آنالیز بیان خالص سازی و گلیکوزیله شدن قسمت VP2 ویروس بیماری بورس عفونی ماکیان در مخمر

بیماری بورس عفونی (IBD) یک بیماری نابود کننده و به شدت واگیر در ماکیان جوان می باشد و عامل ایجاد کننده آن ویروس بیماری بورس عفونی می باشد (IBDV). به منظور بهینه کردن ایمنی زایی واکسن تحت واحدی نو ترکیب IBDV، از واکسن IBD حاوی آنتی ژن mVP2 گلیکوزیله شده استفاده گردید. در ابتدا ژن mVP2 ویروس IBDV همراه با یک توالی اسید نوکلئیک کد گذاری شده اپی توپ سلولی B ویروس IBDV (KFDQML) در انتهای 5 ژن VP2، همراه با یک توالی اسید نوکلئیک کد گذاری شده اپی توپ سلولی B ویروس IBDV (LASP) و برچسب هیستیدینی (His) در انتهای 3 ژن VP2 کلون گردید. سپس پروتئین mVP2 ویروس IBDV در مخمر متیلوتروف Pichia pastoris که می تواند پروتئین گلیکوزیله را ترشح کند، بیان گردید. پروتئین نو ترکیب mVP2 با رنگ آمیزی PAS به رنگ صورتی در می آید که بیانگر گلیکوزیله شدن آن می باشد. در انتها پروتئین mVP2 ویروس IBDV با استفاده از ستون هیستیدینی کروماتوگرافی خالص گردید. نتایج نشان داد که پروتئین گلیکوزیله ویروس IBDV تغییر یافته با پپتیدهای اپی توپ می تواند در مخمر Pichia pastoris بیان گردد. این تحقیق زمینه ای برای توسعه و تکامل یک واکسن نو ترکیب بیماری بورس عفونی با ایمنی زایی بالا را فراهم می کند.