کاهش میزان توکوفرول کل از طریق خاموشی ژن HPT در آرابیدوپسیس تالیانا با استفاده از تکنیک RNAi

در شرایط تنش، گونه های فعال اکسیژن (ROS) که از اکسیژن مولکولی مشتق می شوند، در برگ ها تجمع می یابند و سبب اکسیداسیون ترکیبات مهم سلولی از جمله پروتئین ها، کلروفیل و لیپیدها می شوند. به طور کلی توکوفرول ها1 تحت عنوان ویتامین E مطرح هستند. ویتامین E از ترکیبات محلول در چربی است و در ترکیب با کاروتنوئیدها، آسکوربات، گلوتاتیون و آنتی اکسیدان های دیگر در نگهداری یکپارچگی غشاهای فتوسنتزی در شرایط تنش نقش مهمی دارد. توکوفرول ها و توکوترینول ها2 مولکول های آمفی پاتیکی3 هستند که به عنوان آنتی اکسیدان قادر به حذف گونه های فعال اکسیژن و رادیکال های لیپید پیروکسیل در محیط های چربی دوست هستند. هموجنتیسات فتیل ترانسفراز (HPT)4 از آنزیم های کلیدی مسیر بیوسنتز ویتامین E است. در این تحقیق برای بررسی نقش آنزیم HPT در تولید متابولیت توکوفرول، خاموشی این ژن با استفاده از تکنیک RNAi مورد بررسی قرار گرفت. گیاهان آرابیدوپسیس به روش غوطه وری گل آذین تراریخت شدند و گیاهان حاصل با آنتی بیوتیک کانامایسین مورد ارزیابی اولیه قرار گرفتند و سپس میزان توکوفرول آن ها بررسی شد. در محیط حاوی کانامایسین حدود 70 گیاه به دست آمد. ارزیابی میزان توکوفرول در لاین های به دست آمده نشان داد که میزان توکوفرول در حدود 28 لاین نسبت به شاهد کاهش معنی دار داشته است و در بقیه تفاوت معنی داری ملاحظه نشد که در این بین لاین های 43، 68، 67، 70 و 58 به ترتیب بیشترین کاهش را نشان دادند.