به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

تنها با پرداخت 70 هزارتومان حق اشتراک سالانه به متن مقالات دسترسی داشته باشید و 100 مقاله را بدون هزینه دیگری دریافت کنید.

برای پرداخت حق اشتراک اگر عضو هستید وارد شوید در غیر این صورت حساب کاربری جدید ایجاد کنید

عضویت

جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « In Situ Hybridization » در نشریات گروه « پزشکی »

  • Kiarash Parchami *, Samira Derakhshan, Hana Saffar, Pouyan Aminishakib, AhmadReza Shamshiri, Samaneh Afshar
    Background

    High-risk Human Papillomavirus (HPV) genotypes are found in malignant oral epithelial lesions, and HPV infection is proposed as a risk factor for initiating Squamous cell carcinoma (SCC) in the head and neck region. This study suggests a practical approach to detect HPV in HPV-associated oral epithelial dysplasia (HAOED).

    Methods

    Fifty-four oral epithelial dysplasia specimens were examined, comprising twenty-seven cases diagnosed with high-grade dysplasia and twenty-seven cases diagnosed with low-grade dysplasia using a binary grading system. To assess the cases for HPV, the specimens were examined for p16 protein using an immunohistochemical (IHC) study, and then, the Chromatin In Situ Hybridization (CISH) test was performed for all positive cases. Chromatin Immunoprecipitation-Polymerase Chain Reaction (ChIP-PCR) was performed on CISH-positive specimens to assess the outcome. This cross-sectional study was conducted in 2020 at Tehran University of Medical Science. SPSS software version 22.0 was used to perform the Chi square or Fisher’s exact test to examine the relationship between variables (statistically significant level P<0.05).

    Results

    The expression of p16 protein was not associated with the severity of epithelial dysplasia (81.5% in low-grade and 59.2% in high-grade cases) (P=0.16). Moreover, according to the CISH test result, 9.25% of all specimens were positive (P>0.99), and in the nine cases, undergone the ChIP-PCR study, two cases (22.2%) showed positivity for HPV-16, while one case (11.1%) demonstrated positivity for HPV-51.

    Conclusion

    Regarding HAOED, here, we proposed a step-by-step combination approach using different diagnostic methods, including IHC for p16 protein, CISH, and ChIP-PCR based on a complementary algorithm.

    Keywords: Human papillomavirus virus, Squamous Cell Carcinoma of Head, Neck, Immunohistochemistry, In situ hybridization, Polymerase chain reaction}
  • Sajitha K, Meenakshi Arumugam *, Jayaprakash Shetty, Reshma Shetty, Ritu Asnani, Prashanth Shetty
    Background & Objective

    Breast cancer is the most common cancer in developed and developing countries. This study mainly addresses the issue of an equivocal result in IHC, which then needs further assessment if the patient has to receive targeted therapy. The study aimed to detect the expression of Her2/neu protein in breast cancer by immunohistochemistry (IHC) and Fluorescence in situ Hybridization (FISH) and evaluate concordance and discordance between the two methods. Also, the clinicopathological parameters in these patients were studied in association with ER, PR, HER-2, and Ki-67.

    Methods

    This study was conducted on 34 female carcinoma breast specimens, including core biopsies and mastectomies. Each case underwent histopathological and immunohistochemical studies for (Estrogen Receptor) ER, (Progesterone Receptor) PR, (Human Epidermal growth factor Receptor 2) HER-2, and Ki-67. In addition, FISH was done on all the samples to detect Her2 gene amplification.

    Results

    The overall concordance between the two tests was 79.41% while the concordance between the two tests in equivocal cases, was 14.3%. ER/PR expression and HER-2 amplification were inversely associated. Also, Ki-67 expression was not associated with the side size of the lesion, lymphovascular invasion, and lymph node metastasis. Age less than 50 at presentation and infiltrating ductal carcinoma histological type showed increased proliferation index.

    Conclusion

    The highest concordance between FISH and IHC was noted in IHC positive and negative cases, whereas IHC equivocal cases showed low concordance. FISH accurately determines the assessment of HER2 expressions in equivocal cases.

    Keywords: Carcinoma, Immunohistochemistry, In situ Hybridization, Fluorescence, Triple Negative breast neoplasms}
  • Alireza Tabibzadeh, Mahshid Panahi, Behnaz Bouzari, MohammadTaghi Haghi Ashtiani, Farhad Zamani, Hadi Teimoori Arzati, MohammadHadi Karbalaie Niya
    Background and Objectives

    The human papillomavirus (HPV) is associated with more than 70% of the cervical neoplasm. The current study aims to evaluate the distribution of HPV genotypes in suspected women cytological specimens from Tehran, Iran.

    Materials and Methods

    In the current cross-sectional study, HPV genotype prevalence was investigated in 433 subject women. DNA extraction was performed by High Pure Viral Nucleic Acid kit. A semi-automatically hybriSpot 24™ (HS24) setting was used for HPV typing and data interpreted by hybriSoft™ software according to instructions.

    Results

    Pathologic data showed 181 (41.8%) had non-malignant lesions, 212 (49%) had inflammation and 40 (9.2%) reported LSIL in primary Pap-smear result. HPV was found in 143 (33%) specimens and the most comment high-risk and low-risk HPV types were HPV-16 and -6, respectively. Also, 62 (43%) were co-infected with multiple genotypes includes, 34 (24%) cases had co-infection with two HPV types, 17 (12%) cases had co-infection with three HPV types, 6 (4%) cases had co-infection with four HPV types and 5 (3%) cases had co-infection with five HPV types. There was statistically different domination on high-risk genotype in most of the co-infected samples (p<0.01).

    Conclusion

    Current study indicates that the lesion pathology assessment was significantly associated with the HPV infection (p<0.01). Furthermore, the age group assessment shows that most of the HPV positive cases were 21 to 40 (p<0.01). The HPV infection prevalence in the current study was 33% and the most frequently reported high-risk and low-risk HPV types were 16 and 6, respectively.

    Keywords: Human papillomavirus (HPV), Papillomavirus infections, Uterine cervical neoplasms, In situ hybridization, Co-infection}
  • Maral Mokhtari *, MohammadHadi Khosravi
    Background

    The use of biomarkers has become increasingly important in the diagnosis and treatment of several malignancies, including breast cancer. Among the established biomarkers, receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 (HER-2/ neu) has been found to be of a predictive and prognostic role in breast cancer patients.

    Method

    94 patients with primary breast cancer were enrolled in our prospective study between 2016 and 2017. 5 cc clot blood samples were taken for serum HER- 2/neu testing at the time of diagnosis of breast cancer. The patients’ demographic data, tumor characteristics, including tumor size, tumor grade, presence of lymph node involvement, and stage, hormone receptor, and tissue HER-2/neu status of the subjects were recorded following tumor removal.

    Results

    All of the patients were female with the age range of 27 to 80 years (the mean of age was 49.66. 36 patients (38.3%) had positive tissue HER-2 results and 58 (61.7%) had negative results. In those with high level serum HER-2 ECD, 28(77.7%) had positive tissue HER-2 and 8(22.2%) had negative results. Moreover, in the patients with low level serum HER-2 ECD, 8(13.7%) had positive tissue HER-2 and 50(86.2%) had negative results with the sensitivity of 77.7% and specificity of 86.2%. HER2 ECD levels were highly concordant with tissue HER2 status, with a P value of less than 0.001, which was considered to be statistically significant. Among different clinicopathologic variables, serum and tissue HER-2/nu were significantly correlated with only tumor grade.

    Conclusion

    A significantly increased release of HER2 ECD levels may accurately predict tumor HER2 status as detected with immunohistochemistry and/or in situ hybridizations studies.

    Keywords: Breast neoplasms, HER 2 proto-oncogene protein, In situ hybridization}
  • Parishad Saei, Masood Bazrgar *, Hamid Gourabi, Roxana Kariminejad, Poopak Eftekhari-Yazdi, MostafaFakhri
    Background

    Embryonic aneuploidy usually results in implantation failure and miscarriage. Considering significantly high frequency of sperm aneuploidy reported in oligoasthenoteratozoospermia (OAT) using fluorescence in situ hybridization (FISH) in limited number of chromosomes and lack of comprehensive chromosome screening (CCS) in OAT, the aim of this study was applying CCS in OAT sperm and comparison of the results with FISH findings.

    Methods

    Five OAT patients with normal blood karyotypes and history of implantation failure were included. The successfully amplified samples, each containing two sperm, were analyzed by array comparative genomic hybridization (aCGH). FISH was utilized mainly depending on the aneuploidies found by aCGH to assess their frequencies in total sperm population.

    Results

    In aCGH for 30 sperm, aneuploidy was found in 66% of samples. Following the study of 4300 sperm by FISH, an average of 55.46% aneuploidy was observed. No pregnancy was resulted with normal partners.

    Conclusion

    Using aCGH, some abnormalities were observed that are not typically considered in sperm FISH studies. Despite small sample size of the comprehensive study, like other similar studies, the frequency of aneuploidies was considerable and similar to FISH. Aneuploidies revealed by aCGH at single sperm resolution were different from sperm population detected by FISH. Considering high frequency of aneuploidy in OATs sperm, preimplantation genetic testing for aneuploidy (PGT-A) can be used for in transfer of chromosomally normal embryos.

    Keywords: Aneuploidy, Array comparative genomic hybridization, Fluorescence, In situ hybridization, Oligospermia, Spermatozoa}
  • Nema Mohamadian Roshan, Sepideh Salehabadi, Melika Kooshki Forooshani, AzinNikoozadeh *
    Background

    Digital image analysis (DIA), used to extract information from pathology slides, provides better precision and no limitation regarding different interpretations by observers.

    Objectives

    The present study aimed at evaluating the accuracy of DIA in the interpretation of borderline (2+) human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) immunohistochemistry (IHC) slides of invasive ductal carcinoma of the breast.

    Methods

    Sixty pathology samples with invasive ductal carcinoma of the breast were extracted based on HER2 (2+) and their fluorescence in situ hybridization (FISH), and chromogenic in situ hybridization (CISH) responses (as reference standard). The slides were digitized and, then, two pathologists examined the slides and documented diagnosis. DIA was performed by a free web application.

    Results

    Totally, 307 digital images with 298 megabytes volume were extracted. The accuracy, sensitivity, and specificity values of DIA were 86 %, 46.1 %, and 97.8 %, respectively, with 8 false-negative cases. There was moderate agreement between the pathologist 1 (kappa = 0.42) and pathologist 2 (kappa = 0.41) with DIA.

    Conclusions

    DIA had good accuracy and could be used for the interpretation of borderline HER2 IHC method in invasive ductal carcinoma.

    Keywords: Image Interpretation, Computer-Assisted, In Situ Hybridization, Fluorescence, Receptor, ErbB-2, Immunohistochemistry}
  • Jamileh Saberzadeh, Mohammad Reza Miri, Mehdi Dianatpour, Abbas Behzad Behbahani, Mohammad Bagher Tabei, Mohsen Alipour, Mohammad Ali Faghihi, Majid Fardaei *
    Small supernumerary marker chromosomes (sSMCs), or markers, are abnormal chromosomal fragments that can be hereditary or de novo. Despite the importance of sSMCs diagnosis, de novo sSMCs are rarely detected during the prenatal diagnosis process. Usually, prenatally diagnosed de novo sSMCs cannot be correlated with a particular phenotype without knowing their chromosomal origin and content; therefore, molecular cytogenetic techniques are applied to achieve this goal. The present study aimed to characterize an sSMC in a case of Klinefelter syndrome using an in-house microsatellite analysis method and fluorescent in situ hybridization (FISH) technique. Amniotic fluid was collected from a pregnant woman who was considered to have risk factors for trisomy higher than the screening cut-off. Karyotype analysis was followed by the amplification of different microsatellite loci and FISH technique. Karyotype analysis identified a fetus with an extra X chromosome and also an sSMC with unknown identity. Further investigation of the parents showed that the sSMC is de novo. Microsatellite amplification by quantitative fluorescent PCR (QF-PCR) and FISH analysis showed that the sSMC is a derivative of chromosome 18. Eventually, the patient decided to terminate the pregnancy. Here, the first case of the coincidence of sSMC 18 in a Klinefelter fetus is reported.
    Keywords: Prenatal diagnosis, Klinefelter syndrome, Multiplex polymerase chain reaction, In situ hybridization, fluorescence}
  • Mirela Mackic-Đ, Urovic, Meliha Stomornjak-Vukadin, Slavka Ibrulj
    We report an extremely rare case of Turner syndrome mosaicism in a 30-year-old woman. At least 100 metaphases were observed and analyzed through GTG banding with over 550 band resolutions observed. G-banded chromosome analysis revealed a mosaic female karyotype involving 3 different cell lines. One cell line (90% of the analyzed metaphases) presented monosomy X, while 6% of the cells showed trisomy of chromosome 21 and 4% of the cells exhibited a normal female karyotype. Fluorescence in situ hybridization with a locus-specific probe for trisomy 21 and CEP X for monosomy X substantiated the results obtained from karyotyping. Our patient had 2 natural pregnancies, both of which produced children with Down syndrome. In our patient, as is the case with other women with infertility, the necessary routine is cytogenetic analysis (together with genetic counseling). The same analysis can be helpful in implementing assisted reproductive techniques.
    Keywords: Turner syndrome, Down syndrome, Mosaicism, In situ hybridization, Fluorescence}
  • ملیحه خالقیان، عیسی جهانزاد، عباس شکوری، ندا زرگری، مریم محمدی، سیروس عظیمی*
    زمینه و هدف
    بروز سرطان معده در کشورهای غربی در سال های اخیر کاهش نشان داده است، در حالی که در ایران شایع ترین سرطان در بین مردان است. ژن MYC، در روی کروموزوم 8q24.1 قرار گرفته و در حدود 15% ژن های انسان را تنظیم و در 20% تمام تومورهای انسان فعال می شود. تکثیر MYC و بیان بیش از حد آن در 30-15% نئوپلازی های معده مشاهده شده است. هدف از این مطالعه، بررسی برتری آزمایش CISH نسبت به IHC در پیش آگهی سرطان معده بود.
    روش بررسی
    در این مطالعه مقطعی، 102 بلوک پارافینه از نمونه سرطان معده مورد بررسی قرارگرفت و تمام بیماران در انستیتو کانسر ایران، دانشگاه علوم پزشکی تهران مورد جراحی قرار گرفته بودند. این مطالعه از فروردین سال 1387 تا مهر 1393 انجام گردید. بر روی نمونه ها دو روش(Chromogenic in situ hybridization (CISH و (Immunohistochemistry (IHC به طور جداگانه انجام شد. محاسبه آماری با (SPSS software، ver. 18 (Chicago، IL، USA انجام گردید.
    یافته ها
    داده ها نشان داد که هر دو نوع سرطان معده منتشر و روده ای در مردان به طور قابل توجهی بیشتر اتفاق می افتد. نتایج ما نشان داد که نشانه ای از همبستگی بین Grade و آزمایش CISH وجود دارد، گرچه این تفاوت معنادار نبود و همچنین بین Stage و IHC تفاوت معناداری وجود نداشت (P=0/252). آزمایش CISH بیشتر بیماران، بیش از دو سیگنال (1/ 43%) ولی تعداد کمتری از بیماران تست (IHC (14/7% سیگنال مثبت داشتند. بین آزمایش CISH و IHC ارتباط وجود داشت. ولی هیچ اختلاف معناداری بین تکثیر CISH در انواع منتشر و روده ای وجود نداشت (P=0/706).
    نتیجه گیری
    این نتایج نشان داد که آزمایش CISH نسبت به IHC آزمایش بهتری برای شناسایی C-MYC در سرطان معده می باشد.
    کلید واژگان: تکثیر و بیان انکوژن C, MYC, نئوپلاسم معده, ایران, CISH, ایمونوهیستوشیمی}
    Malihea Khaleghian, Issa Jahanzad, Abbas Shakoori, Neda Zargari, Maryam Mohamadi, Cyrus Azimi*
    Background
    The incidence rate of gastric cancer in Western countries has shown a remarkable decline in recent years although it is still the almost common cancer between men in Iran. The proto-oncogene MYC, located at 8q24.1, regulates almost 15% of human genes and is activated in 20% of all tumors. MYC amplification and overexpression of its protein product are observed in 15-30% of gastric neoplasia. The objective of this study was to find the preference of CISH or IHC in the diagnosis and prognosis of gastric cancer.
    Methods
    In this cross-sectional investigation, 102 paraffin blocks samples of Iranian patients with gastric cancers were studied. All the patients had undergone primary surgical resection at the Cancer Institute Hospital, Tehran University of Medical Sciences from 1987 to 1993. CISH and IHC techniques were applied to the samples. CISH was carried out on 3-µm-thick tissue sections and with a ZytoDot CISH Implementation Kit (ZytoVision GmbH, Germany). IHC was down using the HRP method with the monoclonal antibody. A universal peroxidase-conjugated secondary antibody kit was used for the detection system. All samples were gastric adenocarcinoma and were selected randomly.
    Results
    Our data revealed that both diffuse and intestinal types of gastric cancer occurred significantly in men more than women. Our results showed an indication of some correlation between grades and CISH results, although the difference was not significant. Our data also showed that CISH+ patients (43.1%) were more frequent in comparison with IHC+ patients (14.7%). There was a correlation between CISH and IHC. This result revealed that there was a significant difference between grades and IHC. There was also no statistically significant difference between CISH amplification in diffuse and intestinal types.
    Conclusion
    Our conclusion is that for the treatment, management of stomach cancer, and monitoring of progress and prognosis of the tumor that is almost important for patients and clinicians, CISH test is a better and feasible to IHC test, with regards to sensitivity and specificity.
    Keywords: C, MYC, immunohistochemistry, in situ hybridization, Iran, stomach neoplasms, treatment outcome}
  • زهرا نزهت، مهدی هدایتی *

    دورگه سازی در محل، روشی است که در آن از پروب های اسید نوکلئیک برای بررسی انواع تغییرات ژنتیکی در سلول های دست نخورده و بافت های تثبیت شده استفاده می شود. مراحل مختلف این روش شامل انتخاب پروب، آماده سازی نمونه، تیمار پیش از دورگه سازی، دورگه سازی، شستشو، آشکارسازی و روند کنترل می باشند. انتخاب پروب مناسب یکی از جنبه های مهم انجام فرایند دورگه سازی موفقیت آمیز است. حساسیت و ویژگی In situ Hybridization (ISH) می تواند توسط عوامل مختلفی مانند ساختار پروب، روش نشاندار کردن، درصد جفت بازهای GC، طول پروب و سیستم آشکارسازی سیگنال تحت تاثیر قرار گیرد. تهیه پروب ها به چندین روش انجام می گیرد و از مواد رادیواکتیو و غیررادیواکتیو جهت نشاندار کردن آنها استفاده می شود. مرحله آماده سازی، با هدف حفظ اسیدهای نوکلئیک در نمونه، حفظ مورفولوژی سلول ها و بافت و افزایش نفوذ پروب به داخل نمونه انجام می گیرد. پس از مرحله آماده سازی، محلول حاوی پروب جهت انجام فرایند دورگه سازی به نمونه اضافه شده و پس از انکوباسیون یک شبه، پروب های متصل نشده از طریق شستشو، حذف می گردند. نحوه آشکارسازی سیگنال ها با توجه به نوع ماده مورد استفاده برای نشاندار کردن پروب ها متفاوت خواهد بود. استفاده از فرایندهای کنترل گوناگون برای اطمینان از ویژگی دورگه سازی، اهمیت بسیاری دارد. در تکنیک های مختلفی مانند Fluorescence In Situ Hybridization (FISH)، Chromogenic in situ hybridization (CISH)، Genomic in situ hybridization (GISH)، Comparative genomic hybridization (CGH)، Spectral karyotyping (SKY) و Multiplex fluorescence in situ hybridization (MFISH)، از دورگه سازی در محل استفاده می شود. این تکنیک ها کاربردهای بسیار مهمی در تشخیص سرطان، بیماری های ژنتیکی و عفونی دارند. در این مقاله مروری فرایند دورگه سازی در محل، انواع مختلف آن، کاربردها، مزایا و معایب هر یک از آنها مورد بررسی قرار گرفته است.

    کلید واژگان: دورگه سازی در محل, پروب مولکولی, پروب هایی از جنس DNA, دورگه سازی قیاسی ژنوم}
    Zahra Nozhat, Mehdi Hedayati

    In situ hybridization (ISH) is a method that uses labeled complementary single strand DNA or RNA to localize specific DNA or RNA sequences in an intact cell or in a fixed tissue section. The main steps of ISH consist of: probe selection, tissue or sample preparation, pre-hybridization treatment, hybridization and washing, detection and control procedure. Probe selection is one of the important aspects of successful hybridization. ISH sensitivity and specificity can be influenced by: probe construct, efficiency of labeling, percentage of GC, probe length and signal detection systems. Different methods such as nick translation, random priming, end tailing and T4 DNA polymerase replacement are used for probe generation. Both radioactive and non-radioactive labels can be used in order to probe labeling. Nucleic acid maintenance in samples, prevention of morphological changes of samples and probe penetration into tissue section are the main aims of sample preparation step. Then, a small amount of solution containing probe, is added on slides containing tissue sections for hybridization process, then slides are incubated overnight. Next day, washes are carried out to remove the probes which are not bound to target DNA or RNA. Finally, in order to be sure that the observed labeling is specific to the target sequence, using several control procedures is very important. Various techniques based on ISH consist of: Fluorescence in situ hybridization (FISH), chromogenic in situ hybridization (CISH), genomic in situ hybridization (GISH), comparative genomic hybridization (CGH), spectral karyotyping (SKY) and multiplex fluorescence in situ hybridization (MFISH). One of the most common techniques of ISH is fluorescence in situ hybridization. FISH can be used to: 1) detect small deletions and duplications that are not visible using microscope analysis, 2) detect how many chromosomes of a certain type are present in each cell and 3) confirm rearrangements that are suspected after microscope analysis. In this technique different fluorescent labels are attached to the probes. In this review article ISH, its different types, their application, advantages and disadvantages have been considered.

    Keywords: comparative genomic hybridization, DNA probes, in situ hybridization, molecular probes}
  • سید مهدی حسینی، فاطمه منتظری، علی محمد فروغمند*، محمدرضا دهقانی، حمیدرضا قدیمی

    امروزه علم ژنتیک و مباحث پیرامون آن بطور گسترده در علوم مختلف و بویژه در حوزه علوم پزشکی (تحقیقاتی و بالینی) نفوذ قابل توجهی داشته است. با توجه به شیوع بالای بیماری های ژنتیکی ارثی و غیر ارثی بویژه در کشور ما که شیوع ازدواج های فامیلی نسبتا بالا می باشد، کاربرد انواع تست های ژنتیکی در زمینه های تشخیص، درمان، پیش آگهی و بسیاری از حوزه های دیگر اهمیت بسزایی یافته است. با این وجود سیر تحول در حوزه تست های ژنتیکی چنان سرعتی دارد که معرفی هرچه بیشتر انواع تست های ژنتیکی می تواند کمک موثری برای همراه شدن جامعه علمی کشور با این تحولات گسترده باشد. این مقاله برآن است تا پس از معرفی مختصری از انواع تست های ژنتیکی بر اساس هدف کاربردی آن ها، به معرفی فرایندها، کاربردها، معایب و مزایای برخی از پرکاربردترین تست های ژنتیکی در دو حوزه سیتوژنتیک و ژنتیک ملکولی بپردازد. از جمله در حوزه سیتوژنتیک به معرفی تستهای کاریوتایپنگ، فلوسیتومتری، FISH، CGH و در حوزه ژنتیک ملکولی انواع روش های مبتنی بر PCR، کمی سازی PCR و PCR چندگانه مثل MAPH/MLPA، انواع روش های مبتنی بر تکنولوژی ریزآرایه (Microarray) و تکنیک های نسل جدید توالی یابی (NGS) پرداخته خواهد شد.

    کلید واژگان: تست های ژنتیکی, کاریوتایپنگ, فلوسیتومتری, FISH, روش های مبتنی بر PCR, MLPA, ریزآرایه ها, CGH, NGS}
    Seyed Mehdi Hoseini, Fateme Montazeri, Ali Mohammad Froughmand, Mohammadreza Dehghani, Hamid Reza Ghadimi

    Nowadays، the science of genetics and relevant issues have influenced various fields of science، particularly the fields of medical sciences (research and clinical field). Considering the high prevalence of hereditary and non- hereditary genetic disorders، especially in our country due to the relatively high prevalence of consanguineous marriages، application of genetic testing for diagnosis، treatment، prognosis، etc. is of considerable importance. However، evolution in the field of genetic testing is very fast and better introduction of different genetic tests can effectively help the scientific community to follow these extensive developments. In this paper، a brief introduction to different genetic tests based on their functional purposes will be provided. In the following، we will present a brief description of the processes، applications، advantages and disadvantages of some of the most commonly used genetic tests in both cytogenetics and molecular genetics fields. In the field of cytogenetics، karyotyping، flow cytometry، FISH، and CGH will be included and in the field of molecular genetics، PCR-based methods، multiplex PCR quantification such as MAPH / MLPA، microarrays and related technologies and next generation sequencing (NGS) will be discussed.

    Keywords: Genetic Testing, Karyotyping, Flow Cytometry, In Situ Hybridization, Fluorescence, Comparative Genomic Hybridization, PCR, Based Methods, Multiplex Polymerase Chain Reaction, Microarrays, Next Generation Sequencing}
  • Parviz Deyhimi, Mahsa Kalantari
    Background
    The association of Epstein-Barr virus (EBV) with Burkitt’s lymphoma (BL) is variable in different geographic regions. In developing countries, the association of EBV with BL is regarded to be of an endemic-type in equatorial Africa (> 95%) and sporadic-type in the developed countries (15-30%). The purpose of this study is to assess the frequency of EBV infection in BL, in Iran. The study also aims to compare Ribonucleic acid (RNA) in situ hybridization (RISH), the standard diagnostic method, with the polymerase chain reaction (PCR)-based method for diagnosing BL.
    Materials And Methods
    In this epidemiological study, the paraffi nized specimens of 18 cases of BL were selected. Next, the ISH of EBV-encoded RNA (EBER-RISH) and PCR assays that were based on Epstein Barr Nuclear Antigen 2 (EBNA2) amplifi cation were used. The EBV strain was determined by PCR. The data were analyzed using the SPSS10 software and by performing Pearson correlation coeffi cient formula at a signifi cant level of 0.05.
    Results
    EBV RNA was detected in 50% of the BL specimens. Type 1 and 2 accounted for 70 and 30% of the cases, respectively. Regarding RISH as the standard method for EBV diagnosis, the PCR assays showed a sensitivity and specifi city of 100 and 88.9%, respectively.
    Conclusion
    According to the obtained fi ndings, the frequency of EBV in BL was 50% and PCR and RISH showed high concordance and sensitivity in EBV detection. Therefore, PCR can be used as a faster method for EBV detection in high-risk geographical regions.
    Keywords: Burkitt's lymphoma, Epstein, Barr virus, in situ hybridization, polymerse chain reaction}
  • لیلا مظفری، سهراب نجفی پور*، محمدحسن مشکی باف، علی مروج
    زمینه
    ویروس اپشتین بار (EBV)، هرپس ویروسی تومورزا است و به خانواده DNA ویروس ها تعلق دارد که لنفوسیت های B را در اکثریت انسانها عفونی کرده و پایدار باقی می ماند و همچنین با بخشی از موارد لنفوم هوجکین در ارتباط می باشد. هدف از پژوهش حاضر بررسی حضور ویروس اپشتین بار در لنفوم هوجکین کودکان ایرانی با روش هیبریدیزاسیون ناحیه ای می باشد.
    مواد و روش ها
    در این مطالعه، تعداد 16 نمونه بافتی لنفوم هوجکین بصورت بلوک های پارافینه فیکس شده در فرمالین از بخش های بایگانی بیمارستان های کشور جمع آوری شد. این نمونه ها از بیوپسی بافت های سرطانی بدست آمده بود، حضور رونوشت های RNA ی کد شده توسط ویروس اپشتین بار با روش هیبریدیزاسیون ناحیه ای EBER(EBER-ISH) مورد بررسی گرفت. داده ها با استفاده از نرم افزار آماری SPSS 16، آزمون دقیق فیشر آنالیز شدند.
    نتایج
    حضور ویروس اپشتین بار (EBV) در 16 نمونه پارافینه فیکس شده در فرمالین از بیماری هوجکین بوسیله هیبریدیزاسیون ناحیه ای EBERs بررسی شد. 12 نمونه مذکر (75%) و 4 نمونه مونث (25%) بودند. محدوده سنی بیماران 12-4 سال (با میانگین سنی 8 سال) بود. در 12 نمونه (75%) ویروس اپشتین بار حضور داشت. موارد مثبت شامل 9 نمونه مذکر (75%) و 3 نمونه مونث (75%) بود. آزمون دقیق فیشر هیچ گونه تفاوت آماری معنی داری بین دو جنس نشان نداد (000/1 p-value:). ویروس اپشتین بار در زیر تایپ های مختلف لنفوم هوجکین حضور داشت. 80% (4 از 5) از زیر تایپ های Mixed cellularity، 67% (6 از 9) sclerosis Nodular و 100% (2 از 2) Lymphocyte predominanceمثبت شدند. تفاوت معنی داری بین زیر تایپ ها وجود نداشت (826/0: p-value). حضور ویروس اپشتین بار در گروه های سنی 7-4 سال و 12-8 سال به ترتیب 5/71% (5 از 7) و 8/77% (7 از 9) بود. تفاوت معنی داری بین گروه های سنی وجود نداشت (000/1 p-value:).
    نتیجه گیری
    نتایج این پژوهش ارتباط قویی بین ویروس اپشتین بار و لنفوم هوجکین در کودکان ایرانی نشان می دهد. ارتباط لنفوم هوجکین و ویروس اپشتین بار در کودکان ایرانی الگوی مشابهی با دیگر کشور های در حال توسعه را نشان می دهد.
    کلید واژگان: ویروس اپشتین بار, لنفوم هوجکین, هیبریدیزاسیون ناحیه ای, EBERs}
    Leila Mozafari, Dr Sohrab Najafipour *, Dr Mohammad, Hassan Meshkibaf, Ali Moravej
    Background and Objectives
    Epstein-Barr virus (EBV) is a tumorigenic herpes virus and belong to DNA viruses that infects and persists in B lymphocytes in the majority of humans and also is associated with a portion of cases of Hodgkin lymphoma (HL). The aim of the present study was to investigate the presence of Epstein-Barr virus in Hodgkin's lymphoma through EBERs in situ hybridization (EBERs-ISH) in children Iranian.
    Materials and Methods
    In this study, 16 Hodgkin's lymphoma tissue samples formalin-fixed paraffin embedded blocks collected from the archive of departments country hospitals. Samples were obtained from the tissue cancer biopsies, The presence of RNA transcripts encoded by Epstein-Barr virus were analyzed with EBERs in situ hybridization (EBERs-ISH). Data analyzed by SPSS16 statistical software, Fisher's exact test.
    Results
    The presence of Epstein-Barr virus (EBV) in 16 formalin-fixed, paraffin-embedded samples of Hodgkin's disease (HD) was investigated by EBERs in situ hybridization. 12 samples were from male (75%) and 4 samples were from female (25%). Age range of Patients was 4 -12 years (with a median of 8 years). In 12 specimens (75%) Epstein-Barr virus was present. The positive cases included 9 male samples (75%) and 3 female samples (75%). Fisher's exact test showed statistically no significant difference between sex (p-value: 1.000). Epstein-Barr virus was present in different subtypes of Hodgkin's lymphoma. 80% (4 of 5) of Mixed Cellularity (MC), 67% (6 of 9) of Nodular Sclerosis (NS) and 100% (2 of 2) of Lymphocyte Predominance (LP) subtypes were positive. There is not significant different between subtypes (p-value: 0.826). The presence of Epstein-Barr virus in the age groups of 4-7 and 8-12 years were 71.5% (5 of 7) and 77.8% (7 of 9), respectively. There is not significant different between age groups (p-value: 1.000).
    Conclusion
    Study results show strong association between Epstein-Barr virus and Hodgkin lymphoma in Iranian children. Epstein-Barr virus and Hodgkin lymphoma association in Iranian children show similar pattern with other developing countries.
    Keywords: Epstein, Barr Virus, Hodgkin's lymphoma, in situ hybridization, EBERs}
  • علی محمد فروغمند، محمدرضا دهقانی، سید مهدی کلانتر، حمیدرضا قدیمی، فاطمه منتظری
    اختلالات قلبی مادرزادی، سهم قابل توجهی از نقایص مادرزادی را به خود اختصاص می دهند. اخیرا و پس از ارائه فرضیه اتیولوژی چند عاملی در رابطه با این اختلالات، اهمیت استعداد ژنتیکی افراد در ابتلا به این بیماری ها پررنگ تر گردیده است. در این رابطه آزمایش های ژنتیکی متعددی در دو حوزه تحقیقاتی و بالینی در دست بررسی هستند. در این مقاله به معرفی مقایسه ای برخی از متداول ترین تست های تشخیصی که امروزه در حوزه بالینی هم کاربرد دارند خواهیم پرداخت. از جمله تکنیک های جدیدی که در این مجال به آنها پرداخته خواهد شد، تکنیکهای سلولی-مولکولی مثل FISH و CGH Array و همچنین تکنیکهای ملکولار مانند Q-PCR و MLPA و... در شناسایی لکوس ها و ژن های مرتبط با اختلالات قلبی مادرزادی است. بدیهی است با توجه به نقش روز افزون تکنیک NGS در تشخیص علل ژنتیکی بیماری ها، طبیعتا سیمای تشخیصی و درمانی بسیاری از بیماری هایی که تاکنون علل مشخص ژنتیکی برای آنها تعیین نگردیده است، تغییرات شگرفی خواهد کرد. سعی بر آن است تا تست های تشخیصی پرکاربرد در شناسایی سندرم ها و اختلالات مادرزادی قلبی شایع مانند: دی جرج، ویلیام- برن، نونان و سایر ریزحذف های کروموزومی مرتبط مورد تاکید بیشتری قرار گیرند. امید است مقاله پیش رو اطلاعات خوبی در خصوص استفاده صحیح و به هنگام این آزمایشات در اختیار جامعه پزشکی و بویژه متخصصان قلب و زنان و زایمان قرار دهد تا به اتخاذ رویکردهای پیشگیرانه و درمانی مناسب منجر شود.
    کلید واژگان: نقایص مادرزادی قلبی, دورگه سازی فلورسنت درجا, دورگه سازی ژنومی مقایسه ای ریزآرایه}
    Ali Mohammad Forughmand, Mohammad Reza Dehghani, Seyyed Mehdi Kalantar, Hami Reza Ghadimi, Fatemeh Montazery
    Congenital heart defects constitute a high percentage of congenital malformations. After presenting a hypothesis concerning the multifactorial etiology of these disorders، the importance of genetic susceptibility in congenital heart defects has been highlighted. In this regard، various genetic tests are under investigation in research laboratories and clinics. This article introduces some of the most common diagnostic genetic tests that are currently used in clinical diagnosis of congenital heart defects. These techniques are divided into two categories، modern molecular techniques such as Q-PCR and MLPA، and cytomolecular techniques such as FISH and Array-CGH that are used to identify loci and genes associated with congenital heart defects. Considering the role of the new technique of NGS in determining the genetic causes of diseases، the diagnosis and treatment of many diseases with unexplained genetic causes would tremendously change. In this manuscript، we discussed new diagnostic tests that can be used used in detecting the genetic causes of several common congenital heart defects or chromosomal microdeletion syndromes such as Di George، William - Bern، Noonan، etc. This article provides good information on the proper use of genetic tests for the medical community، especially cardiologists، obstetricians، and gynecologists and might help them to make appropriate decisions in prevention and treatment approaches.
    Keywords: Heart Defects, Congenital, In Situ Hybridization, Fluorescence, Comparative Genomic Hybridization}
  • لیلا مظفری، سهراب نجفی پور، محمدحسن مشکی باف، علی مروج
    زمینه و هدف
    ویروس اپشتین بار (EBV) با بیماری های مختلف از جمله منونوکلئوز عفونی، لنفوم بورکیت، لنفوم هوجکین، کارسینوم نازوفارنکس و اختلالات لنفوپرولیفراتیو پس از پیوند مرتبط می باشد. هدف این مطالعه بررسی ارتباط ویروس اپشتین بار بالنفوم هوجکین در نمونه های بیماران ایرانی بوسیله روش هیبریدیزاسیون ناحیه ای EBER است.
    مواد و روش ها
    در این مطالعه، تعداد 43 نمونه بافتی لنفوم هوجکین از بلوک های پارافینه فیکس شده در فرمالین انتخاب شدند و بوسیله روش هیبریدیزاسیون ناحیه ای EBER بررسی گردیدند. داده ها با استفاده از نرم افزار آماری SPSS16 و آزمون دقیق فیشر و آزمون منتل-هنسل در سطح معنی دار 05/0 آنالیز شدند.
    نتایج
    43 نمونه بیماران لنفوم هوجکین مورد مطالعه شامل 29 (67%) مرد و 14 (33%) زن بودند. در 20 نمونه (47%) ویروس اپشتین بار حضور داشت که موارد مثبت شامل 13 مرد و 7 زن بود، آزمون دقیق فیشر تفاوت معنی داری بین جنس و زیر تایپ نشان نداد. توزیع سنی ارتباط لنفوم هوجکین و ویروس اپشتین بار بصورت 75% (12 از 16) در گروه سنی 14-1 سال، 22% (5 از 23) در گروه سنی 49-15 سال و 75% (3 از 4) در گروه سنی بالای 49 سال بدست آمد. آزمون دقیق فیشر تفاوت معنی داری بین گروه سنی 14-1 سال و 49-15 سال نشان داد (003/0: p-value).
    نتیجه گیری
    نتایج نشان داد که میزان حضور ویروس اپشتین بار در نمونه های لنفوم هوجکین کودکان و افراد مسن بالاتر می باشد و الگویی مشابه با کشور های در حال توسعه را نشان می دهد.
    کلید واژگان: ویروس اپشتین بار, لنفوم هوجکین, هیبریدیزاسیون ناحیه ای, EBERs}
    Laila Mozafari, Sohrab Najafipour, Mohammad Hasan Meshkibaf, Ali Moravej
    Background and Objectives
    The Epstein-Barr Virus (EBV(is related with various diseases including infectious mononucleosis، Burkitt''s lymphoma، Hodgkin''s lymphoma، nasopharyngeal carcinoma and post-transplant lymphoprolifrative disorders. The aim of this study was to characterize the association between EBV and Hodgkin''s lymphoma through EBERs in situ hybridization (EBER-ISH) in Iranian patients.
    Materials and Methods
    In this study، 43 Hodgkin''s lymphoma tissue samples were selected from formalin-fixed paraffin embedded blocks and analyzed by EBERs in situ hybridization. Data analyzed by SPSS16 statistical software، Fisher''s exact test and Mantel-Haensel significant level 0. 05.
    Results
    43 Hodgkin''s lymphoma patients were 29 (67%) male samples and 14 (33%) female samples. In 20 (47%) samples Epstein-Barr virus was present. The positive cases included 13 samples male and 7 samples female. Fisher''s exact test showed statistically no significant difference between sex and subtypes. Age distribution of relation of Hodgkin''s lymphoma and EBV virus were 75% (12 of 16) in the age group of 1-14 years، 22% (5 of 23) in the age group 15-49 years and 75% (3 of 4) in the age group over 49 years، respectively. Fisher''s exact test showed statistically significant difference between 1-14 and 15-49 age group years (p-value: 0. 003).
    Conclusion
    Results shown higher presence rate of Epstein-Barr virus in Hodgkin''s lymphoma specimens of children and older adult. This pattern is similar to other developing countries.
    Keywords: Epstein, Barr Virus, Hodgkin's lymphoma, in situ hybridization, EBERs}
  • پیروز صالحیان، محمدفرهادی، امین تهران، ندا میرزمانی
    کارسینوم نازوفارنکس به ویژه در بیماران ساکن مناطق آندمیک خاور دور به طور شایع همراه با ویروس اپشتاین بار می باشد. بررسی آنتی ژن های هسته ای و DNA ویروس در سلول های کارسینوم نازوفارنکس نشان داده است که این ویروس می تواند سلول های اپی تلیال را آلوده کرده و سبب ترانسفورماسیون آن به سوی بدخیمی شود. ویروس پاپیلومای انسانی (HPV) ویروسی انکوژنیک با تمایل به سلول های اپی تلیال است که همراهی آن با تعدادی از تومورهای سر و گردن از جمله کارسینوم نازوفارنکس شناسایی شده است. این مطالعه گذشته نگر جهت بررسی میزان فراوانی ویروس اپشتاین بار و ویروس پاپیلومای انسانی زیرگروه های 11/6 و 18/16 صورت گرفت و طی آن نمونه های بافتی ثابت شده در فرمالین مربوط به 20 بیمار مبتلا به کارسینوم نازوفارنکس با روش هیبریداسیون درجا مورد بررسی قرار گرفت. از نظر زیرگروه هیستولوژیک براساس سیستم طبقه بندی WHO، 16 نمونه(80%) از نوع کارسینوم تمایز نیافته(نوع III WHO) و 4 نمونه(20%) از نوع سنگ فرشی غیرشاخی شونده (نوع II WHO) بودند. از نظر مرحله یا Stage بیماری براساس سیستم طبقه بندی AJCC (American Joint Committee of Cancer) 10% بیماران در مرحله I، 5% در مرحله II، 25% در مرحله III و 60% در مرحله IV قرار می گرفتند. تقریبا 55% بیماران در زمان تظاهر بیماری متاستاز به غدد لنفاوی گردن داشتند. با روش هیبریداسیون درجا و استفاده از پروب DNA کنژوگه با فلورسئین، EBER در 19 مورد(95%) از 20 نمونه مورد مطالعه شناسایی گردید. با روش هیبریداسیون درجا با تقویت سیگنال با تیرامید و استفاده از پروب DNA حاوی بیوتینیل، سکانس HPV DNA زیر گروه 11/6 در 2 نمونه(10%) شناسایی شد و سکانس HPV DNA ساب تایپ 18/16 نیز تنها در 2 نمونه(10%) مشاهده گردید. همراهی EBV و HPV در 3 مورد(15%) وجود داشت. این مطالعه همراهی قوی(95%) کارسینوم نازوفارنکس از نوع تمایز نیافته و سنگ فرشی غیرشاخی شونده را با EBV نشان داد در حالی که همراهی HPV با EBV تنها در 15% موارد نمونه های کارسینوم نازوفارنکس مشاهده گردید. این اختلاف میان نتایج مطالعه حاضر و نتایج حاصل از مطالعات قبلی ممکن است ناشی از اختلاف جغرافیایی و تفاوت در عوامل محیطی درگیر باشد.
    کلید واژگان: کارسینوم نازوفارنکس, ویروس اپشتاین بار, ویروس پاپیلومای انسانی, هیبریداسیون درجا}
    P. Salehian Dardashti, M. Farhadi, E. Amin Tehran, N. Mirzamani*
    Nasopharyngeal carcinoma, particulary tumors endemic to the Far East, commonly harbors Epstein-Barr virus. The detection of nuclear antigen associated with EBV and viral DNA in NPC cells have revealed that EBV can infect epithelial cells and is associated with transformation. Human papilloma virus is an epitheliotrophic oncogenic virus that has been detected in a variety of head and neck tumors. This retrospective study was undertaken to investigate the prevalence of EBV and HPV infection subtypes 6/11 and 16/18. in 20 patients with nasopharyngeal carcinoma by in situ hybridization. 16 case (80%) were classified as undifferentiated carcinoma (WHO type III) and 4 (20%) as non keratinizing SCC (WHO type II). According to AJCC (American Joint Committee of Cancer) system the clinical stage at presentation was available for 20 patients: 10% presented with stage I, 5% presented with stage II, 25% presented with stage III and 60% presented with stage IV. 55% of the cases presented with palpable cervical lymph node metastasis. In situ hybridization for EBER was performed with a fluorescien-conjugated PNA probe. EBER expression was detected in 19 of the 20 evaluated nasopharyngeal carcinoma (95%). Thyramid signal amplification of ISH was performed for HPV DNA subtype 6/11 and 16/18 with a biotinylated DNA probe. Two of 20 NPC (10%) contained HPV 6/11 sequences and two of 20 NPC (10%) contained HPV 16/18 sequences and combined EBV and HPV infection was detected in 3 of the 20 (15%) patients. In this study a high correlation of almost 95% was observed between EBV and NPC type II & III, in WHO classification. Combined EBV and HPV infection was detected only in 15% of patients. There seems to be a geographic difference in positive rates between our results and those obtained from high-risk area.
    Keywords: Nasopharyngeal Carcinoma, Epstein, Barr Virus, Human Papilloma Virus, In Situ Hybridization}
  • دکترسعید تاج بخش، سید مجتبی موسویان، علیرضا سمرباف زاده، دکترمجید صادقی زاده، کریستین آدلر، مایکل هوگارد، پروفسور یورگن هیسمن
    روش هیبریدیزاسیون در موضع توسط پروبهای نشان دار شده با مواد فلوئورسنت (FISH)، تکنیک نوینی است که علاوه برتشخیص اختصاصی میکروب ها در سطح مولکولی، مورفولوژی آنها را نیز به وضوح قابل رویت می سازد. در این مطالعه، به منظور ارزیابی روش FISH برای تشخیص استافیلوکوک ها، 76 نمونه خلط و 41 نمونه کشت خون مورد آزمایش قرار گرفت. در تکنیک مذکور، از سه پروب الیگونوکلئوتیدی که به 16S rRNA متصل می شوند استفاده شد. درمقایسه با روش کشت، حساسیت FISHبرای تشخیص استافیلوکوکوس اورئوس در نمونه های خلط7/86 %، و ویژگی آن 100% بود. در مورد نمونه های کشت خون، حساسیت و ویژگی FISH برای تشخیص استافیلوکوکوس اورئوس برابر با100%، و برای تشخیص استافیلوکوک های غیراورئوس حساسیت این روش 7/95% و ویژگی آن100%بود. کل مراحل FISH حداکثر به 3 ساعت زمان نیاز داشت. بنابراین FISH روشی سریع، حساس و اختصاصی برای تشخیص استافیلوکوک ها می باشد.
    کلید واژگان: استافیلوکوکوس, هیبریدیزاسیون در موضع, فلوئورسنت, پروب, 16S rRNA, FISH}
    Mr Saeed Tajbakhsh, Mr Seyed Mojtaba Moosavian, Mr Alireza Samarbafzadeh, Mr Majid Sadeghi Zadeh, Mr Kristian Adler, Mr Micheal Hogardt, Mr Yourgen Heesemann
    Fluorescent in situ hybridization (FISH) is a new diagnostic technique for specific detection of microorganisms at molecular level and direct visualization of microbial morphology. In this study, FISH technique was evaluated for detection of staphylococci. A set of 16S rRNA-targeted oligonucleotide probes were used for FISH. For detection of Staphylococcus aureus in sputum samples by FISH and comparison with conventional bacterial culture, 76 sputum samples were investigated. According to our data, sensitivity and specificity of FISH for detection of this bacterium were 86.7% and 100%, respectively. As another part of this study, 41 blood culture specimens were examined for detection of staphylococci. In compare with conventional culture methods, sensitivity and specificity of FISH for detection of S. aureus were 100% and for non S. aureus species of staphylococci, sensitivity and specificity of FISH were 95.7% and 100% respectively. All steps of FISH technique were performed within 3h. Therefore, FISH is a rapid, sensitive, and specific technique for detection of staphylococci.
    Keywords: Staphylococcus, In Situ Hybridization, Fluorescent, Probe, 16S rRNA, FISH}
نکته
  • نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
  • کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
  • در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
درخواست پشتیبانی - گزارش اشکال