کلون، بیان، تخلیص و بررسی آنتی ژنیسیته نواحی آنتی ژنیک پروتئین MOMP کلامیدیا تراکوماتیس

کلامیدیا تراکوماتیس انگل داخل سلولی اجباری، گرم منفی و یکی از شایع ترین عوامل عفونت های جنسی می باشد. پروتئین MOMP بیش از 60% پروتئین های خارج غشایی را شامل می باشد که نشان دهنده اهمیت این پروتئین برای شناسایی باکتری کلامیدیا تراکوماتیس می باشد. هدف از مطالعه، تولید پروتئین نوترکیب متشکل از نواحی آنتی ژنیک پروتئین MOMP از ژن omp1 و بررسی آنتی ژنیسیته آن می باشد.
در این مطالعه، قطعه های دارای بالاترین خاصیت آنتی ژنیک ژن omp1 به طول bp674 بر اساس برنامه های بیوانفورماتیکی به دست آمد و با لینکر انعطاف پذیر به هم متصل شدند. سپس در ناقل پلاسمیدی pET32a کلون و بیان شد پس از خالص سازی پروتئین نوترکیب، آنتی ژنیسیته آن با استفاده از وسترن بلات با سرم افراد آلوده به کلامیدیا بررسی شد.
بر اساس نتایج به دست آمده، در تمام نمونه های سرمی بیماران مبتلا به عفونت های کلامیدیایی، باندهای مربوط به واکنش آنتی ژن با آنتی بادی در کاغذ نیتروسلولز مشاهده می شود. در عین حال هیچ باندی مبنی بر واکنش آنتی بادی با آنتی ژن در نمونه های سرم افراد سالم مشاهده نگردید.
داده ها نشان می دهد که ناحیه آنتی ژنیک پروتئین MOMP در اشریشیاکلی بیان می شود. این پروتئین توسط سرم افراد مبتلا به عفونت کلامیدیا تراکوماتیس شناسایی می شود. بنابراین پروتئین نوترکیب دارای اپیتپ های مشابهی با پروتئین طبیعی است.