طراحی یک روش الایزای غیرمستقیم جهت غربالگری اسب ها بر اساس توانمندی تولید آنتی ونوم اختصاصی علیه کفچه مار ایرانی

در این مطالعه یک روش الایزای غیرمستقیم طراحی گردید تا تیتر آنتی بادی تولید شده در برابر سم مار کبری پس از هر مرحله تزریق اسب مورد سنجش قرار گیرد. به منظور ایمن سازی اسب ها از فراکسیون های سمی زهر مار ناجا ناجا اکسیانا به عنوان آنتی ژن استفاده شد. این روش امکان آن را فراهم می کند که بتوان افزایش مقدار آنتی بادی در پاسخ به تزریق سم را مورد بررسی قرار داد و از این طریق کارایی فرآیند ایمن سازی را ارزیابی کرد. به منظور طراحی الایزای غیرمستقیم، رقت های 50/1، 500/1 و 1000/1 از سرم کنترل مثبت و سرم کنترل منفی برعلیه غلظت های 5/0، 1 و µg/well 2 از سم استفاده شد.  غلظت µg/well 2 از سم و رقت 1:1000 از سرم برای ارزیابی آنتی ونوم انتخاب گردید. پس از راه اندازی سیستم الایزا، سرم های حاصل از خونگیری اسب ها مرحله به مرحله پس از تزریق سم مورد آزمایش قرار گرفت تا روند افزایش تیتر آنتی ونوم مورد ارزیابی قرار گیرد. میانگین جذب نوری سرم ها پس از تزریق سوم 213/1 بود؛ این مقدار 8/5 برابر میانگین جذب نوری نمونه ها پس از مرحله اول ایمن سازی است. تمامی اسب ها پس از تزریق پنجم به تیتر مناسبی از آنتی ونوم رسیدند. نتایج بدست آمده نشان داد که الایزای طراحی شده می تواند برای سنجش مقدار آنتی ونوم سرمی اسب ها به ویژه در ابتدای ایمن سازی مورد استفاده قرار گیرد.