جداسازی و شناسایی باکتری های اندوفیت از ریشه گیاه یونجه و بررسی اثرات ضد میکروبی آنها بر پاتوژن های انسانی

یونجه با نام علمی Medicago sativa مهم ترین گیاه علوفه ای در ایران و بسیاری از نقاط جهان است. این گیاه به دلیل داشتن ارزش غذایی بالا و امکان کاشت در اقلیم های مختلف، به ملکه گیاهان علوفه ای مشهور است. هدف پژوهش حاضر جداسازی و شناسایی باکتری های اندوفیت از ریشه گیاه یونجه و بررسی اثرات آنتاگونیستی آنها بر باکتری های بیماری زای انسانی است.
قطعه های ریشه ضدعفونی شده گیاه یونجه پس از له شدن در محیط های کشت مایع تایوگلی کولات براث و مولر هینتون براث، جهت غنی سازی، کشت داده شدند. پس از کشت های مایع، بر روی محیط های کشت مولر هینتون آگار، ایوزین متیلن بلو و مک کانکی آگار کشت انجام شد. باکتری های اندوفیت با روش رنگ آمیزی گرم و تست های بیوشیمیایی، مورد شناسایی قرار گرفتند. فعالیت آنتاگونیستی باکتری های جدا شده به روش های استریک متقاطع و دولایه ای بررسی گردید. از باکتری های دارای اثرات آنتاگونیستی، استخراج DNA انجام شد و با کاربرد پرایمر یونیورسال، تکثیر ژن SrRNA16 صورت پذیرفت. محصول PCR تعیین توالی شده و درخت فیلوژنی رسم گردید.
نتایج نشان داد باکتری های اندوفیت یونجه دارای فعالیت آنتاگونیستی بودند و در نهایت دو اندوفیت از لحاظ هویت مولکولی مورد بررسی قرار گرفتند که متعلق به جنس های انتروباکتر و سودوموناس بودند.
براساس نتایج حاصل، باکتری های اندوفیت دارای تنوع زیاد و اثرات قابل توجه ضد باکتریایی می باشند.