تولید آنتی بادی پلی کلونال بر اساس پپتید علیه پروتئین غیر ساختاری NSP4) 4) روتا ویروس گاوی

پروتئین غیرساختاری 4 (NSP4) روتا ویروس، پروتئینی است با عملکرد چندگانه که نقش مهمی در مورفوژنز و آثار سیتوپاتیک مرتبط با مرگ سلول دارد. با این حال، تمامی اثرات بیولوژیکی پروتئین 4NSP به طور کامل مشخص نشده است. از آنجائیکه به دست آوردن اطلاعات بیشتر در مورد این پروتئین نیازمند وجود آنتی بادی شناسایی کننده پروتئین است و به دلیل اینکه آنتی بادی علیه این پروتئین به صورت تجاری وجود ندارد، این مطالعه به منظور تولید آنتی بادی پلی کلونال علیه پپتید سنتتیک ناحیه ایمنوژنیک پروتئین NSP4 روتاویروس سویه RF با رویکرد کاربرد تشخیصی و تحقیقاتی طراحی شده است. در مطالعه حاضر توالی پپتیدی مطابق با توالی114-135 از NSP4 به وسیله گلوتارآلدئید و با استفاده از روش اتصال یک مرحله ای به پروتئین آلبومین سرم گاو (BSA) متصل گردید. پپتیدهای اتصال یافته به طور کامل دیالیز شده و به خرگوش های سفید نیوزلندی تزریق شد. آنتی سرم اختصاصی علیه پپتید ناحیه 114-135 پروتئین NSP4 با استفاده از تست هایIF و وسترن بلات تائید شد. نتیجه نشان داد که به طور موفقییت آمیزی آنتی بادی پلی کلونال علیه پروتئین NSP4 ایجاد شده است. در مجموع به دلیل اینکه پروتئین NSP4 یک پروتئین نسبتا سمی برای سلول است، لذا بیان پروتئین با طول کامل در سیستم های بیانی تقریبا غیر عملی است. بنابراین تولید آنتی بادی اختصاصی علیه پپتید ایمنو ژنیک ممکن است بهترین رویکرد باشد.