جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه "pa4" در نشریات گروه "دامپزشکی"

جستجوی pa4 در مقالات مجلات علمی

انتخاب همه

ارزیابی پاسخ ایمنی نسبت به پروتئین کایمریک نو ترکیب LFD1-PA4 باکتری باسیلوس آنتراسیس

حسن میرحاج، حسین هنری *، احسان زمانی

مجله تحقیقات دامپزشکی دانشگاه شیراز، سال بیستم شماره 2 (پیاپی 67، Spring 2019)، صص 112 -119

پیشینه
سیاه زخم بیماری عفونی بسیار خطرناکی است که انسان و دام های اهلی را تحت تاثیر قرار می دهد. به منظور حفاظت انسان در برابر عفونت سیاه زخم، واکسن های موثر که بتوانند پاسخ ایمنی سریع و بلند مدت ایجاد کنند ضروری می باشد. ناحیه 4، آنتی ژن حفاظتی (PA) و ناحیه 1، فاکتور کشنده (LF)، دارای خاصیت آنتی ژنی بسیار قویی می باشند.
هدف
در این مطالعه تجربی، با ترکیب این دو ناحیه، کاست ژنی lfD1-pa4 طراحی و در وکتور بیانی pET28a(+) همسانه سازی و به باکتری (DE3) PlysS E. coli BL21 منتقل گردید.
روش کار
برای این منظور ژن pa4 با واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) تکثیر و در ناقل pGEM-T Easy Vector همسانه سازی شد. هضم آنزیمی pGEM-pa4 و pGEM-lfD1 با آنزیم های XbaI و HindIII، انجام گرفت. واکنش الحاق توسط آنزیم T4 لیگاز انجام و کاست ژنی، lfD1-pa4، در pET28a زیر همسانه سازی و به باکتری E. coli BL21 (DE3) PlysS منتقل گردید. بیان و تخلیص پروتئین کایمریک با روش الکتروفورز روی ژل پلی آکریل آمید سدیم دودسیل سولفات (SDS-PAGE) و وسترن بلاتینگ مورد تایید قرار گرفت. به منظور بررسی پاسخ ایمنی، پروتئین کایمریک (LFD1-PA4) و ترکیبی (LFD1+PA4) طی چهار نوبت به موش تزریق و بعد از جمع آوری نمونه های خون، میزان پادتن حاصل با آزمون سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) مورد ارزیابی قرار گرفت.
نتایج
یافته های حاصل نشان می دهد که پروتئین های کایمریک و ترکیبی هر دو ایمونوژنیک می باشند با این حال پروتئین LFD1-PA4 سیستم ایمنی موش را به میزان بیشتری تحریک می نماید.
نتیجه گیری
پروتئین کایمریک LFD1-PA4 پاسخ ایمنی قوی تر نسبت به پروتئین ترکیبی LFD1+PA4 ایجاد کرده و باعث پاسخ آنتی بادی نسبت به فاکتور کشنده (LF) و فاکتور ادم (EF) شد. بنابراین این امید می رود که این پروتئین کاندیدای واکسن سه ظرفیتی موثرتری جهت پیشگیری از بیماری سیاه زخم باشد.

کلید واژگان: سیاه زخم, عیار پادتن, LFD1, LFD1-PA4, PA4

چکیده مشاهده متن مقاله پژوهشی/اصیل زبان: انگلیسی

Evaluation of immune response to recombinant Bacillus anthracis LFD1-PA4 chimeric protein

H. Mirhaj, H. Honari *, E. Zamani

Iranian Journal of Veterinary Research, Volume:20 Issue: 2, Spring 2019, PP 112 -119

Background
Anthrax is a particularly dangerous infectious disease that affects humans and livestock. Efficacious vaccines that can rapidly induce a long-term immune response are required to prevent anthrax infection in humans. Domains 4 and 1 of the protective antigen (PA) and lethal factor (LF), respectively, have very high antigenic properties.
Aims
In this experimental study, the pET28a-lfD1-pa4 expression vector was designed, constructed and transferred into E. coli BL21 (DE3) plysS.
Methods
For this purpose, pa4 gene was amplified by polymerase chain reaction (PCR) and cloned in a pGEM T-easy vector. The pGEM-pa4 and pGEM-lfD1 were digested by XbaI and HindIII enzymes. The ligation reaction was performed by ligase T4 enzyme and the gene cassette, lfD1-pa4, was subcloned in pET28a and transferred to E. coli BL21 (DE3) PlysS. Expression and puriﬁcation of chimeric proteins were conﬁrmed by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and Western blotting techniques. The chimera LFD1-PA4 and mixed LFD1+PA4 proteins were injected four times into mice and antibody production was relativity evaluated by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test.
Results
The results showed that both chimeric and mixed proteins are immunogenic, but LFD1-PA4 has a higher potential to stimulate mice immune system.
Conclusion
LFD1-PA4 chimeric protein induced a higher immune response than LFD1+PA4 mixed protein and elicited antibody responses to LF and edema factor (EF), therefore, it holds promise to be a more effective trivalent vaccine candidate to use in anthrax prevention.

Keywords: Anthrax, Antibody titer, LFD1, LFD1-PA4, PA4

Abstract View Paper Research/Original Article Original: English

نکته

نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.

به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه "pa4" در نشریات گروه "دامپزشکی"