جداسازی، تکثیر و انتقال ژن VP28 ویروس عامل لکه سفید میگو در میکروجلبک Chlorella vulgaris به روش الکتروپوریشن (تراواسازی الکتریکی)

بیماری لکه سفید یکی از مهمترین بیماری ها در پرورش میگو می باشد که موجب کاهش تولید و خسارت اقتصادی شدیدی در کل دنیا از جمله ایران گردیده است. مرگ و میر ناشی از این بیماری شدید و بسیار بالا و به 100% طی 10-3 روز از شروع بیماری می رسد. بر اساس آمارهای جهانی سالانه در دنیا حدود 300 هزار تن میگو بر اثر این بیماری تلف می شود. برای مثال، در ایران در سال های 1386,1383, 1394,1387، 1395 و 1398 شیوع این بیماری خسارات میلیاردی به تولید کنندگان وارد کرد. با توجه به این که ژن پروتیین ویروسی VP28 یکی از مهم ترین پروتیین های پوششی ویروس بیماری لکه سفید و در چسبیدن و نفوذ به سلول های میگو نقش دارد و از آن جایی که مهم ترین منبع غذایی میگو در مرحله لاروی میکروجلبک می باشد، می تواند منبع مناسبی برای ساخت واکسن باشد. در این تحقیق ژن VP28 به میکروجلبک انتقال داده شد تا از این راه کمکی در جهت تولید واکسن خوراکی برای جلوگیری از بیماری لکه سفیدمیگو انجام گیرد. در این تحقیق نمونه های میگو (Penaeus indicus) مشکوک به بیماری سندروم لکه سفید از استخرهای پرورشی آبادان (مهرماه 1390) به آزمایشگاه موسسه واکسن و سرم سازی رازی-شعبه اراک منتقل و DNA ژنومیک ویروس با استفاده از روش پروتییناز K و فنل/کلرفرم استخراج شد. با طراحی آغازگرهای اختصاصی ژن VP28 به روش PCR تکثیر و به داخل وکتور pCAMBIA1304 منتقل و نهایتا طی فرایند تراواسازی الکتریکی به میکروجلبک Chlorella vulgaris که خود یکی از میزبان های بسیار مناسب انتقال ژن می باشد، منتقل گردید.