مطالعه مقایسه ای ویژگی های ایمنی شناختی و ساختاری دو کاندید واکسن نوترکیب علیه نوروتوکسین بوتولینوم تیپ E

اخیرا، پروتئین های نوترکیب مشتق شده از نوروتوکسین بوتولینوم به عنوان واکسن های بالقوه بوتولیسم پیشنهاد شده اند. در این تحقیق، ما با تمرکز روی نوروتوکسین بوتولینوم تیپE (BoNT/E) روی دو نمونه از این پروتئین های نوترکیب بر پایه ی دومن اتصالی سم مطالعه کردیم: یکی پروتئین کایمر چند ظرفیتی که از زیر دومن های اتصالی سروتیپ های A، B و E نوروتوکسین بوتولینوم تشکیل شده است و دیگری پروتئین نوترکیب تک ظرفیتی که حاوی 93 اسیدآمینه از انتهای کربوکسیلی زنجیره سنگین نوترکیب rBONT/E-HCC است. هر دو این پروتئین ها یک ناحیه مشابه (48 اسید آمینه ای) دارند که واجد یکی از مهمترین اپی توپ های BoNT/E است (توالی YLTHMRD).
کارایی پروتئین های نوترکیب در تولید آنتی بادی، تفاوت های ساختاری آن ها و جایگاه اپی توپ BoNT/E در آن ها با استفاده از الایزا، دورنگ نمایی دورانی، مدل سازی محاسباتی و پیشگویی های آب گریزی مقایسه گردید.
مطالعات ایمنی شناختی نشان داد که بازده آنتی بادی علیه rBoNT/E-HCC بیشتر از پروتئین کایمر بود. الایزای متقاطع ثابت کرد که آنتی بادی علیه پروتئین کایمر، rBoNT/E-HCC را موثرتر می شناسد. با این وجود، هردو دسته ی آنتی بادی (آنتی بادی ضد پروتئین کایمر و آنتی بادی ضد rBoNT/E-HCC) قادر به شناسایی پروتئین دیگری بوده اند. مطالعات ساختاری با دورنگ نمایی دورانی نشان داد که پروتئین کایمر تا حدودی ساختار دوم بیشتری نسبت به rBoNT/E-HCC دارد.
بحث: نتایج ایمنی شناختی پیشنهاد می کند که ناحیه مشابه مذکور در rBoNT/E-HCC بیشتر در معرض است. یافته های دورنگ نمایی دورانی، مدلسازی محاسباتی پروتئین و پیشگویی های آب گریزی نشان دهنده جایگاه بیشتر در معرض برای ناحیه مشابه مذکور در rBoNT/E-HCC نسبت به پروتئین کایمر می باشد. این یافته ها با نتایج ایمنی شناختی قویا موافقت دارد.