melatonin to SSCs culture media are suggested by authors.
Keywords: Spermatogonial Stem cell, Colony formation, Melatonin} -
Introduction
Mouse spermatogonial stem cells (SSCs) can be cryopreserved for long periods while preserving their spermatogenic ability. Although cryopreservation has been found to increase re- active oxygen species (ROS) formation that damages cellular structures. In the present study, we added vitamin E to the basic freezing medium in order to evaluate its effect on the efficiency of spermatogonial stem cells.
MethodsSSCs isolated from testes of 6 days old male mice by enzymatic digestion. Vitamin E 100, 200, 400 μg/mL was added to the basic freezing medium. The cell viability was evaluated by MTT assay. After thawing, SSCs were cultured for 1 month and the expression pattern of specific genes of SSCs measured by real-time PCR technique.
ResultsThe survival rate of the freeze cells in the presence of vitamin E was significantly higher than the control group (p<0.05). The number of colonies and their diameter measured after one month were significantly higher in the vitamin E groups than in the control group (p≤0.05).
ConclusionAdding vitamin E to the basic freezing medium thus can be helpful in increasing the quality and viability of SSCs after cryopreservation.
Keywords: Spermatogonial stem cell, Cryopreservation, Culture, vitamin E} -
زمینه و هدف
سلول های بنیادی اسپرماتوگونی، سلول های زایای غیر متمایزی هستند که در طی مرحله پس از بلوغ با حفظ تعادل بین خود نوسازی و تمایز، سبب حفظ اسپرماتوژنز در طول حیات موجود می شوند. هدف از این مطالعه بررسی تاثیر غلظت های مختلف ویتامین E روی کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی است.
مواد و روش هاسلول های اسپرماتوگونی بیضه ی بره ی نابالغ طی دو مرحله هضم آنزیمی جدا و به روش حذف تمایزی تخلیص شدند. این سلول ها به چهار گروه تقسیم و به مدت 10 روز تحت تیمارهای مختلف قرار گرفتند. گروه شاهد (کشت ساده سلول های اسپرماتوگونی در محیط DMEM حاوی 1 درصد آنتی بیوتیک و 5 درصد FBS که هیچ گونه تیماری را دریافت نکرد و گروه های 1، 2 و 3 که علاوه بر محیط بالا به ترتیب تحت تیمار با 20، 40 و 80 میکروگرم بر میلی لیتر ویتامین E قرار گرفتند. تعویض محیط کشت هر 72 ساعت انجام شد و تعداد و قطر کلونی های تشکیل شده در روزهای 4، 7 و 10 پس از کشت به وسیله ی میکروسکوپ معکوس بررسی گردید. شناسایی کلونی ها با استفاده از ایمنوسیتوشیمی آنتی ژن PGP9.5 تائید گردید.
نتایجمیانگین تعداد و مساحت کلونی های اسپرماتوگونی در روزهای مختلف کشت در تیمارهای مختلف اختلاف معنی داری با گروه شاهد نداشت. میانگین مساحت کلونی ها در روز دهم به طور معنی داری بیشتر از روز چهارم بود (05/0P<).
نتیجه گیرینتایج حاصل از این مطالعه نشان می دهد که افزودن ویتامین E به عنوان آنتی اکسیدان احتمالا نقش چشمگیری در القا کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در کشت کوتاه مدت در محیط آزمایشگاه ندارد.
کلید واژگان: سلول بنیادی اسپرماتوگونی, ویتامین E, محیط آزمایشگاه}Background & ObjectiveSpermatogonial stem cells (SSCs) are undifferentiated germ cells that maintain spermatogenesis during lifetime by balancing between self-renewal and differentiation. The aim of this study was to investigate the effect of different concentrations of vitamin E on spermatogonial stem cells colony formation.
Material & MethodsSSCs were isolated from testes of prepubertal lamb by two step enzymatic digestions then purified by differential pllating. The cells were cultured for 10 days in 4 groups. Control group: Basic media (DMEM environment which contains 1% antibiotic and 5% FBS( and treatment groups were treated with 20, 40 and 80 µmol/ml vitamin E added to basic media respectively. Changing of culture media was performed every 72h. Colony number and diameter assay was done by inverted microscope. Identification of SSCs was performed by immunocytochemistry assay against PGP9.5.
Resultsthere were no significant difference in colony number and surface area between treatment groups and between treatment and control groups in days 4, 7and 10. Colony surface area was significantly increased at day 10 compared to day 4 (P<0.05).
ConclusionThe results of this study showed vitamin E as an antioxidant doesn’t have significant effect on colony induction of SSCs in short term culture in vitro.
Keywords: Spermatogonial Stem cell, Vitamin E, In-Vitro} -
سلول های بنیادی اسپرم ساز که همچنین سلول های بنیادی ژرمی نامیده می شوند، پایه و اساس فرایند اسپرمزایی در بافت بیضه می باشند. آنها همچنین سلول های با ارزشی جهت کاربردهای گوناگون در زمینه زیست شناسی تکاملی، زیست فناوری و پزشکی هستند. شناخت و درک جدیدترین یافته های مرتبط با اساس سلولی و مولکولی سلول های بنیادی اسپرم ساز و همچنین روش های دسترسی به این سلول ها برای کاربرد های آنها در زمینه پزشکی برای درمان برخی مشکلات ناباروری و نیز در زمینه زیست فناوری برای تولید حیوانات تراریخت مهم و ضروری می باشد. مقاله مروری حاضر به منظور توضیح اساس سلولی و مولکولی تکامل، خودنوزایی و تمایز سلول های بنیادی اسپرم ساز پستانداران و پرندگان در کنام طبیعی آنها و نیز تحت شرایط آزمایشگاهی ارائه شده است. به علاوه، این مطالعه شاخص های مولکولی اختصاصی، جهت تعیین هویت سلول های بنیادی اسپرم ساز را نشان می دهد. ما همچنین روش هایی را جهت جداسازی، کشت و غنی سازی این سلول ها معرفی کرده ایم. در انتها، اهمیت سلول های بنیادی اسپرم ساز در حیطه های مختلف و چشم اندازهای کاربردی آنها و نیز تمایز سایر سلول های بنیادی جهت دستیابی به سلول های شبه اسپرماتوگونیا و اسپرماتید تحت شرایط آزمایشگاهی مورد بحث قرار گرفته است.کلید واژگان: سلول بنیادی اسپرم ساز, خودنوزایی, تمایز, شاخص مولکولی, باروری}Spermatogonial Stem Cells: Biology, Isolation, Culture, Characterization, and Practical PerspectivesSpermatogonial stem cells (SSCs) also known as germ stem cells (GSCs) are the basis of spermatogenesis process in the testis. Furthermore¡ they are also valuable cells with different applications in developmental biology¡ transgenesis technology¡ and clinic. Understanding the new findings related to the cell and molecular biology of SSCs and the methods for isolation and maintenance of these cells are important and essential for their applications in medicine to treat some infertility problems and also in biotechnology to produce transgenic animals. The present review was conducted to describe the cell and molecular basis of development¡ self-renewal¡ and differentiation of mammalian and poultry SSCs in vivo (natural niche) and in vitro. Moreover¡ this study represents specific molecular markers to characterize SSCs. We also introduce methods to isolate¡ cultivate and enrich these cells¡ which are important for their applications. Finally¡ the significance of SSCs in different fields and their practical perspectives¡ and also the differentiation potential of other stem cells into spermatogonial- and spermatic-like cells are discussed.Keywords: Spermatogonial stem cell, Self, renewal, Differentiation, Molecular markers, Fertility}
-
BackgroundHerbal extracts have recently received the greatest attention in the path of finding naturally occurring chemicals with antibacterial and therapeutic value; however, each type of herbal remedy may have its own side effects..ObjectivesThe aim of the current experiment was to study the antibacterial effect of myrtle, parsley, mint, henna and chamomile extracts on Escherichia coli and their effects on colony formation and survival of spermatogonial stem cells (SSCs)..Materials And MethodsSpermatogonial stem cells were isolated by two-time enzymatic digestion from slaughterhouse origin ovine testis and plant extraction by deionized water. Comparisons between different treatments were performed using analysis of variance (ANOVA) followed by Duncans multiple range tests..ResultsThe results showed that there was no significant difference between mint, henna and penicillin, on inhibition of Escherichia coli growth, however parsley, myrtle and chamomile were significantly different from penicillin (PConclusionsThe results of these experiments provide evidence that henna by antibacterial activity had no detrimental affect on SSC and Sertoli cells and is a good candidate for substitution of antibiotics..Keywords: Henna, Antibacterial, Herbal Medicine, Spermatogonial Stem Cell, Escherichia coli}
-
Objective(s)Mesenchymal stem cells (MSCs) derived from Wharton’s jelly (WJ-MSCs) are now much more appealing for cell-based infertility therapy. Hence, WJ-MSCs differentiation toward germ layer cells for cell therapy purposes is currently under intensive study.Materials And MethodsMSCs were isolated from human Wharton’s jelly and treated with BMP4, retinoic acid (RA) or co-cultured on human amniotic epithelial (HAE) and chorionic plate (HCP) placenta feeder cells. profile of POU5F1, Fragilis, Plzf, DDX4, Piwil2, Stra8, Dazl, β1- and α6-integrins (ITΒ1, ITA6) genes expression as germ cell markers were analyzed using RT-PCR and real-time PCR. Immunocytochemistry of surface markers were conducted.ResultsAfter 3 weeks treatment with different reagents and co-culture system, morphology of WJ-MSCs changed to shiny clusters and germ cell specific markers in mRNA were up-regulated in both placental feeder + RA and BMP4 + RA. Induction of hWJ-MSCs with BMP4 in presence of RA resulted in significant up-regulation (P≤0.05) of all germ cell specific genes (c-Kit; 2.84±0.59, DDX4; 1.69±0.39, Piwil2; 1.14±0.21, Dazl; 0.65±0.25, α6 integrin; 1.26±0.53, β1 integrins; 1.18±0.65) compared to control and placental feeder cells + RA. Our results indicated that HAE and HCP followed by RA treatment were involved in human germ cell development.ConclusionWe demonstrated that under the right conditions, hWJ-MSCs have the ability to differentiate to germ cells and this provides an excellent pattern to study infertility cause and treatment.Keywords: Mesenchymal stem cell, PGC, Placenta, Spermatogonial stem cell, Wharton's jelly}
-
زمینه و هدفگرایش رو به رشد سریعی در مصرف دارو های گیاهی در کشور های در حال توسعه وجود دارد. یکی از دارو های سنتی که برای درمان ناباروری مردان استفاده می شود گرده ی نخل است. هدف از این مطالعه بررسی تاثیر عصاره ی آبی گرده ی نخل بر میزان زنده ماندن و تکثیر آزمایشگاهی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی موش نابالغ می باشد.مواد و روش هاجداسازی تعلیق سلولی شامل سلول های سرتولی و سلول های بنیادی اسپرماتوگونی ازبیضه ی موش سوری شش تا ده روزه با دو مرحله هضم آنزیمی انجام شد. تعلیق سلولی در محیط DMEM حاوی پنج درصد سرم در غیاب و حضور غلظت های 0/06، 0/25 و 0/62 میلی گرم بر میلی لیتر عصاره ی آبی گرده ی نخل به مدت دو هفته کشت داده شد. به منظور ارزیابی رشد سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در انتهای مرحله کشت، تعداد کل سلول ها به عنوان شاخص تکثیر سلولی و تعداد سلول های زنده برای ارزیابی میزان زنده ماندن سلولی در نظر گرفته شد.نتایجدرصد سلول های زنده و تکثیر سلولی پس از دو هفته کشت در گروه کنترل و گروه های تیمار شده با غلظت های 0/06، 0/250 و 0/62 میلی گرم بر میلی لیتر عصاره ی آبی گرده ی نخل تفاوت معنی داری با یکدیگر نداشت (0/05 < P).نتیجه گیرینتایج این مطالعه نشان داد که تیمار تعلیق سلولی بیضه ی موش نابالغ با عصاره ی آبی گرده ی نخل در محیط کشت، اثرات سمی بر میزان زنده ماندن و تکثیر سلولی این سلول ها نداشته است. بنابراین می توان از آن در مطالعات بعدی جهت بررسی روند کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در محیط کشت استفاده نمود.
کلید واژگان: سلول بنیادی اسپرماتوگونی, سلول سرتولی, گرده ی نخل, زنده ماندن, تکثیر}IntroductionThere is a fast growing tendency in the consumption of herbal remedies in the developing countries. One of the traditional medicines used for male infertility is Date palm (Phoenix dactylifera) pollen (DPP). The goal of the present study was to investigate the effect of aqueous extract of DPP on In vitro viability and proliferation rate of neonate mouse spermatogonial stem cells (SSCs).Methodscell suspension includes sertoli cells and SSCs were isolated from neonatal 6 day-old mice testes by 2 steps enzymatic digestion. The cell suspension was cultured in DMEM and FCS 4% in the absence or presence of 0.06, 0.25 and 0.62 mg/ml of aqueous extract of DPP for 2 weeks. In order to evaluate the rate of SSCs expansion at the end of culture, the mean number of whole cells and living cells were considered as proliferation and survival rates respectively. Data analysis was done with ANOVA test. The significancy of the data was analyzed using ANOVA and Tukey post test.ResultsThe results showed that there were no significant differences between the mean percent of viability and proliferation rate between control and 0.06, 0.25 and 0.62 mg/ml of DPP-treated groups (P> 0.05).ConclusionOur study showed that treatment of neonatal mouse testicular cell suspension with DPP had no toxic effects on viability percent and proliferation rate of these cells. Thus, we can use DPP for evaluate the in vitro pattern of SSCs colonization in the future studies.Keywords: Spermatogonial Stem Cell, Date Palm Pollen, viability, proliferation} -
مقدمه
سلول های بنیادی اسپرماتوگونی به عنوان سلول بنیادی اختصاصی بافت بیضه وظیفه تولید مداوم اسپرم را در جنس نر بر عهده دارند. حفظ خودنوزایی این سلول ها جهت تضمین اسپرم زایی مداوم ضروری بوده و کنام بیضه با فراهم آوردن شرایط مناسب این مهم را برعهده دارد. تا کنون در شرایط آزمایشگاهی مواد و عوامل رشد اختصاصی جهت جایگزینی این کنام معرفی شده اند که اغلب این مطالعات بر روی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی پستانداران صورت گرفته است. لذا در این مطالعه اثر عصاره بیضه موش و خروس بالغ در مقایسه با عوامل رشد بر روی ویژگی کلنی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی خروس مورد بررسی قرار گرفت.
مواد و روش هادر این مطالعه اثر عصاره بیضه موش و خروس بالغ در مقایسه با سه عامل رشد GDNF، bFGF و LIF بر روی ویژگی کلنی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی خروس در طی چهار روز تیمار تحت بررسی قرار گرفت. پس از مشخص شدن غلظت بهینه عوامل مورد آزمایش، سلول ها به مدت دوهفته تحت تیمار قرار گرفتند و سپس بررسی بیان ژن OCT4 به عنوان یک ژن حائز اهمیت در سلول های بنیادی اسپرماتوگونی با روش Real-time RT-PCR انجام پذیرفت.
نتایجنتایج بررسی کلنی زایی نشان داد که پس از گذشت چهار روز از تیمار با عصاره بیضه موش و خروس بالغ در مقایسه با گروه کنترل و همچنین عوامل رشد GDNF، bFGF و LIF در مقایسه با نمونه های کنترل تفاوت قابل ملاحظه ای را در تعداد کلنی های تشکیل شده نشان دادند. نتایج بررسی بیان ژنی نیز نشان داد که پس از گذشت دو هفته از تیمار، بیان ژن OCT4 به طور معنی داری افزایش می یابد.
نتیجه گیرینتایج این مطالعه نشان داد عصاره بیضه می تواند به عنوان جایگزینی مناسب اما قابل ارتقا برای عوامل رشد گران قیمت مطرح گردد.
کلید واژگان: سلول بنیادی اسپرماتوگونی, خودنوزایی, عوامل رشد, عصاره بیضه}IntroductionSpermatogonial stem cells are regarded as the continual generator of sperms in males. They possess the potential to regenerate themselves، provided by the niche، which is necessary for substituting the old sperms with the new ones and their population’s maintenance. There are demanding efforts conducted often on spermatogonial stem cells، and some special growth factors with the capability of reestablishment of this niche under experimental circumstances، but there have been few studies on poultries in this respect.
MethodsIn the present study، the impact of adult mice and roosters testes extracts on colony-formation potential of chicken spermatogonial stem cells in the course of four days، as compared to those of three conventional growth factors (LIF، bFGF and GDNF) was investigated. After determination of the optimum concentrations of growth factors، OCT4 gene expression was measured as one of spermatogonial stem cell activities’ signature via Real-time RT-PCR technique during two weeks treatment.
ResultsThe results of colony forming activity show that in vitro treatment by the mice and roosters testes extracts and the three mentioned growth factors (GDNF،bFGF and LIF) had a considerably discrepancies in terms of the number of created colonies compared to the control group (without adding any factor) after four days. Moreover، the OCT4 over-expressed extremely by these biological impulses after two weeks.
ConclusionThe results indicated that the testes extract would be a valuable substitute for non-economical industrial growth factors.
Keywords: Spermatogonial stem cell, Self renewal, Growth factors, Testes extract} -
Spermatogonial stem cells (SSCs) maintain spermatogenesis throughout life in the male. Maintenance of SSCs and induction of spermiogenesis in vitro may provide a therapeutic strategy to treat male infertility. This study investigated in vitro differentiation of mouse SSCs in presence or absence of Sertoli cells, hormones and vitamins. Spermatogonial populations were enriched from testes of 4-6 week old males by magnetic activated cell sorting and anti-Thy-1 antibody. Sertoli cells isolated from 6-8 week old testes were enriched using lectin-DSA-coated plates. Isolated SSCs were cultured in the presence of Leukemia inhibitory factor (LIF) for 7 days in gelatin-coated dishes, then dissociated and cultured for 7 days in media lacking LIF in the presence or absence of Sertoli cells, with or without FSH, testosterone and vitamins. After one week, the effects of Sertoli cells ± supplementary media on SSC differentiation was evaluated by microscopy and expression of meiotic and postmeiotic transcripts using RT-PCR. SSC colonies had limited development after LIF removal alone, exhibiting low expression of meiotic (Scp3, Th2b) but not postmeiotic transcript, and loss of Stra8 and Dazl expression. SSCs co-cultured with Sertoli cells, hormones and vitamins developed spermatid-like cells expressing postmeiotic markers (TP1, TP2, Prm1) at levels over 2-fold higher than Sertoli cells or hormone/vitamins alone. Our present SSC-Sertoli co-culture provides conditions that may allow efficient in vitro differentiation of SSCs for the treatment of male infertility.Keywords: Differentiation, FSH, Sertoli cell, Spermatogonial stem cell, Testosterone}
-
هدفمقایسه اثر ماتریکس های برون سلولی لامینین و ژلاتین بر کشت کوتاه مدت سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی نوزاد موشمواد و روش هاسوسپانسیون حاوی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی (SSCs) از بیضه موش 6 روزه جدا شده و در ظروف کشت پوشیده با لامینین و ژلاتین که از قبل آماده شده بود، به طور جداگانه در حضور فاکتورهای رشد GDNF (Glial derived neuroterophic factor)، EGF ((Epidermal Growth Factor و Basic Fibroblastic Growth Factor) bFGF به مدت نه روز کشت شد. تعداد کلونی های SSC تشکیل شده و مساحت آن ها در روزهای پنجم، هفتم ونهم در هر گروه اندازه گیری شد، همچنین در روز نهم پس از کشت از رنگ آمیزی ایمونوفلورسنت برای بررسی کیفی بیان نشانگرهای α6-Integrin، β1-Integrin در هر دو گروه استفاده شد و درصد بیان نشانگرهای فوق با استفاده از آزمون فلوسایتومتری مقایسه شد.یافته هارنگ آمیزی ایمونوفلورسنت نشان داد که کلونی ها متشکل از SSCs و برای نشانگرهای α6-Integrin/ β1-Integrin مثبت بود. تعداد کلونی های ایجادشده روی ظروف کشت پوشیده با لامینین به طور معنی داری نسبت به ظروف کشت پوشیده با ژلاتین بیشتر بود، درحالی که مساحت کلونی ها در گروه لامینین کاهش معنی داری نسبت به گروه ژلاتین داشت. براساس نتایج فلوسایتومتری درصد سلول های بیان کننده این ژن ها طی کشت در دو گروه تفاوت معنی داری نداشتند.نتیجه گیریاستفاده از ماتریکس برون سلولی لامینین در کشت سلول های اسپرماتوگونی نوزاد موش به صورت معنی داری موجب افزایش تعداد کلونی های SSC و در عین حال کاهش مساحت آن ها می شود (p≤0.05).
کلید واژگان: سلول های بنیادی اسپرماتوگونی, نوزاد موش, لامینین, ژلاتین}PurposeTo compare the effect of laminin and gelatin on short-term culture of spermatogonial stem cells (SSCs) from neonatal mouse testes.Materials And MethodsCell suspension containing SSCs were isolated from testes of 6 day-old mice and cultured in the presence of Glial-derived neuroterophic factor (GDNF), Epidermal Growth Factor (EGF (and Basic Fibroblastic Growth Factor) bFGF) on laminin- and gelatin- coated plates for 9 days. Number and area of colonies were measured in 5th, 7th and 9th days after culturing. At 9th day Immunostaining was used to detect expression of SSC markers, α6-Integrin and β1-Integrin. moreover, the colonies were harvested and the percentage of α6-Integrin and β1-Integrin positive cells was assessed by flowcytometery in both groups.ResultsImmunostaining analysis showed that our culture system contained SSC colonies as they were positive for α6-Integrin and β1-Integrin. Additionally, the number of colonies those were formed on laminin were significantly higher in comparison with those of other group. but colony area was higher on gelatin. There was no significant difference in percentage of cells that expressed α6-Integrin, β1-Integrin detected by flowcytometry in both groups.Conclusionlaminin as extracellular matrix cause to increase the number of neonate spermatogonial colonies and decrease the area of them (P≤0.05).Keywords: Neonatal mouse, Spermatogonial stem cell, Laminin, Gelatin}
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
©2000-2024 magiran.com All Rights Reserved.