زیرهمسانه سازی و بیان ژن blf1 بورخولدریا سودومالئی در ریشه های مویین گیاه تنباکو
نویسنده:
نوع مقاله:
مقاله پژوهشی/اصیل (دارای رتبه معتبر)
چکیده:
Melioidosis یک بیماری مشترک بین انسان و حیوان است که توسط Burkholderia Pseudomallei ایجاد می شود. در حال حاضر هیچ واکسن موثری برای آن وجود ندارد. هدف از این تحقیق بیان ژن blf1 در گیاه تنباکو می باشد. با انتقال وکتور pBI121 به Agrobacterium tumefaciens، ژن blf1 به گیاه تنباکو منتقل شد و گیاه تراریخته کامل بدست آمد. از ریزنمونه گیاه تراریخته توسط Agrobacterium rhizogenes برای تهیه ریشه های مویین استفاده شد. وجود ژن blf1 در ریشه های مویین به دست آمده با روش PCR و وسترن بلات بررسی شد. میزان تولید آنتی ژن با روش الایزا اندازه گیری شد. نتایج آزمایش ساخت سازه ژن با درج blf1 در وکتور pBI121 حاوی ژن ctxB با استفاده از پرایمرهای عمومی با تکنیک PCR تایید شد. ریزنمونه تنباکو پس از تلقیح با Agrobacterium tumefaciens، روی محیط کشت MS حاوی هورمون های بنزیل آمینوپورین (BAP) و 1-نفتالین استیک اسید (1-NAA) قرار داده شد. پس از تشکیل کالوس و باززایی گیاهچه، نهال هایی با مریستم فعال جهت ریشه زایی به محیط بدون هورمون منتقل و بوته های تنباکوی تراریخته با ژن blf1 تولید و از طریق تست PCRصحت انتقال ژن تایید شد. با تهیه ریزنمونه ای از گیاهان تراریخته توسط آگروباکتریوم رایزوژنز، تلقیح و ریشه های مویین به دست آمد. در ریشه های مویین، ژن blf1 با استفاده از PCR و بیان آن با تکنیک وسترن بلات تایید شد. با استفاده از تکنیک الایزا، تولید آنتی ژن نوترکیب BLF1 در ریشه های مویین، 0.56 درصد پروتیین محلول کل تعیین گردید.
کلیدواژگان:
انتقال ژن ، توتون ، میلوئیدوزیس ، همسانه سازی
زبان:
انگلیسی
صفحات:
71 تا 81
لینک کوتاه:
magiran.com/p2577061
دانلود و مطالعه متن این مقاله با یکی از روشهای زیر امکان پذیر است:
اشتراک شخصی
با عضویت و پرداخت آنلاین حق اشتراک یکساله به مبلغ 1,390,000ريال میتوانید 70 عنوان مطلب دانلود کنید!
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی نامحدود همه کاربران به متن مطالب تهیه نمایند!
توجه!
- حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران میشود.
- پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانههای چاپی و دیجیتال را به کاربر نمیدهد.
In order to view content subscription is required
Personal subscription
Subscribe magiran.com for 70 € euros via PayPal and download 70 articles during a year.
Organization subscription
Please contact us to subscribe your university or library for unlimited access!