طراحی روش آگلوتیناسیون جهت تشخیص آنتیژن مانو پروتئین جدا شده

مخمرهای جنس کاندیدا از عوامل مهم عفونت های بیمارستانی هستند. آمار جهانی سیر فزاینده میزان شیوع و بروز عفونت های ناشی از کاندیدا را نشان می دهد. تشخیص این عفونت کشنده و مهاجم به علت غیر اختصاصی بودن علایم بالینی مشکل می باشد. هدف از این مطالعه طراحی روش سریع، آسان و حساس آزمایشگاهی استفاده از ذرات طلا برای تشخیص کاندیدا آلبیکنس در شرایط آزمایشگاهی می باشد.
در این پژوهش آزمایشگاهی در ابتدا آنتی ژن مانوپروتئین دیواره سلولی کاندیدا آلبیکنس با استفاده از روش افینیتی کروماتوگرافی و با استفاده از ستون کانکاوالین A تخلیص و الکتروفورز گردید. سپس عصاره حاوی این آنتی ژن به خرگوش ها تزریق و پس از تولید آنتی بادی پلی کلونال در خرگوش علیه مانان، خونگیری از خرگوش انجام شد. سپس سرم آن با استفاده از ستون DEAE-سلولز، آنتی بادی پلی کلونال خرگوشی علیه آنتی ژن مانان کاندیدا آلبیکنس تخلیص گردید. در مرحله بعد این آنتی بادی به ذرات طلا متصل وآزمایش آگلوتیناسیون با استفاده از ذرات طلا جهت شناسایی مانوپروتین انجام شد.
نتایج تست آگلوتیناسیون با چشم غیرمسلح و بر اساس تغییر رنگ از قرمز به آبی مشخص نمود که این آزمایش می تواند برای تشخیص سریع آسان و حساس جهت آنتی ژن کاندیدا آلبیکنس استفاده شود.
این مطالعه نشان داد که استفاده از روش های مبتنی بر سنجش ایمنی مانند آگلوتیناسیون ذرات طلا در صورتی که حساسیت آن افزایش یابد به علت سهولت و سرعت می تواند از سنجش های مناسب و دقیق برای کاندید یازیس سیستمیک باشد.