جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه "bovine mastitis" در نشریات گروه "دامپزشکی"
-
ورم پستان اقتصادی ترین بیماری تهدید کننده صنعت پرورش گاو شیری در جهان می باشد. اشریشیاکولای از جمله عوامل ایجادکننده ورم پستان می باشد که برای درمان آن از آنتی بیوتیک ها به ویژه آنتی بیوتیک های بتالاکتام استفاده می شود. ظهور و گسترش مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک ها در جوامع دامی و همچنین احتمال انتقال این مقاومت به جوامع انسانی به عنوان تهدیدی جدی برای سلامت عمومی در جوامع مختلف می باشد. مطالعه توصیفی- مقطعی حاضر با هدف تعیین فراوانی مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک های بتالاکتام در اشریشیاکولای های جداشده از موارد ورم پستان گاوی در تبریز و همچنین تعیین حضور ژن مولد بتالاکتامازی blaTEM در جدایه ها انجام شد. بدین منظور، تعداد 240 نمونه شیر از گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی از مناطق مختلف شهرستان تبریز جمع آوری شد. ابتدا جدایه های به دست آمده از نمونه ها بر اساس روش های استاندارد میکروبیولوژی، تعیین هویت شد و حساسیت آنتی بیوتیکی آن ها به روش انتشار از دیسک بررسی گردیده و سپس آزمون تائیدی مولدین آنزیم بتالاکتاماز به روش دیسک ترکیبی انجام شد. در نهایت حضور ژن blaTEM در جدایه های مولد بتالاکتاماز با استفاده از واکنش زنجیره ای پلی مراز بررسی گردید. براساس یافته ها، از 50 مورد از نمونه های شیر ورم پستانی مورد بررسی، (83/20 درصد نمونه ها) اشریشیاکولای جداسازی شد. همچنین در روش فنوتیپی، 22 جدایه اشریشیاکولای (44 درصد جدایه های باکتری مذکور) مولد بتالاکتاماز تشخیص داده شدند. نتایج مولکولی هم نشان داد که فقط 7 جدایه از جدایه های مولد بتالاکتاماز در روش فنوتیپی، واجد ژنblaTEM بودند. با توجه به فراوانی بالای اشریشیاکولای های مولد بتالاکتاماز در مطالعه حاضر و احتمال گسترش مقاومت آنتی بیوتیکی در جمعیت دامی و همچنین احتمال انتقال ژن های مقاومت به جوامع انسانی، شناسایی و درمان صحیح دام های مبتلا به ورم پستان ضروری به نظر می رسد.
کلید واژگان: ورم پستان گاو, اشریشیاکولای, مقاومت آنتی بیوتیکی, بتالاکتاماز وسیع الطیف, Blatem.Mastitis is the most important economic disease threatening the dairy industry in the world. Escherichia coli are one of the major causes of mastitis, which is treated with antibiotics, especially β-lactams. The emergence and spread of resistance to antibiotics in livestock, as well as the possibility of transferring this resistance to humans, is a serious threat to public health in different communities. The present descriptive-cross-sectional study was conducted to determine the frequency of resistance to beta-lactams in Escherichia coli isolates from cases of bovine mastitis in Tabriz and also evaluate the presence of blaTEM gene in the isolates. For this purpose, 240 milk samples from cows with clinical mastitis were collected from different regions of Tabriz, Iran. First, the isolates obtained from the samples were identified based on standard microbiology methods, and their antibiotic sensitivity was evaluated by the disc diffusion method. Then, the confirmatory test of beta-lactamase enzyme producers was performed by the combined disc method. Finally, the presence of blaTEM gene in beta-lactamase-producing isolates was investigated using polymerase chain reaction (PCR). Based on the findings, E. coli was isolated from 50 milk samples of mastitis (20.83% of the samples). Also, in the phenotypic method, 22 isolates (44% of the isolates) were detected as beta-lactamase-producing. The molecular results also showed that only 7 of beta-lactamase-producing isolates in the phenotypic method had the blaTEM gene. Considering the high frequency of beta-lactamase-producing E. coli in the present study and the possibility of the spread of antibiotic resistance in the livestock population, as well as the possibility of transmission of resistance genes to humans, accurate identification and treatment of animals suffering from mastitis seems necessary.
Keywords: Antibiotic Resistance, Blatem, Bovine Mastitis, Escherichia Coli, Extended-Spectrum Β-Lactamases -
نشریه تحقیقات دامپزشکی و فرآورده های بیولوژیک، سال سی و هفتم شماره 2 (پیاپی 143، تابستان 1403)، صص 15 -20
سودوموناس آئروژینوزا از مهمترین پاتوژن های فرصت طلب بوده که موجب بروز ورم پستان های تحت بالینی مقاوم به درمان در گاوهای شیری می شود. هدف از این مطالعه، بررسی فراوانی ژن های gyrB و oprL در باکتری های سودوموناس آئروژینوزا جدا شده از موارد ورم پستان گاو در شهر مراغه در سال 1401 بود. در این مطالعه مقطعی توصیفی، 60 نمونه سودوموناس آئروژینوزا جدا شده از موارد ورم پستان گاو که با آزمایشات بیوشیمیایی و رنگ آمیزی تعیین هویت شده بودند، جهت حضور ژن های مورد مطالعه به روش PCR بررسی شدند. بر اساس نتایج بدست آمده، فراوانی ژن gyrB در 10 جدایه (7/16%) و ژن oprL در سه جدایه (5%) مشاهده شد. همچنین سه جدایه (5%) هر دو ژن gyrB و oprL را به طور هم زمان داشتند. با توجه به نتایج این مطالعه، کنترل منابع عفونت در ورم پستان ناشی از سودوموناس آئروژینوزا جهت کنترل و پیشگیری از انتقال این باکتری تاکید می شود.
کلید واژگان: سودوموناس آئروژینوزا, ورم پستان گاوی, Gyrb, OprlPseudomonas aeruginosa is an important opportunistic pathogen that causes subclinical mastitis resistanted to treatment in lactating dairy cows. The aim of this research was to study the frequency of gyrB and oprL genes in Pseudomonas aeruginosa isolated from bovine mastitis in Maragheh city in 2022. In this descriptive cross-sectional study, 60 samples of Pseudomonas aeruginosa isolated from bovine mastitis which were identified by biochemical and staining tests. The samples were analyzed for the presence of the genes by PCR. Based on the results, the frequency of gyrB and oprL genes were observed in 10 (16.7%) and 3 (5%) isolates, respectively. Also, 3 isolates (5%) harbored both gyrB and oprL genes simultaneously. According to the results of this study, control of infection sources in mastitis caused by Pseudomonas aeruginosa is emphasized in order to control and prevent transmission of this bacterium.
Keywords: Pseudomonas Aeruginosa, Bovine Mastitis, Gyrb, Oprl -
زمینه مطالعه
ورم پستان اقتصادی ترین بیماری تهدید کننده صنعت پرورش گاو شیری در جهان می باشد. اشرشیاکلی از جمله عوامل ایجاد کننده ورم پستان است که برای درمان آن از آنتی بیوتیک ها، به ویژه آنتی بیوتیک های بتالاکتام استفاده می شود. ظهور و گسترش مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک ها در جوامع دامی و احتمال انتقال این مقاومت به جوامع انسانی به عنوان تهدیدی جدی برای سلامت عمومی در جوامع مختلف می باشد.
هدفمطالعه حاضر باهدف تعیین فراوانی مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک های بتالاکتام و حضور ژن های مولد بتالاکتامازی blaTEM و blaSHV در جدایه های اشرشیاکلی جمع آوری شده از موارد ورم پستان بالینی گاو در شهر تبریز انجام شد.
روش کار:
در مطالعه توصیفی مقطعی حاضر، 240 نمونه شیر از گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی در شهرستان تبریز جمع آوری شدند. پیش از نمونه برداری هیچ کدام از گاوهای مذکور، درمان آنتی بیوتیک نداشتند. نمونه ها بر اساس روش های استاندارد میکروبیولوژی تعیین هویت شدند. حساسیت آنتی بیوتیکی جدایه ها به روش انتشار از دیسک بررسی شد. تست تاییدی مولدین بتالاکتاماز به روش دیسک ترکیبی انجام شد. در نهایت حضور ژن های blaTEM و blaSHV در جدایه های مولد بتالاکتاماز با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز بررسی گردید.
نتایجاز 50 مورد از نمونه های مورد بررسی (83/20 درصد) اشرشیاکلی جداسازی شد که از این تعداد، 22 نمونه (44 درصد) مولد بتالاکتاماز بودند. نتایج بررسی مولکولی نشان داد 7 نمونه (81/31 درصد) حامل ژن blaTEM و 4 نمونه (18/18 درصد) حامل ژن blaSHV بودند.
نتیجه گیری نهایی:
با توجه به فراوانی اشرشیاکلی مولد بتالاکتاماز در مطالعه حاضر، احتمال گسترش مقاومت آنتی بیوتیکی در میان جمعیت دامی به دلیل مصرف غیراصولی آنتی بیوتیک ها و همچنین احتمال انتقال ژن های مقاومت به جوامع انسانی، شناسایی و درمان صحیح دام های مبتلا و رعایت دوره منع مصرف محصولات دام های تحت درمان با آنتی بیوتیک توصیه می شود.
کلید واژگان: اشرشیاکلی, بتالاکتاماز وسیع الطیف, ورم پستان گاو, Blatem, BlashvBACKGROUNDMastitis is known as the most economic important disease in the dairy industry in the world. Escherichia coli (E. coli) is one of the major causes of mastitis, which is treated with antibiotics, especially β-lactams. The emergence and spread of resistance to these antibiotics in livestock and the potential transfer of this resistance to human communities is a serious threat to public health in different countries.
OBJECTIVESThis study aimed to determine the resistance to β-lactams in E. coli isolates from the milk samples of bovine clinical mastitis in Tabriz City, Iran. Also, the presence of the extended-spectrum β-Lactamase (ESBL)-encoding genes (blaTEM-1 and blaSHV-1) was investigated in the isolates.
METHODSIn this descriptive cross-sectional study, 240 milk samples were collected from cattle with clinical mastitis in Tabriz. None of the cattle were under antibiotic therapy before sampling. The samples were evaluated according to the standard microbiological methods. The antibiotic susceptibility of E. coli isolates was investigated using the disk diffusion method. Also, the isolates were evaluated for the production of ESBL using the combined disk test. Finally, the presence of blaTEM and blaSHV in β-lactamase producing strains was confirmed using the PCR method.
RESULTSOut of 240 samples, E. coli was isolated from 50 samples (20.83%), of which 22 isolates (44%) were detected as β-lactamase producers. The results of the PCR test showed that seven isolates (31.81 %) carried the blaTEM and four (18.18 %) the blaSHV.
CONCLUSIONSConsidering the abundance of β-lactamase-producing E. coli in this study, there is a possibility of the spread of antibiotic resistance among the livestock population due to improper use of antibiotics and transferring resistance genes to human communities. Therefore, accurate identification, proper treatment of infected animals, and compliance with the withdrawal period of animal products treated with antibiotics are recommended.
Keywords: Bovine Mastitis, Escherichia Coli, Extended-Spectrum Β-Lactamases, Blatem, Blashv -
Mastitis associated Klebsiella pneumoniae species were isolated from bovine milk to characterize virulence genes (wabG and kfuBC) and extended spectrum β-lactamase (ESBL) genes (blaCTX-M-1, blaCTX-M-2, blaCTX-M-9, blaTEM, blaSHV and blaOXA). A total number of 325 bovine milk samples (195 raw and 130 mastitic milk specimens) collected from Banaskantha, a milk-shed district of Gujarat, India, were included in the study. A total number of 27 K. pneumoniae isolates were recovered, consisting of 17 (62.96%) isolates from raw milk and 10 (37.03%) isolates from mastitic milk samples, giving an overall prevalence of 8.31%. Antibiotic sensitivity patterns revealed that 20 out of 27 isolates were found to be multi-drug resistant. Based on combination disc diffusion test and HiCrome ESBL agar method, 20 (74.07%) and 25 (92.59%) isolates were detected as ESBL producers, respectively. Among virulence genes studied, presence of wabG (25/27; 92.59%) was higher than kfuBC (5/27; 18.51%). Beta-lactamase genes viz., blaSHV, blaTEM and blaCTX-M-1 were detected in 23/27 (85.18%), 3/27 (11.11%) and 2/27 (7.40%) of isolates, respectively; while, none of the isolates was found to be positive for blaCTX-M-9 and blaOXA-1 genes. Outcome of the study provided an insight into virulence genes and ESBL producing K. pneumoniae isolated from bovine milk samples in India.Keywords: Bovine mastitis, Drug resistance, India, Klebsiella pneumoniae, Virulence Factors
-
باکتری پسودوموناس آیروژینوزا از مهمترین پاتوژن های فرصت طلب بوده که موجب بروز ورم پستان های تحت بالینی مقاوم به درمان در گاوهای شیری می باشد. بررسی الگوی ژنتیکی ایزوله ها، در مدیریت عفونت های ناشی از این باکتری ضروری است. هدف از این مطالعه، بررسی تنوع ژنتیکی جدایه های سودوموناس آیروژینوزا بدست آمده از موارد ورم پستان گاو در شهر تبریز بود. در این مطالعه توصیفی مقطعی، از 200 راس گاو مبتلا به ورم پستان در گاوداری های شهر تبریز نمونه گیری انجام شد. پس از انجام آزمایشات بیوشیمیایی اختصاصی و رنگ آمیزی، موارد مثبت جهت آزمایشات مولکولی مورد استفاده قرار گرفتند. از مجموع 200 مورد گاو مبتلا به ورم پستان، 90 ایزوله (%45) پسودوموناس آیروژینوزا شناسایی شد. نتایج حاصل از RAPD-PCR نشان داد که 80 ایزوله (9/%88) از نمونه های تحت مطالعه، با هر دو پرایمر مورد استفاده، قابل تایپ بودند و 10 ایزوله (%10) با پرایمرهای مورد استفاده تایپ نشدند. ایزوله های تایپ شده در 14گروه مجزا قرار داشتند و هر کدام حاوی چندین نمونه پسودوموناس آیروژینوزا بودند. گروه های I و VII بیشترین ایزوله را داشتند و گروه های IX، X و XII دارای کمترین ایزوله بودند. نتایج نشان داد که RAPD-PCR، روش ابزار ژنوتیپ بندی با قدرت افتراق بالا در مطالعات اپیدمیولوژی و پلی مورفیسم سویه های پسودوموناس آیروژینوزا می باشد. با توجه به داده های این مطالعه، کنترل منابع عفونت در ورم پستان ناشی از این باکتری، جهت کنترل و پیشگیری از انتقال این باکتری تاکید می شود.
کلید واژگان: پسودوموناس آئروژینوزا, ورم پستان گاو, RAPD-PCRPseudomonas aeruginosa is an important opportunistic pathogen that causes subclinical mastitis resistant to treatment in lactating dairy cows. Examination of the genetic pattern of isolates is necessary for the management of infections caused by this bacterium. The aim of this study was to investigate the genetic diversity of Pseudomonas aeruginosa isolates obtained from bovine mastitis in Tabriz city. In this cross-sectional descriptive study, sampling was done from 200 cows suffering from mastitis in cattle farms in Tabriz city. After performing specific biochemical tests and staining, positive cases were used for molecular tests. From a total of 200 cases of cows suffering from mastitis, 90 isolates (45%) of Pseudomonas aeruginosa were identified. The results of RAPD-PCR showed that 80 isolates (88.9%) of the studied samples could be typed with the primer used, and 10 isolates (10%) were not typed. The typed isolates were in 14 distinct groups and each one contained several samples of Pseudomonas aeruginosa. Groups I and VII harboured the most isolates and groups IX, X and XII contained the least isolates. Based on the results, RAPD-PCR technique was found as a useful tool to investigate the genetic variation for P. aeruginosa strains. This technique is a rapid and low cost genotypic method with high discriminatory power. According to the results of this study, it is emphasized to control the sources of infection in mastitis caused by P. aeruginosa, in order to control and prevent the transmission of this bacterium.
Keywords: Pseudomonas aeruginosa, Bovine mastitis, RAPD-PCR -
Mastitis is a global disease occurring in dairy cows, causing notable economic losses. Extensive use of antibiotics could allow the emergence of mobile antimicrobial resistance genes in mastitis-causing pathogens. This study aimed to investigate the prevalence and characterization of colistin resistance genes in E. coli recovered from bovine mastitic milk. A total of 74 E. coli isolates were investigated for antimicrobial resistance. The presence of mcr-1, mcr-2, mcr-3, mcr-4, and mcr-5 plasmid-mediated resistance genes, as the most crucial contributors to resistance to colistin, was examined by Multiplex PCR. Antimicrobial susceptibility patterns of all isolates to the seven most common antibiotics applied in dairy herds, including colistin, ceftriaxone, ampicillin, tetracycline, gentamicin, enrofloxacin, and trimethoprim-sulfamethoxazole were determined by the DD test. Among all samples, 70 isolates (94.6%) were resistant to colistin. In the MIC test, all isolates were also resistant to colistin, which was in agreement with the DD test. None of the E. coli isolates carried plasmid-mediated colistin resistance mcr-1 to 5 genes in Multiplex PCR. Despite the important role of food-producing animals in the transfer of antibiotic resistance, mastitis-causing E. coli isolates were not the source of mcr 1 to 5 genes in this study. The present research showed a high level of phenotypic resistance to colistin, while there was no agreement with their genotypic resistance. Consumption of polymyxins in dairy calves and the probable existence of other more effective resistance genes could be the reason for this high rate of phenotypic resistance.Keywords: Bovine mastitis, Colistin resistance, Escherichia coli, mcr gene, MDR
-
پیشینه:
ورم پستان یکی از گران ترین بیماری ها در صنایع لبنی است. این بیماری با کاهش تولید شیر و همچنین هزینه های مربوط به درمان سبب زیان های مالی سنگینی می شود. استرپتوکوکوس آگالاکتیه عامل ورم پستان گاوی مسری و دارای فاکتورهای حدت مختلف است که در بیماری زایی آن نقش دارند.
هدفهدف اصلی این مطالعه ارزیابی فراوانی ژن های حدت استرپتوکوکوس آگالاکتیه بود.
روش کاردر مطالعه حاضر، 98 گونه استرپتوکوکوس از 320 نمونه شیر جمع آوری شده از مجتمع بالینی دامپزشکی، جوناگاد جدا شد. از بین این ایزوله ها، 42 جدایه استرپتوکوکوس آگالاکتیه برای بررسی ژن های حدت مورد استفاده قرار گرفتند.
نتایجهمه گونه های استرپتوکوکوس در سطح جنس با هدف قرار دادن ژن tuf و در سطح گونه استرپتوکوکوس آگالاکتیه ها با هدف قرار دادن ژن 16S rRNA شناسایی شدند. برای بررسی ژن های حدت، ژن های scpB، cfb، و cylE مورد هدف قرار گرفتند. از 42 جدایه استرپتوکوکوس آگالاکتیه، به ترتیب در 15، 16، و 10 جدایه دارای ژن های scpB، cfb، و cylE بودند.
نتیجه گیری:
این مطالعه به ما کمک می کند تا ویژگی های حدت و مکانیسم مسوول ایجاد سویه های جدید در اپیدمیولوژی ورم پستان را در پاسخ به استراتژی های پیشگیری و کنترل بشناسیم.
کلید واژگان: ورم پستان گاو, شناسایی مولکولی, استرپتوکوکوس آگالاکتیه, ژن های حدتBackgroundMastitis is one of the most expensive diseases in the dairy industry. It causes heavy monetary losses by decreasing milk production and treatment cost. Streptococcus agalactiae, the cause of contagious bovine mastitis, possesses various virulence factors that contribute to pathogenicity.
AimsThe main aim of the study was to evaluate the distribution of virulence genes of S. agalactiae.
MethodsIn the current work, 98 Streptococcus species were isolated from 320 milk samples, collected from Veterinary Clinical Complex, Junagadh. Out of the isolates, 42 S. agalactiae isolates were used for virulence genes detection.
ResultsAll Streptococcus spp. were confirmed at genus level by targeting tuf gene, and S. agalactiae was identified at species level by targeting 16S rRNA gene. For virulence gene detection, scpB, cfb, and cylE genes were targeted. Of 42 S. agalactiae isolates, 15, 16, and 10 isolates possessed scpB, cfb, and cylE genes, respectively.
ConclusionThis study aids us to know virulence characteristics and mechanisms responsible for the development of new strains in mastitis epidemiology in response to prevention and control strategies.
Keywords: Bovine mastitis, Molecular detection, S. agalactiae, Virulence genes -
زمینه مطالعه
استافیلوکوکوس اوریوس شایع ترین پاتوژن واگیردار در ورم پستان گاو است. این پاتوژن تمایل به تشکیل بیوفیلم دارد، که متعاقب آن مقاومت آنتی بیوتیکی ایجاد می گردد. هدف از این مطالعه توصیف توانایی تشکیل بیوفیلم، عوامل حدت و الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی استافیلوکوکوس اوریوس جدا شده از ورم پستان تحت بالینی است.
روش کارگاوهای شیری از نظر ابتلا به ورم پستان تحت بالینی غربالگری شدند. ایزوله ها با روش فنوتیپی و حضور ژن nuc شناسایی شدند. امکان تشکیل و کیفیت بیوفیلم با استفاده از روش رنگ سنجی مشخص شد. ژن های وابسته به بیوفیلم در استافیلوکوکوس اوریوس با استفاده از روش PCR شناسایی شد. حساسیت ضد میکروبی ایزوله ها در حالت پلانکتونی با استفاده از روش DAD انجام شد. حداقل غلظت ممانعت کننده از رشد توسط MIC50 تعیین گردید. حساسیت آنتی بیوتیکی و MBEC برای ایزوله ها در بیوفیلم با استفاده از روش XTT تعیین شد.
نتایجنتایج بالاترین میزان مقاومت آنتی بیوتیکی را در برابر پنی سیلین و کمترین میزان مقاومت را در برابر سفتیوفور و سیپروفلوکساسین نشان داد. MIC50 سفتیوفور 2 μg/ml تعیین شد. 100٪ ایزوله ها توانایی تولید بیوفیلم را داشتند و اکثر آنها بیوفیلم قوی تشکیل دادند. فراوانی ژن های عوامل حدت icaA,D، fnbA,B و bap کدکننده بیوفیلم هستند، شناسایی شد. بیشترین و کمترین فراوانی را ژن های icaD، و fnbB به ترتیب داشتند. نتایج MBEC برای برای ایزوله ها محاصره شده در بیوفیلم مقاومت به سفتیوفور را نشان داد، در حالی که، این ایزوله ها در حالت پلانکتونی به سفتیوفور حساس بودند.
نتیجه گیری نهاییتشکیل بیوفیلم فاکتور حدت قابل توجهی است که با نرخ تشکیل بالا و ایجاد مقاومت در برابر آنتی بیوتیک، مسبب ورم پستان تحت بالینی گاو می باشد که به درمان های معمول پاسخ نمی دهد. بر اساس این نتایج، می بایست باید به دنبال استراتژی های درمانی مناسب تری جهت جلوگیری از تشکیل یا پراکندگی بیوفیلم ها باشیم.
کلید واژگان: تشکیل بیوفیلم, مقاومت آنتی بیوتیکی, ورم پستان گاوی, ورم پستان تحت بالینی, استافیلوکوکوس اورئوسBACKGROUNDMastitis is an important disease that affects dairy herds worldwide. The Staphylococcus aureus (S. aureus) is the causative pathogen for mastitis. This pathogen has the tendency to biofilm forming, and may happen to antibiotic resistance.
OBJECTIVESThe aim of this study was to characterize the biofilm formation of different genotypes and antibiotic resistance pattern of S. aureus isolated from the subclinical bovine mastitis in Tehran province.
METHODSThe lactating dairy cows were screened for the subclinical mastitis. The isolates were identified by phenotypic method and the presence of the nuc gene. The biofilm forming and quantification was characterized using colorimetric assay. The S. aureus biofilm gene was evaluated using PCR assay. The antimicrobial susceptibility of the isolates was assessed using DAD method. The lowest antimicrobial concentration preventing the visible growth was construed by MIC50. The antibiotic susceptibility and MBECs for the bacteria embedded in the biofilms were determined by XTT method.
RESULTSThe antimicrobials susceptibility test showed penicillin and ceftiofur to be less and more effective in vitro, respec-tively. The genotypic characterization showed that the highest and the lowest frequencies for icaD (75%) and fnbB (31.2%) genes, respectively. The biofilm formation was also characterized. The MBEC results for the bacterial biofilm showed resistance to ceftiofur in the biofilm state; however, these strains were susceptible to this agent in the planktonic state.
CONCLUSIONSThe biofilm formation is a significant virulence factor that was detected at a high rate. It is antibiotic-resistant and responsible for the subclinical bovine mastitis that does not respond to the routine treatments.In order to control the infection achieve the effective treatment, and prevent the emergence of antibiotic-resistant bacteria, it is necessary to isolate the causative agent and determine the antimicrobial susceptibility
Keywords: Antibiotic resistance, Biofilm Forming, bovine mastitis, Staphylococcus aureus, Subclinical Mastitis -
MRSA که باعث ایجاد عفونت در هر دو گروه انسانی و حیوانی می شود، تهدیدی جدی برای بهداشت عمومی در سراسر جهان است. اتصال و کلونیزاسیون اولین مرحله برای پاتوژنز استافیلوکوکوس اوریوس می باشند و عفونت های بیوفیلم تاثیر منفی قابل توجهی بر سلامت انسان و دام دارند. استافیلوکوکوس اوریوس مقاوم به متی سیلین می تواند با محیط های مختلف سازگار گشته، باعث بوجود آمدن سویه های مختلف استافیلوکوکوس اوریوس مقاوم به متی سیلین در انسان و حیوان شده و بینشان انتقال یابد. این مطالعه با هدف بررسی تولید بیوفیلم در شرایط in vitro و وجود ژن های icaABCD در جدایه های S. aureus مقاوم به متی سیلین (MRSA) در انسان و بررسی انتقال بیماری بین سویه های انسانی و حیوانی انجام می شود. در مجموع، 39 جدایه انسانی و 35 جدایه دامی با استفاده از روش کنگورد آگار مورد ارزیابی قرار گرفتند. حضور ژن های mecA و icaABCDR توسط PCR بررسی شده و در نهایت، محصولات PCR توسط الکتروفورز با ژل آگارز مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج حاصله نشانگر این است که فراوانی ژن mecA در جدایه های انسان و حیوان به ترتیب 64.1 و 36.1 درصد بوده و در جدایه های انسانی بین mecA و icaAD رابطه معنی داری وجود داشت. علاوه بر این، ارتباط معناداری بین icaA و ریفامپیسین و همچنین بین icaC و کلرامفنیکل و پنی سیلین در جدایه های انسانی یافت شد. در جدایه های دامی نیز، رابطه معنی داری بین mecA و تریمتوپریم و همچنین بین icaR و ریفامپیسین وجود داشت. نتیجه گیری شد که همه ژن های اپرون ica در تولید بیوفیلم نقش دارند، ولی ژن های icaA و icaD در استافیلوکوکوس اوریوس مقاوم به متی سیلین با mecA همراهی بیشتری داشتند. همچنین سویه های حیوانی و انسانی می توانند در انتقال بیماری نقش داشته باشند، اما این نتیجه گیری باید با احتیاط بیشتری بیان شود.
Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) can cause infections in both human and animal groups, which is a serious threat to public health worldwide. Attachment and colonization are the first steps for S. aureus pathogenesis, and biofilm-mediated infections have a significant negative impact on human and animal health. The MRSA can adapt to different environments and give rise to different strains of human and animal MRSA, causing transmissions of the disease between humans and animals. This study aimed to investigate biofilm production in vitro, and the presence of icaABCD genes in MRSA isolates in both human as well as the disease transmission between human and animal strains. In total, 39 human and 35 livestock isolates were evaluated by the Congo Red Agar method. The presence of mecA and icaABCDR genes were assessed by polymerase chain reaction (PCR), and finally, the PCR products were examined by agarose gel electrophoresis. The results showed that the mecA gene frequency in human and animal isolates was 64.1% and 36.1%, respectively, and there was a significant relationship between mecA and icaAD in human isolates. In addition, significant relationships were found between icaA and Rifampicin and also between icaC and Chloramphenicol and Penicillin in human isolates. In animal isolates, there was a significant relationship between mecA and Trimethoprim as well as between icaR and Rifampicin. It was concluded that all operon ica genes were involved in biofilm production, but icaA and icaD genes in MRSA were more closely associated with mecA. Both animal and human strains can be involved in disease transmission, but this conclusion should be made cautiously.
Keywords: Bovine mastitis, Clinical, icaABCD, MRSA, Staphylococcus aureus -
Staphylococcus aureus is a major pathogen in the transmission of diseases from animals to humans and vice-versa.Various infections, such as mastitis in cattle, sheep and goats, as well as gastroenteritis due to food poisoning in humans are the most frequent problems caused by S. aureus. The bacteria also lead to severe economic losses in dairy industry. A major virulence factor for the organism is encoded by the coagulase (coa) gene. This study aimed to assess the polymorphisms of the coa gene in S. aureus strains isolated from bovine mastitis and dairy product samples in Ahvaz, Iran. The results showed that out of 91 S. aureus, 80 (87.91%) isolates were positive for coa gene(s). In total, nine different polymerase chain reaction (PCR) products were obtained for coa-positive isolates. A single band was detected in coa PCR with a size ranges from 370 to 830 bp in most isolates (n=77, 96.25%). For three isolates (3.75%), two amplification products were obtained. A PCR product of an estimated size of 590 bp was most frequent, as obtained for 48 (60.00%) isolates. Whereas, 370 and 830 bp PCR products were the least presented, for two (2.50%) and one (1.25%) isolate, respectively. Subsequently, for restriction fragment length polymorphism (RFLP), typing of coa gene and AluI restriction enzyme were used for the digestion of the products. AluI for most of PCR products generated a unique pattern; however, four PCR products (the sizes ranged 750, 670, 590, and 510 bp) generated three or more patterns. Based on AluI RFLP of coa gene, the isolates were classified into 23 groups. Two groups of isolates were dominant, making 45% of the total. According to the findings, one or two types of coa RFLP were dominant among samples that were infected with more S. aureus isolates belonging to different coa RFLP types.Keywords: Staphylococcus aureus, Coagulase gene, Polymerase Chain Reaction, Restriction fragment length polymorphism, Bovine mastitis, Dairy products, Iran
-
پیشینهاستافیلوکوک ها به دلیل توانایی در نفوذ به درون سلول های اپی تلیال و تشکیل بایوفیلم به عنوان یکی از مهمترین عوامل سبب ساز ورم پستان گاو در جهان شناخته شده اند.هدفهدف از انجام این مطالعه تولید یک مدل سلول های اپی تلیال اولیه پستانی منشا گرفته از بافت های ترشحی پستان جهت ارزیابی توانایی تهاجم 42 استافیلوکوک جدا شده از موارد ورم پستان تحت بالینی گاو بود.روش کاردو روش اکسپلنت و هضم آنزیمی برای ایجاد یک مدل از سلول های اپی تلیال اولیه پستان استفاده شد. تشکیل بایوفیلم با استفاده از روش اسپکتروفوتومتری کمی مشخص شد. در مقایسه با روش هضم آنزیمی، سلول های اپی تلیال به دست آمده از روش اکسپلنت سریع تر رشد کرده و به سرعت متراکم و انبوه شدند.نتایجنتایج نشان داد که 60% (12n=) از استافیلوکوکوس اورئوس های جدا شده قادر به حمله به سلول های اپی تلیال بوده و همچنین 7/72% از استافیلوکوک های کواگولاز منفی (CNS) نیز مهاجم هستند (16n=). استافیلوکوکوس زایلوسوس های جدا شده در مقایسه با استافیلوکوکوس اورئوس ها از قدرت تهاجم بالاتری برخوردار بودند و علاوه بر این استافیلوکوک هایی که بایوفیلم تولید نمی کردند نیز قادر به حمله به سلول های اپی تلیال اولیه بودند، اما هیچگونه تفاوت معنی داری بین توانایی اینترنالیزاسیون جدایه های بایوفیلم مثبت و بایوفیلم منفی مشاهده نشد.نتیجه گیرینتایج نشان می دهد که روش اکسپلنت یک روش ارزشمند برای تولید سلول های اپی تلیال اولیه بدون آسیب به سلول ها است و بینش جدیدی را در مورد توانایی استافیلوکوک ها برای نفوذ در سلول های اپی تلیال اولیه پستان ارائه می کند.کلید واژگان: بایوفیلم, ورم پستان گاو, سلول های اپی تلیال, قدرت تهاجم, استافیلوکوکBackgroundStaphylococci are recognized worldwide as one of the most important etiological agents of bovine mastitis due to their virulence factors such as their ability to penetrate inside mammary epithelial cells and their ability to form biofilm.AimsThe objectives of this study were to establish a model of primary mammary epithelial cells originating from the secretory tissue of the bovine udder in order to evaluate the invasion ability of 42 staphylococci isolated from subclinical bovine mastitis cases.MethodsTwo techniques were used to establish a model of primary mammary epithelial cells, the explant technique and the enzymatic method. Biofilm formation was detected using a quantitative spectrophotometric assay. When compared with the enzymatic digestion method, the epithelial cells obtained by the explant technique grew faster and reached quickly to confluence.ResultsThe results showed that 60% of Staphylococcus aureus isolates (n=12) were able to invade the epithelial cells and 72.7% of coagulase negative staphylococci (CNS) isolates were invasive (n=16). Staphylococcus xylosus isolates showed higher invasion values compared to S. aureus isolates and non-biofilm forming staphylococci were able to invade primary epithelial cells, but no significant difference was found between the internalization capabilities of biofilm positive and negative isolates.ConclusionThe results show that the explant technique is a valuable method for developing primary epithelial cells without damaging the cells, and provides new insights regarding the ability of staphylococci to penetrate inside primary mammary epithelial cells.Keywords: Biofilm, Bovine mastitis, Epithelial cells, Invasiveness, Staphylococci
-
استافیلوکوکوس اوریوس یکی از مهم ترین عوامل ایجادکننده ورم پستان عفونی در دام های اهلی است. به دلیل وجود سویه های متعدد استافیلوکوکوس اوریوس و تفاوت های سویه ای در بازآرایی آلل های کروموزمی، روش های ژنوتایپینگ متفاوتی همچون آنالیز DNA کروموزمی توسط هضم آنزیمی به منظور تایپینگ ژنتیکی باکتری معرفی شده اند. در بررسی حاضر، برای اولین بار تنوع ژنتیکی سویه های استافیلوکوکوس اوریوس جدا شده از موارد ورم پستان بالینی گاوی در شهرستان سنندج بر اساس آنالیز PCR-RFLP ژن aroA ارزیابی گردید. در این تحقیق تعداد 120 نمونه شیر ورم پستان گاوی به روش استریل جمع آوری و بررسی گردید. استافیلوکوکوس اوریوس جدا شده به روش کشت و آزمایشات روتین باکتریولوژیکی، با روش PCR مبتنی بر ژن aroAآنالیز شد. قطعه حاصل از تکثیر با اندازه 1153 جفت باز توسط آنزیم تعیین حدودی TaqI هضم و قطعات ایجاد شده الکتروفورز شدند. 28 سویه استافیلوکوکوس اوریوس در روش فنوتیپی جداسازی و قطعه مورد نظر در تمام جدایه ها مشاهده شد. در هضم آنزیمی، دو نوع الگوی هضم قابل نام گذاری براساس مطالعات قبلی ایجاد شد. ژنوتیپ B در 23 مورد (82 درصد) و ژنوتیپ N در پنج مورد (18 درصد) شناسایی شد. نتایج نشان می دهند که استافیلوکوکوس اوریوس در ایجاد ورم پستان بالینی در سنندج دخیل بوده و علیرغم وجود ژنوتیپ های محدود، تنوع سویه ای در جدایه های این باکتری در منطقه وجود دارد. عدم شناسایی ژنوتیپ جهانی A و نیز ژنوتیپ اختصاصی باکتری در سنندج، برای اولین بار گزارش می شود.
کلید واژگان: استافیلوکوکوس اورئوس, سنندج, ورم پستان گاوی, aroA, PCR-RFLPStaphylococcus aureus is one of the most important causes of contagious mastitis in domestic animals. Due to the existence of multiple strains of S. aureus and strain variations in chromosomal allelic rearrangement, different genotyping methods, such as analysis of the chromosomal DNA following the enzymatic digestion, are introduced for genetic typing of the bacterium. In the present survey, for the first time, the genetic diversity of S. aureus recovered from clinical bovine mastitis in Sanandaj was investigated based on PCR-RFLP analysis of the aroA gene. 120 bovine mastitic milk samples were collected aseptically and assessed. S. aureus isolated in culture and routine bacteriological methods were analyzed by aroA gene-based PCR. The amplicons with a size of 1153bp were digested with TaqI restriction enzyme and the fragments were electrophoresed. 28 S. aureus strains were isolated in phenotypic method among which the expected amplicon was observed in all of them. In enzymatic digestion, two RFLP patterns, nomenclatural based on the previous studies were generated. Genotype B was detected in 23 (82.14%) isolates and genotype N in 5 isolates (17.85%). The results demonstrate that S. aureus is involved in bovine mastitis in Sanandaj and despite the presence of limited genotypes, strain variation of this bacterium exist in the region. The presence of genotype B in all farms implies the same source of infection among farms, which should be considered in control programs of mastitis. Non-detection of universal genotype A and specific genotype of the bacterium in Sanandaj is reported for the first time.
Keywords: aroA, Bovine mastitis, PCR-RLFP, Sanandaj, Staphylococcus aureus -
ورم پستان گاو یکی از بیماری های شایع در گله گاوهای شیری است که توسط عوامل عفونی مختلفی از جمله کلبسیلا پنومونیه ایجاد می شود. مطالعه حاضر باهدف ردیابی این باکتری در موارد اورام پستان بالینی و تحت بالینی در گاو و بررسی عوامل بیماری زایی این باکتری انجام شد. درمجموع 130 نمونه شیر از گاوهای شیری مبتلا به اورام پستان در گاوداری های سطح استان چهارمحال و بختیاری اخذ و پس از کشت میکروبی و تایید مولکولی ایزوله های کلبسیلا پنومونیه جداشده، حضور شایع ترین عوامل حدت در این ایزوله ها به روش PCR ارزیابی شد. از 130 نمونه شیر مورد آزمایش، تعداد 30 نمونه (38/15 درصد) آلوده به کلبسیلا پنومونیه بودند که در این ایزوله ها اکثر عوامل حدت در بیماری زایی جرم ردیابی شد طوری که ژن های fimH و papC با فراوانی 90 و 65 درصد شایع ترین و ژن focDE/sfa با حضور 15 درصدی نادرترین ژن حدت ردیابی شده در این ایزوله ها بود. حضور انواع فاکتورهای حدت در ایزوله های کلبسیلا پنومونیه نشان گر دخالت مستقیم این عوامل در بیماری زایی باکتری بوده و لازم است جهت شناسایی بیماری زا بودن کلبسیلا توزیع حضور عوامل حدت مورد ارزیابی قرار گیرد.کلید واژگان: کلبسیلا پنومونیه, ورم پستان گاو, فاکتورهای حدت, استان چهارمحال و بختیاریBovine mastitis is one of the epidemic diseases in dairy cattle, that it was created by various infectious agents. The aim of this study was tracking of these bacteria in the cases such as bovine subclinical and clinical mastitis and studying of virulence factors of this bacteria. Overall, 130milk samples were collected from dairy cattle's in the Chaharmahal and Bakhtiyari state scale that they are affected to mastitis and then they were isolated microbial culture and molecular confirmation of Klebsiella pneumonia strains, Presence of the most prevalent of virulence factors in these strains was detected by PCR method. Of 130milk samples examined, 30 samples were positive (15.38%) to Klebsiella pneumonia. Of these strains, the most of virulence factors were detected in this bacteria: so that fimH and papA genes by excess of 65and 90% had the highest prevalent and sfa/focDE gene with 15% presence had the lowest rate of evaluation virulence gene in this isolates. Presence of kinds of virulence factors in the Klebsiella pneumonia isolates will have indicated direct intervention these factors for bacterium pathogen and it is needed to detection of Klebsiella pneumonia pathogen, it must study presence distribution of virulence factors.Keywords: Klebsiella pneumonia, Bovine mastitis, Virulence factors, Chaharmahal, Bakhtiyari
-
ورم پستان موجب تغییرات فیزیکی و شیمیایی در شیر و تغییرات آسیب شناسی در غده پستان می شود. این تحقیق با هدف شناسایی عوامل باکتریایی ورم پستان گاو در گاوداری های شهر اصفهان و بررسی اثر ضد باکتریایی عصاره های بره موم و گرده گل زنبور عسل بر باکتری های جداسازی شده انجام پذیرفت. از 10 گاو دارای علائم ورم پستان با رعایت شرایط استریل نمونه شیر تهیه شد. باکتری های جدا شده بر اساس خصوصیات ماکروسکوپی، میکروسکوپی و آزمون های بیوشیمیایی شناسایی شدند. عصاره های اتانولی و استونی بره موم و گرده گل با استفاده از روش خیساندن تهیه و اثر ضدباکتریایی آنها با استفاده از روش چاهک پلیت و هم چنین براساس روش میکرودایلوشن تعیین شد. باکتری های جدا شده شامل استرپتوکوکوس آگلاکتیه، استافیلوکوکوس آرئوس، گونه ای از کورینه باکتریوم، گونه ای از لیستریا، سودوموناس آئروژینوزا و اشرشیا کلای بودند. عصاره های بره موم و گرده گل در روش چاهک پلیت بر روی جدایه های گرم مثبت موثر بودند اما روی انواع گرم منفی تاثیری نداشتند. میانگین نتایج حداقل غلظت مهارکنندگی نشان دهنده اثرات قابل توجهی از عصاره استونی گرده گل بر استرپتوکوکوس آگالاکتیه (غلظت mg/ml 5/12)و عصاره اتانولی گرده گل بر گونه کورینه باکتریوم (غلظت mg/ml 5/12) بود. عصاره استونی بره موم بر استافیلوکوکوس آرئوس با غلظت mg/m 25 و بر گونه لیستریا با غلظت mg/ml 5/12 بیشترین تاثیر را داشت. نتایج در بررسی حداقل غلظت کشندگی مورد تایید قرار گرفت. عصاره های بره موم و گرده گل بر روی باکتری های گرم مثبت جداشده از ورم پستان گاو تاثیر قابل توجهی داشتند و این تاثیر بیشتر توسط عصاره های استونی مشاهده شد.کلید واژگان: ورم پستان گاو, اثرضد باکتریایی, بره موم, گرده گلMastitis is inflammation which causes physical and chemical changes in milk and pathological changes in mammary gland. The aims of present study were identification of bovine mastitis causative agents in Isfahan and survey of bee Propolis and Pollen antibacterial effect on the isolated bacteria. Milk samples were aseptically obtained from 10 mastitic cattle. The isolated bacteria were detected based on macroscopic, microscopic and biochemical characteristics. Ethanol and acetone extracts were prepared from Propolis and Pollen by soaking and the antibacterial effects of them determined using well plate and microdilution methods. The isolated bacteria included Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus, Corynebacterium sp., Listeria sp., Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli. Well plate method showed that Propolis and Polen extracts were effective on Gram-positive bacteria but had no effect on Gram-negative ones. The mean of results showed maximum effects of Pollen acetone extract on Streptococcus agalactiae (concentration of 12.5 mg/ml) and Pollen ethanol extract on Corynebacterium (concentration of 12.5 mg/ml). Acetone extract of Propolis showed maximum effect on Staphylococcus aureus (concentration of 25 mg/ml) and Listeria sp. (concentration of 12.5 mg/ml). The results were confirmed by minimum bactericidal concentration analysis. Extracts of propolis and pollen showed powerful effects on Gram-positive isolates and this effect was more detected by acetone extracts.Keywords: Bovine mastitis, Antibacterial effect, Propolis, Pollen
-
The macrolides appear to have considerable effects for treatment of bovine mastitis because of excellent diffusion into the mammary gland, long half-life, low protein binding, high intracellular concentration and lipid solubility. Acquired resistance to macrolides in Staphylococcus aureus is primarily related to target-site modification through acquisition of an erm gene. In the present study the prevalence of both phenotypic and genotypic tylosin resistance in S. aureus isolates (n = 103) from subclinical mastitis in nine dairy farms belonging to three different province of Iran were investigated. Overall, ermA, ermB and ermC was found in 7.80%, 32.00%, and 20.40% of S.aureus isolates, respectively. A very high percent of isolates (56.90%) were resistant to tylosin. MIC90 and MIC50 values were 64 and 32 µg mL-1, respectively. Most of tylosin resistant isolates did not harbour any erm gene but ermB was dominant gene among 58 tylosin resistant isolates of S. aureus. In overall, tylosin resistance was prevalent in S. aureus isolates obtained from bovine mastitis in Iran.Keywords: Bovine mastitis, erm genes, Macrolides, Staphylococcus aureus, Tylosin resistance
-
نشریه تحقیقات دامپزشکی و فرآورده های بیولوژیک، سال بیست و نهم شماره 2 (پیاپی 111، تابستان 1395)، صص 37 -44باکتری سودوموناس آئروژینوزا از مهم ترین پاتوژن های فرصت طلب بوده که موجب بروز ورم پستان های تحت بالینی مقاوم به درمان در گاوهای شیری می باشد. هدف این مطالعه، شناسایی اینتگرون های کلاس I در باکتری سودوموناس آئروژینوزای جداشده از ورم پستان و تعیین حساسیت آنتی بیوتیکی می باشد. در این مطالعه توصیفی-مقطعی، تعداد 150 نمونه شیر خام از دامداری های مختلف استان تهران و تعدادی نیز از منطقه شهرکرد جمع آوری و بر روی محیط های اختصاصی کشت داده شد. آزمایش حساسیت آنتی بیوتیکی با استفاده از روش دیسک دیفیوژن و میزان MIC با E-test مطابق دستورالعمل CLSI با آنتی بیوتیک هایی از گروه های مختلف انجام گردید. جهت شناسایی ژن اینتگرون کلاس I از آزمون PCR استفاده شد. از مجموع 150 نمونه شیر، 51 نمونه 34 درصد آلوده به باکتری سودوموناس آئروژینوزا بودند. نتایج آزمون آنتی بیوگرام نشان داد که بیشترین میزان مقاومت نسبت به آمپی سیلین، تتراسایکلین و کانامایسین به میزان 100 درصد، 2/94 و 2/94 درصد به ترتیب مشاهده شد. بیشترین مقاومت چندگانه نسبت به آنتی بیوتیکهای کانامایسین/آمپی سیلین/تتراسایکلین مشاهده شد. نتایج MIC مشخص نمود که نمونه ها به آنتی بیوتیک جنتامایسین بین μg 2-75/0، به آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین بین μg 38/0-094/0 و به آنتی بیوتیک آمیکاسین بین μg 4-05/0 حساس می باشند. نتایج مولکولی نشان داد، 1 جدایه (96/1 درصد) واجد ژن اینتگرون (int-1) می باشد. از آنجا که بیشتر اینتگرون ها، ژن ها و آنزیم های تغیر دهنده آنتی بیوتیکها را کد می کنند، حضور ژن های اینتگرون در نمونه های شیر خام درمان عفونت ناشی از باکتری سودوموناس آئروژینوزا حاوی این ژن را به دلیل فقدان آنتی بیوتیک جدید که طیف درمان وسیعی داشته باشد، با مشکل جدی روبرو می نماید.کلید واژگان: سودوموناس آئروژینوزا, اینتگرون کلاس I, مقاومت آنتی بیوتیکی, ورم پستان گاوPseudomonas aeruginosa is an important opportunistic pathogen that causes subclinical mastitis resistant to treatment, in lactating dairy cows. The Purpose of this study, were to identify class I integrons and determining antibiotic susceptibility of Pseudomonas aeruginosa isolated from mastitis. In this cross-sectional study, 150 samples of raw milk were collected from different farms, transported to the laboratory and cultured on specific media. Antimicrobial susceptibility test conducted by disk diffusion method and MIC (Minimum Inhibitory Concentration) determination test performed by E-test in accordance with CLSI guidelines, in various groups. To identify Class I integron gene PCR test were used. Of total number 150 milk samples, 51 samples (34%) were contaminated with Pseudomonas aeruginosa. Antibiotic test results showed that the highest rate of resistance were observed to Ampicillin, Tetracycline and Kanamycin at the rate of 100%, 94.2% and 94.2%, respectively. Most multiple resistances were observed against Kanamycin, Ampicillin and Tetracycline antibiotics. MIC results showed that isolated bacteria were sensitive to Gentamicin in concentration 0.75-2 μg, Ciprofloxacin at 0.094-0.38 μg and Amikacin at 0.05-4 μg. Results molecular tset showed, one isolate (1.96%) were carried Integrons gene (int-1). Since most integrons genes coding enzymes that inactive antibiotics, presence of Integrons genes in samples of raw milk, treatment infections caused by Pseudomonas aeruginosa wich carring these genes, because of the lack of new antibiotics that have a broad therapeutic range, would creat the major problems.Keywords: Pseudomonas aeruginosa, Integron Class I, Antibiotic resistance, Bovine mastitis
-
Staphylococcus aureus is generally regarded as a leading cause of mastitis in dairy cattle. The aim of this study was to investigate the pattern of agr groups and any possible relationship between agr groups and antibiotic resistance among S. aureus strains isolated from bovine mastitis in Northeast of Iran. For this purpose, a total of 300 bovine mastitic milk samples were taken from dairy industry farms of Khorasan Razavi Province, Iran. S. aureus were isolated and identified according to the standard methods. Antibiotic susceptibility testing was conducted by disk diffusion method. In this study a total of 31 isolates of S. aureus were evaluated for agrD gene polymorphism by specific primers. Most of the isolates belonged to agr group I (54.8%), followed by agr group III (25.8%) and agr group II (19.4%). There was not any isolates belonging to group IV. Resistance to methicillin in agr group I isolates was more than other groups. Agr groups II and III were quite susceptible to methicillin. Due to high prevalent of S. aureus isolates and high antibiotic resistance rate in bovine mastitic isolates, it is important to verify the characteristics of S. aureus strains in Iran.Keywords: Antibiotic resistance, Bovine mastitis, Specific agr groups, Staphylococcus aureus
-
ژن کد کننده پروتئین سطحی ایمنی زای قوی حفاظتی استرپتوکوکوس آگالاکتیه با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز تکثیر و در حامل بیان پروکاریوتی pET32a کلون شده و به صورت یک پروتئین نوترکیب در E. coli BL21 (DE3) بیان گردید. یک روش سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (الایزا) غیر مستقیم با استفاده از پروتئین خالص شده Sip به عنوان آنتی ژن جهت کوتینگ توسعه یافت که می توانست آنتی بادی اختصاصی استرپتوکوکوس آگالاکتیه را در سرم ها شناسایی کند. آنتی ژن جهت کوتینگ در غلظت μg/ml 125/3، سرم رقیق شده به نسبت 1:160، و آنتی بادی ثانویه کنژوگه شده با HPR در غلظت 1:400 موثرترین بودند که نتیجه مثبتی را به دنبال داشتند. الایزا ویژگی بالایی برای استرپتوکوکوس آگالاکتیه نشان داد که ممکن است برای ردیابی پاتوژن در موارد ورم پستان، برای مطالعات اپیدمیولوژیکی و نظارتی استفاده گردد.
کلید واژگان: ورم پستان گاوی, الایزا, استرپتوکوکوس آگالاکتیهThe sip gene encoding for a conserved highly immunogenic surface protein of Streptococcus agalactiae was amplified using polymerase chain reaction (PCR) and subcloned into prokaryotic expression vector pET32a (+) and expressed as a recombinant protein in E. coli BL21 (DE3). An indirect enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was developed using the purified Sip protein as a coating antigen، which could identify S. agalactiae specific antibody in sera. The coating antigen at a concentration of 3. 125 μg/ml، serum diluted to 1:160، and HRP-conjugated secondary antibody concentration at 1:4000 was found to be most effectivein exhibiting positive result. The ELISA was found to be highly specific for S. agalactiae that may be used for the detection of the pathogen in mastitis cases، for epidemiological studies and for surveillance.Keywords: Bovine mastitis, ELISA, Streptococcus agalactiae -
زمینه مطالعهورم پستان به عنوان یکی از پرهزینه ترین بیماری های موجود در گاوهای شیری می باشد و موجب کاهش چشمگیری در میزان تولید شیر می گردد. این بیماری، یکی از دلایل اصلی استفاده از آنتی بیوتیک در گاو های شیری است.به نظر می رسد که استافیلوکوکوس اورئوس پاتوژن اصلی مربوط به شیوع ورم پستان در گله های گاو شیری باشد.هدفهدف از این مطالعه بررسی و تعیین فعالیت ضدباکتریایی نانوسیلور علیه استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از ورم پستان های تحت بالینی در گاو است.روش کارMIC با روش رقیق کردن در مایع (براث میکرودایلوشن) و MBC با کشت دادن متوالی باکتری روی مولر هینتون آگار، در غلظتی که هیچ رشد مشخصی ایجاد نشود، تعیین گردیدند. برای مطالعات in vivo، به موش های آلوده به استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از ورم پستان های تحت بالینی، به مدت 5 روز نانوسیلور با دوز g/mLμ 25 تزریق شد.نتایجنتایج نشان داده است، که MIC و MBC نانوسیلور علیه استافیلوکوکوس اورئوس جداشده از ورم پستان های تحت بالینی در گاو، g/mLμ 5 می باشد. به علاوه زمان فعالیت ضد میکروبی نانوسیلور علیه استافیلوکوکوس اورئوس،7 دقیقه بعد از افزودن نانوذرات نقره است. مطالعات in vivo بررسی اخیر، نشان داده است که تزریق g/mLμ 25 نانوسیلور به مدت 5 روز، به طور کامل موش های آلوده به استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از ورم پستان های تحت بالینی را درمان کرد.
نتیجه گیری نهایی: این نتایج in vitro و in vivo به وضوح نشان می دهد که نانوسیلور فعالیت ضد باکتریایی خوبی علیه استافیلوکوکوس اورئوس دارد.
کلید واژگان: ورم پستان, گاوشیری, موش, نانوسیلور, استافیلوکوکوس اورئوسBackgroundBovine mastitis is the most costly disease in dairy cows and causes significant decrease in milk production. This disease is one of the main reasons of antibiotic therapy in dairy cows.ObjectivesStaphylococcus aureus is counted as a major pathogen associated with the outbreaks of mastitis in dairy herds. Therefore, the purpose of the present study is to examine the antibacterial activity of nanosilver against Staphylococcus aureus isolated from subacute mastitis in cow.MethodsThe MIC was calculated by a broth microdilution method, and the MBC was measured by subculturing the bacteria from the wells that showed no apparent growth onto Mueller-Hinton agar. For the in vivo experiment of the current investigation we injected 25 µg/mL of nanosilver for 5 days treat mice contaminated with Staphylococcus aureusisolated from subacute mastitis.ResultsThe results showed that the MIC and MBC of nanosilver for Staphylococcus aureusisolated from subacute mastitis was 5µg/mL. In addition, the results of the present study demonstrated that the time of the antimicrobial action of nanosilver against Staphylococcus aureus is 7 minutes after adding nanoparticles of silver. Also 5 days treatment with 25 of nanosilver treated contaminated mice with Staphylococcus aureus isolated from subacute mastitis.ConclusionsThese in vitro and in vivo results clearly indicate that the nanosilver might have a good antibacterial activity against Staphylococcus aureus.Keywords: bovine mastitis, dairy cow, mice, nanosilver, Staphylococcus aureus -
استافیلوکو ک های کواگولاز منفی (CoNS) اغلب با ورم پستان گاو ارتباط داشته و ممکن است به درمان ضد میکروبی مقاوم باشند. هدف از مطالعه حاضر بررسی حضور ژن های blaZ (مسوول مقاومت نسبت به پنی سیلین) و mecA (مسوول مقاومت نسبت به متی سیلین) در بین 108 CoNS متعلق به 9 گونه مختلف بدست آمده از ورم پستان گاو در هفت گله شیری (H1-H7) می باشد. از 108 جدایه CoNS، 44 جدایه استافیلوکوکوس همولیتیکوس، 17 جدایه استافیلوکوکوس کروموژنز، 11 جدایه استافیکوکوکوس اپیدرمیدیس، 11 جدایه استافیکوکوکوس وارنری، 11 جدایه استافیکوکوکوس کوهنی، 6 جدایه استافیکوکوکوس سیمیولانس، 4 جدایه استافیکوکوکوس هومینیس، 3 جدایه استافیکوکوکوس کاپیتیس، و 1 جدایه استافیکوکوکوس زایلوسوس بودند. ژن blaZ در 7/65% (71=n) از جدایه ها متعلق به همه گونه های استافیلوکوکوس شناسایی شد. پنج جدایه از نظر حضور ژن mecA مثبت بودند (6/4%)، که شامل 2 جدایه استافیلوکوکوس هومینیس، 1 جدایه استافیلوکوکوس همولیتیکوس، 1 جدایه استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس، و 1 جدایه استافیلوکوکوس وارنری بودند. همه CoNSهای حامل mecA همچنین از نظر ژن blaZ مثبت بوده و از دو گله مورد مطالعه (H3 و H6) بدست آمدند. همچنین اختلاف جزیی در توزیع هر دو ژن blaZ و mecA در بین گونه های CoNS مشاهده شد. این مطالعه نشان داد که CoNSهای بدست آمده از ورم پستان گاو می توانند مخزنی برای ژن blaZ باشند. این مطالعه همچنین شواهدی مبنی بر حضور CoNS-های مقاوم نسبت به متی سیلین (MR-CoNS) را ارائه نموده و نیاز به پیگیری همه گیرشناسی آن ها را به منظور جلوگیری از خطر انتشار به انسان از طریق تماس مستقیم و/یا مصرف غذای آلوده تاکید می نماید.
کلید واژگان: استافیلوکوک های کواگولاز منفی, ورم پستان گاو, blaZ, mecA, واکنش زنجیره ای پلیمراز, ایرانCoagulase-negative staphylococci (CoNS) are often associated with bovine mastitis and may be resistant to antimicrobial therapy. The aim of the current study was to investigate the presence of blaZ (responsible for penicillin resistance) and mecA (responsible for methicillin resistance) genes among 108 CoNS belonging to 9 different species isolated from bovine mastitis in seven dairy herds (H1-H7). Of 108 CoNS isolates، 44 were Staphylococcus haemolyticus، 17 S. chromogenes، 11 S. epidermidis، 11 S. warneri، 11 S. cohnii، 6 S. simulans، 4 S. hominis، 3 S. capitis، and 1 S. xylosus. The blaZ was detected in 65. 7% (n=71) of all Staphylococcus spp. isolates. Five isolates were positive for the presence of mecA gene (4. 6%)، including 2 S. hominis، 1 S. haemolyticus، 1 S. epidermidis، and 1 S. warneri. All mecA-carrying CoNS were also positive for the blaZ gene and were recovered from two studied herds (H3 and H6). Some variations were also observed in distribution of both blaZ and mecA genes between CoNS species. This study demonstrates that CoNS from bovine mastitis can be reservoirs of blaZ gene. This study also provides evidence of the presence of methicillin resistant CoNS (MR-CoNS) and emphasizes the need for their epidemiological monitoring، in order to prevent the risk of spread to human through direct contact and/or consumption of contaminated food.Keywords: Coagulase, negative staphylococci, bovine mastitis, blaZ, mecA, PCR, Iran
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شدهاند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شدهاست. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که میخواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.