تاثیر امواج فراصوت بر زنده مانی سلولهای توتون

توتون Nicotiana tabacum L.) از چندین دهه گذشته به عنوان یک گیاه مدل برای کشت بافت و مهندسی ژنتیک مورد استفاده قرار می گیرد. در این پژوهش، اثر امواج فراصوت بر زنده مانی و شکست سلول های توتون مورد ارزیابی قرار گرفت. بدین منظور، ریزنمونه های برگ گیاه توتون در محیط کشت MS حاوی 5/1 میلی گرم بر لیتر 2،4-D و یک میلی گرم بر لیتر کینتین کشت داده شد تا کالوس تولید کنند. کشت سوسپانسیون سلولی از طریق انتقال کالوس های حاصل از ریزنمونه برگ به محیط کشت مایع ایجاد شد. سپس سوسپانسیون سلولی در معرض امواج فراصوت در دما و زمان های مختلف قرار گرفته و درصد زنده مانی سلول ها با استفاده از رنگ آمیزی تریپان بلو و تغییرات ساختار و فراساختاری سلول ها توسط میکروسکوپ نوری و الکترونی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که با افزایش مدت زمان تیمار با امواج فراصوت و همچنین دمای اعمال تیمار، درصد زنده مانی سلول ها به طور معنی داری کاهش یافت. بیشترین سطح زنده مانی سلول ها در دمای 40 درجه سانتی گراد و دو دقیقه امواج فراصوت (702/76 درصد) و دمای 25 درجه سانتی گراد و زمان دو دقیقه امواج فراصوت (67/75 درصد) بوده است. بیشترین شکست سلولی به ترتیب مربوط به دمای 50 درجه سانتی گراد و 14 دقیقه امواج فراصوت (733/18 درصد) و دمای 25 درجه سانتی گراد و 20 دقیقه اعمال امواج فراصوت (48/17 درصد) بود. میکروسکوپ الکترونی نگاره (SEM) ایجاد حفرات با اندازه مختلف در دیواره سلول بر اثر اعمال امواج فراصوت را نشان داد.