بیان افتراقی ژن های HSP90 و AGO1 و AGO4 گوجه فرنگی در مواجهه با ویروس موزاییک خیار

ویروس موزاییک خیار Cucumber mosaic virus (CMV) گونه شاخص جنس Cucumovirus از خانواده Bromoviridae است. در این تحقیق بیان برخی ژن های مرتبط با رشد و نمو و متیلاسیون در یک رقم حساس گوجه‏فرنگی آلوده به ویروس موزاییک خیار بررسی شد. برای آلوده سازی گوجه فرنگی از همسانه های آلوده گر جدایه استاندارد Fny ویروس موزاییک خیار استفاده شد. بدین منظور پس از تهیه نسخه های رونویسی شده از همسانه های آلوده گر آران ای یک، دو و سه ویروس موزاییک خیار، رونوشت ها ابتدا روی توتون در مرحله چهاربرگی مایه زنی شدند و پس از ظهور علایم و ایجاد آلودگی، عصاره گیاه توتون آلوده به صورت مکانیکی روی گوجه ‏فرنگی در مرحله چهاربرگی مایه زنی شد. پس از بروز علایم در چندین مرحله از گیاهان آلوده در فاصله های زمانی 7، 14 و 21 روز پس از مایه زنی، نمونه‏برداری از برگ های آلوده انجام گرفت. پس از استخراج آران ای کل از گیاهان دارای علایم حضور ویروس با استفاده از آغازگرهای اختصاصی ویروس منطبق بر بخشی از ژن پروتئین پوششی تایید شد. بیان برخی از ژن های مرتبط با دفاع و متیلاسیون مانند Hsp90، AGO1 وAGO4 توسط Real Time PCR اندازه گیری شد. نتایج نشان داد که میزان بیان برخی از ژن ها مانند HSP90 در گوجه فرنگی های آلوده کاهش یافته بود. همچنین بیان ژن AGO1، در روز هفتم و چهاردهم پس از آلودگی در مقایسه با گیاه سالم افزایش یافت، در حالی که در روز 21 پس از آلودگی میزان بیان این ژن نسبت به گیاه سالم کاهش یافت. بیان AGO4 در گیاهان آلوده به ویروس موزاییک خیار، در روز هفتم نسبت به گیاه سالم کاهش اما در روز 14و 21 روز پس از آلودگی، افزایش بیان نشان داد. تغییرات بیان ژن در AGO احتمالا می تواند ناشی از تاخیر در القای این ژن توسط ویروس در مرحله اول بروز علایم باشد.