جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « serum resistance » در نشریات گروه « دامپزشکی »
-
زمینه مطالعه
ژن خوانش باز آبی (bor) و ژن افزایش دهنده بقای سرمی (iss) در مقامت به سرم اشریشیاکلی بیماریزای طیور O78 نقش و ساختمان و احتمالا عملکردی مشابه دارند.
هدفبرای تعیین این که آیا بین مقادیر رونوشت برداری bor و iss همبستگی وجود دارد یا خیر، این مطالعه انجام شد.
روش کاردر سه زمان 24، 28 و 32 ساعت بعد از تلقیح اشریشیاکلی بیماریزای طیور O78 (χ1378) در سرم جوجه، RNA تام استخراج شد. شدت فلورسانس باندهای ژل الکتروفورز bor و iss پس از ساخت cDNA و واکنش نسخه برداری معکوس زنجیره ای پلیمرازمحاسبه شد. در سطح معنی داری p < 0.05، توسط آزمون های همبستگی پیرسون و پیرسون نسبی، به ترتیب، همبستگی بین مقادیررونوشت برداری bor و iss و تاثیر زمان های منتخب فوق در همبستگی احتمالی ارزیابی شد.
نتایجهمبستگی قوی و مثبت بین مقادیر رونوشت برداری bor و iss مشاهده شد (P = .012) که تحت تاثیر زمان های منتخب نبود (P = .001).
نتیجه گیری نهاییدر مطالعات رونوشت برداری bor به iss نیز توجه شود و بالعکس. یافته ما که اولین گواه برای همبسته بودن میزان رونویسی bor و iss است می تواند براساس تعداد رونوشت و آلل ها، توالی بالادستی، فرایند تنظیم در مرحله پیش رونویسی، محل bor و iss در χ1378 و گرفتن نمونه در زمان های دیگر توضیح داده شود. یافته های ما علاوه بر تاکید چندعاملی بودن بودن مکانیسم مقاومت سرمی اشریشیاکلی بیماریزای طیور O78، می تواند به عنوان پایه ای برای مطالعات بعدی در مورد رونویسی bor و iss بویژه در χ1378 و زمان های منتخب استفاده شود.
کلید واژگان: اشریشیاکلی بیماریزای طیور, ژن افزایش دهنده بقای سرمی, ژن خوانش باز آبی, مقاومت سرمی, واکنش نیمه کمی نسخه برداری معکوس زنجیره ای پلیمراز}BACKGROUNDBlue Open Reading (bor) and increased serum survival (iss) genes, with intense structural and possible functional similarities, engage in the serum resistance of Avian Pathogenic Escherichia coli O78 (APEC-O78).
OBJECTIVESThis research aimed to determine whether there is a correlation between the transcriptional level of bor and iss of APEC-O78 inoculated in serum.
METHODSTotal RNA was extracted 24, 28, and 32 hrs after the inoculation of an APEC-O78 isolate, χ1378, to chicken serum. The fluorescence intensities related to the bands of gel electrophoresis of bor and iss were computed after cDNA synthesis and reverse transcription -PCR reaction assay. Using Pearson’s partial correlation tests, the relationship between the transcriptional levels of bor and iss, and the influence of the selected time points on the possible relationship were respectively measured at P<0.05 for statistical significance.
RESULTSA correlation was observed between the transcription levels of bor and iss (P=.012), which was not influenced by the selected time points (P=.001).
CONCLUSIONSThe bor must be carefully weighed in the transcriptional analysis including iss and vice versa. The number of transcripts/alleles, upstream sequence, regulation process at the pre-transcriptional phase, and the location of bor and iss in χ1378, and taking samples from different time intervals may explain our result. Our find-ings emphasizes the multifactorial and complex mechanism of APEC-O78 serum resistance, and can lay the foundation for further studies on the transcription of bor and iss, particularly in the specific strain and the three time points.
Keywords: APEC, bor, iss, semi-quantitative Reverse Transcription PCR, serum resistance} -
زمینه مطالعهکلی باسیلوز یکی از بیماری های مهم در صنعت طیور است. سروتیپ 78O اشریشیاکلی بیماریزای طیور)78(APEC-O شایع ترین عامل این بیماری در ایران است. از جمله عوامل حدت اشریشیاکلی بیماریزای طیور، ژن افزایش دهنده بقای سرمی (iss) است که در مقاومت به سرم نقش دارد. مقاومت به سرم یکی از رهیافت های سیستمیک شدن اشریشیاکلی بیماریزای طیور می باشد. با توجه به این که غالب ترین شکل بالینی کلی باسیلوز طیور به صورت خارج روده ای می باشد و احتمالا این فرم از بیماری به مقاومت سرمی باکتری ارتباط دارد، در نتیجه به نظر می رسد که احتمالا با حذف ژن iss رهیافتی در کنترل بیماری کلی باسیلوز ایجاد گردد. علاوه بر این، اطلاعات کمی در مورد مکانیسم مقاومت سرمی 78APEC-O وجود دارد.هدفدر مطالعه حاضر، سویه موتان با حذف ژن iss از سویه بومی (1378)c اشریشیاکلی بیماریزای طیور 78O ایجاد گردید و سویه موتان از نظر مقاومت به سرم با سویه وحشی مورد ارزیابی قرار گرفت.روش کاردر این مطالعه، سیستم lambda red recombinase برای حذف ژن iss در سویه بومی (1378)c اشریشیاکلی بیماریزای طیور 78O مورد استفاده قرار گرفت. ابتدا پلاسمید 46pKD (تولید کننده آنزیم های سیستم)lambda red recombinase و سپس محصول PCR که دارای توالی مشابه اطرافی با ژن iss و نشانگر مقاومت به کانامایسین بود به داخل سویه بومی (1378)c اشریشیاکلی بیماریزای طیور 78O ترانسفورمه گردید. حساسیت به سرم نیز به روش میکروتیتر در سویه وحشی و موتان مورد ارزیابی قرار گرفت.نتایجنتایج نشان داد که سویه جهش یافته با موفقیت ایجاد شده و به جای ژن iss، کاست مقاومت کانامایسین جایگزین شد. همچنین، اگرچه، سویه موتان به سرم حساس بود اما تفاوت معنی داری از نظر مقاومت به سرم بین سویه موتان و وحشی وجود نداشت.
نتیجه گیری نهایی: روش lambda red recombination به عنوان یک روش ساده و مفید برای حذف ژن قابل استفاده است. همچنین احتمالا ژن های دیگری در جبران فعالیت ژن iss نقش دارند.
کلید واژگان: ژن افزایش دهنده بقای سرمی, lambda red recombineering, اشریشیاکلی بیماریزای طیور 78O, مقاومت سرمی}BackgroundColibacillosis، caused by different serotypes of avian pathogenic Escherichia coli (APEC)، is one of the important diseases in poultry industry. The isolate O78 is the most prevalent serotype of APEC in Iran. One of the APEC virulence factors، increased serum survival (iss) gene، is related to serum resistance. The usual form of colibacillosis in avian is extraintestinal، and serum resistance is applied one way by APEC to reach internal organs; hence، it appears that the control of colibacillosis in poultry regarding the deletion of iss and the construction of a serum sensitive APEC strain is beneficial. Additionally، the knowledge about APEC serum resistance could be extended using mutant strains.ObjectivesThe present study was an attempt to generate an iss mutant strain from native APEC-O78 strain |c|1378 and to study the level of serum resistance of native APEC-O78 strain c1378 in comparison with its mutant (APEC-O78 strain c1378|D|iss).MethodsThe lambda red recombinase system was utilized to delete iss gene in native APEC-O78 strain c1378. This strain was first transformed with the plasmid pkD46 to introduce the lambda red recombinase system and then the PCR product with sequence homology to the iss gene and a kanamycin resistance marker was transformed into the APEC-O78 strain c1378. Serum sensitivity of mutant and wild type strain was investigated by microtiter test.ResultsThe generation of mutant was successful and the iss was replaced with kanamycin resistance cassette. Also، it was observed that the mutant was sensitive to serum. However، serum sensitivity of iss deleted mutant was not statistically different from its parents.ConclusionsApplication of lambda red recombination could be a simple and useful technique for production of a precisely defined gene deletion. Also، there may be some genes that compensate the activity of iss gene.Keywords: iss, lambda red recombineering, Native APEC, O78 strain |c|1378, serum resistance}
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شدهاند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شدهاست. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که میخواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.