به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

تنها با پرداخت 70 هزارتومان حق اشتراک سالانه به متن مقالات دسترسی داشته باشید و 100 مقاله را بدون هزینه دیگری دریافت کنید.

برای پرداخت حق اشتراک اگر عضو هستید وارد شوید در غیر این صورت حساب کاربری جدید ایجاد کنید

عضویت

جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « ژن های یوکاریوتی » در نشریات گروه « پزشکی »

  • آقای علی اکبر حداد مشهدریزه، آقای محمدرضا سام، خانم صدیقه صفری، آقای علیرضا زمردی پور، آقای سید جواد حسینی، خانم فرزانه صابونی
    زمینه
    قابلیت توالی کوزاک در افزایش بیان ژن های یوکاریوتی مشخص شده است. با توجه به این موضوع می توان از این توانمندی در جهت افزایش بیان پروتئین های نوترکیب استفاده کرد.
    مواد و روش ها
    با هدف بالا بردن بیان ژن فاکتور IX انعقادی، سازه ای بیانی مجهز به پروموتر سایتومگالو ویروس انسانی (CMV) که بیان یک مینی ژن فاکتور IX را تحت کنترل داشت، به توالی کوزاک تجهیز شد. پس از تایید صحت سازه نوترکیب، این سازه به همراه یک سازه بیان کننده فاکتور IX فاقد کوزاک (به عنوان کنترل مثبت) و یک پلاسمید pcDNA3 (به عنوان کنترل منفی) برای ترانسفکشن سلول های تخمدان هامستر چینی (CHO) در سه آزمایش مستقل مورد استفاده قرار گرفتند. محیط کشت سلول های ترانسفکت شده به منظور آشکارسازی بیان فاکتور IX انسانی پس از 2 و 3 روز جمع آوری و مورد آزمون یک مرحله ای انعقاد قرار گرفت.
    یافته ها
    نتایج بدست آمده در مقایسه با کنترل منفی بیانگر بیان فاکتور IX فعال توسط دو گروه سلول های ترانسفکت شده با پلاسمید‎های نوترکیب بود. مقایسه ابتدایی میزان بیان دو گروه سلول های ترانسفکت شده با دو سازه نوترکیب، نشانگر افزایش بیان توسط سلول هایی است که حاوی توالی کوزاک هستند.
    نتیجه گیری
    علاوه بر تایید نقش افزاینده کوزاک بر بیان فاکتور IX، در این طرح با ساخت پلاسمیدهای بیانی ابزار مناسبی برای مطالعه سیستماتیک بیان فاکتور IX انسانی فعال فراهم شد.
    کلید واژگان: توالی کوزاک, ژن های یوکاریوتی, پروتئین نوترکیب, فاکتور IX}
    A.A. Mashhadrizeh, M.R. Sam, S. Safari, A.R. Zomorodipour*, S.J. Hosseini, F. Sabooni
    Background
    The positive effect of Kozak sequence on the translational efficiency of the eukaryotic genes has been noted and can be used in order to increase recombinant protein expression.
    Methods
    A CMV-regulated human factor IX (hFIX) –expressing plasmid containing factor IX minigene– equipped with the Kozak sequence was constructed. After verification, the constructed plasmid which was in parallel with a Kozak-less hFIX-minigene expressing plasmid (the positive control) and a parental plasmid (pcDNA3) as the negative control were used to transfect Chinese Hamster Ovary (CHO) cells, separately. The expression of the recombinant hFIX (rhFIX) was evaluated by performing one-stage coagulation test on the cultured media collected from the transfected cells after 2 and 3 days.
    Results
    This study indicated the expression of biologically active hFIX by cells transfected with either of the recombinant plasmids in comparison with negative control. The data also shows a higher coagulation activity in the cultured media taken from the cells transfected with the Kozak: hFIX-minigene compared to that of the cells transfected with the Kozak-less hFIX-minigene.
    Conclusion
    In addition to confirming the positive effect of Kozak sequence on the translational efficiency of the eukaryotic genes, the constructed plasmids provide new tools for systematic analysis of the ability of the transfected cells for the production of biologically active hFIX.
نکته
  • نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
  • کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
  • در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
درخواست پشتیبانی - گزارش اشکال