بیان و تخلیص پروتئین همراه نوروتوکسین (HA-33/A) کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A و بررسی قابلیت آنتی ژنی آن
نویسنده:
چکیده:
سابقه
کمپلکس های نوروتوکسین بوتولینوم (BoNT) از نوروتوکسین و پروتئین های همراه با نوروتوکسین تشکیل شده اند. هماگلوتینین-33 (HA-33) یکی از اعضای کمپلکس نوروتوکسین بوتولینوم تیپ A (BoNT/A) می باشد. با توجه به نقش حفاظتی HA-33 در حفاظت از BoNT/A در برابر شرایط نامساعد معده - روده ای و همچنین نقش ادجوانتی آن، تولید نوترکیب این پروتئین باارزش می باشد. بنابراین در این مطالعه HA-33 بیان و تخلیص شد و سپس قابلیت آنتی ژنی آن در موش مطالعه شد.روش ها
ابتدا توالی ژن ha-33 کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A از بانک ژنی (GenBank) گرفته شد. توالی ژنی بهینه سازی و در وکتور pET28a(+) سنتز شد. سپس سویه (DE3) E. coli BL21 با استفاده از وکتور نوترکیب ترانسفورم شد و بیان پروتئین HA-33 در دمای 37 درجه سانتی گراد و زمان القای 5 ساعت بهینه شد.نتایج
پروتئین نوترکیب با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی nickel nitrilotriacetic acid agarose تخلیص و با استفاده از ایمونوبلاتینگ تایید شد. همچنین واکنش الیزا نشان داد که این پروتئین باعث تولید آنتی بادی با تیتر بالایی در موش شده است.نتیجه گیری
نتایج نشان داد که بیان و تخلیص بالای این پروتئین نوترکیب، باعث افزایش تیتر بالای آنتی بادی در موش شده است.کلیدواژگان:
نوروتوکسین بوتولینوم ، پروتئین همراه HA ، 33 ، بیان ، تخلیص
زبان:
فارسی
صفحات:
165 تا 170
لینک کوتاه:
magiran.com/p1165052
دانلود و مطالعه متن این مقاله با یکی از روشهای زیر امکان پذیر است:
اشتراک شخصی
با عضویت و پرداخت آنلاین حق اشتراک یکساله به مبلغ 1,390,000ريال میتوانید 70 عنوان مطلب دانلود کنید!
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی نامحدود همه کاربران به متن مطالب تهیه نمایند!
توجه!
- حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران میشود.
- پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانههای چاپی و دیجیتال را به کاربر نمیدهد.
In order to view content subscription is required
Personal subscription
Subscribe magiran.com for 70 € euros via PayPal and download 70 articles during a year.
Organization subscription
Please contact us to subscribe your university or library for unlimited access!