طراحی یک روش سریع تک مرحله ای دیداری جهت تشخیص سالمونلا بر اساس روش IC-LAMP
لیدینگ ژانگ * ، ژیووی دو ، کونگجی چن ، کوئین کوئین هان ، کیانگ چن ، می ژانگ ، ژیوشان ژیا ، یوشو سونگ
پیشینه:
سالمونلا می تواند سبب گاستروانتریت جدی در انسان شود و اغلب از نمونه های مختلف مواد غذایی جدا می شود. کشت سلول، ایمنی سنجی و واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)، روش های فعلی برای تشخیص چنین عوامل بیماری زایی هستند. با این حال، این روش ها وقت گیر و پر زحمت هستند و بنابراین قادر به پایش سریع سالمونلا نمی باشند.
این مطالعه با هدف طراحی یک IC-LAMP جهت تشخیص سریع و حساس سالمونلا انجام شد.
از سالمونلا به عنوان آنتی ژن برای تولید آنتی بادی تک دودمانی (mAb) استفاده شد و mAb ها از طریق 3 بار زیرکلون سازی تهیه شدند. آنتی بادی تک دودمانی 1B12 با میل ترکیبی بالا در سطح بیدهای مغناطیسی-ایمنی (IMBs) جهت ربایش سالمونلا پوشش داده شدند. فراورده حاصل (سالمونلاIMBs-) با استفاده از پرایمرهای اختصاصی که ژن محافظت شده invA را در سالمونلا هدف قرار می دهند، برای LAMP استفاده شد.
سنجش IC-LAMP بر اساس آنتی بادی تک دودمانی 1B12 و LAMP طراحی و ایجاد شد. با هدف قرار دادن ژن حفاظت شده invA در سالمونلا، مدت زمان شناسایی از 3 روز به 50 دقیقه کاهش یافت. اگر واکنش حاوی سالمونلا باشد، رنگ فلوئورسنت سبز و نوار ذوزنقه ای به وضوح مشاهده می شود. نکته مهم این است که این روش، ویژگی آنتی بادی و LAMP را با حد تشخیص CFU/ml 5 در آب و شیر آلوده شده به صورت دستی، ترکیب می کند. ویژگی این روش با سنجش سایر باکتری های مشابه نشان داده شد. نتایج نشان می دهد که IC-LAMP فقط با سالمونلا واکنش می دهد و واکنش متقاطع با سایر باکتری های مشابه ندارد.
نتیجه گیری:
سنجش IC-LAMP طراحی شده در این مطالعه یک روش سریع، حساس و تک مرحله ای دیداری جهت غربال حضور سالمونلا در نمونه های مواد غذایی است. این روش نسبت به روش های مرسومPCR ، LAMP و دیگر روش ها، سریع تر بوده و می تواند به عنوان یک روش غربالگری اولیه برای تشخیص استفاده شود.
پرداخت حق اشتراک به معنای پذیرش "شرایط خدمات" پایگاه مگیران از سوی شماست.
اگر عضو مگیران هستید:
اگر مقاله ای از شما در مگیران نمایه شده، برای استفاده از اعتبار اهدایی سامانه نویسندگان با ایمیل منتشرشده ثبت نام کنید. ثبت نام
- حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران میشود.
- پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانههای چاپی و دیجیتال را به کاربر نمیدهد.