جداسازی و شناسایی سویه تولیدکننده آنزیم فسفولیپاز از پساب صنعت روغن و جهش آن

در پژوهش حاضر گونه های مختلف تولید کننده آنزیم فسفولیپاز از پساب صنعت روغن جداسازی و در نهایت سویه قارچی ZB-ZH 192 Tricoderma atroviride شناسایی و جهت ادامه بررسی ها انتخاب گردید. جهت افزایش میزان فعالیت آنزیم، سویه منتخب تحت جهش تصادفی توسط پرتودهی با اشعه گاما در دزهای Gy 200، 400، 600 و 800 قرار گرفت. مقایسه میزان فعالیت آنزیم سویه جهش یافته با نوع وحشی نشان داد که دز Gy 400 اشعه گاما سبب ایجاد جهش پایدار همراه با افزایش میزان فعالیت فسفولیپاز و توده زیستی، به ترتیب از 96/1 به U/mL/3 و g/L13/8 به g/L 17/13 شده است. به منظور غربالگری و بررسی اثر فاکتورهای مختلف بر میزان توده زیستی و فعالیت فسفولیپاز سویه جهش یافته منتخب، از طرح پلاکت - برمن با هفت متغیر دما، زمان، میزان فسفولیپید سویا (به عنوان منبع کربنی)، میزان پپتون (به عنوان منبع نیتروژنی)، نسبت مساوی از منو و دی پتاسیم هیدروژن فسفات (به عنوان منبع فسفر)، درصد تلقیح و سن تلقیح، در دو سطح، توسط نرم افزار JMP استفاده گردید. نتایج نشان داد که سطوح بالای متغیرهای زمان، دما و فسفولیپید سویا به عنوان منبع کربنی اثر معنی داری بر میزان فعالیت آنزیمی داشتند، در حالی که متغیرهای میزان پپتون به عنوان منبع نیتروژنی و زمان، بر تولید توده زیستی تاثیر معنی دار نشان دادند.