القای پاسخهای ایمنی اختصاصی در موشهای تلقیح شده با پلاسمید یوکاریوتی بیان کننده اپیتوپ G1 از ویروس تب بی دوام گاوی
تب بی دوام گاوی (BEF) یک بیماری ویروسی قابل انتقال توسط بندپایان در گاو و گاومیش آبی است که موجب بروز خسارات اقتصادی و تجاری قابل توجهی بر صنعت دامپروری میگردد. گلیکوپروتیین G از ویروس تب بیدوام گاوی (BEFV) به عنوان یک کاندیدای احتمالی جهت تولید واکسنهای نوترکیب در برابر این بیماری شناخته شده است. هدف از این مطالعه، بررسی ایمنیزایی یک پلاسمید یوکاریوتی بیان کننده اپیتوپ G1 از ژن گلیکوپروتیین G ویروس تب بیدوام گاوی به عنوان یک واکسن DNA احتمالی در موش بود.
ابتدا پلاسمید یوکاریوتی بیان کننده اپیتوپ G1 تحت عنوان pEGFPN1-G1 ساخته شد. پس از انتقال سازه نوترکیب pEGFPN1-G1 به سلولهای جنینی کلیه انسان (HEK 293)، بیان پروتیین G1 با استفاده از روش ایمونوفلورسنس غیر مستقیم (IFA) تایید شد. سپس به منظور انجام آزمایشهای ایمنیزایی، موشهای ماده با سن شش تا هشت هفته در چهار گروه پنج تایی، سه مرتبه و به صورت داخل عضلانی با سازه نوترکیب pEGFPN1-G1، واکسن تجاری تب بی دوام گاوی، پلاسمید pEGFP-N1 و بافر PBS 1X با فواصل زمانی دو هفتهای مورد تلقیح قرار گرفتند. 14 روز پس از آخرین تزریق، حیوانات خونگیری شدند و سرم آنها به منظور بررسی تولید آنتیبادیهای اختصاصی علیه پروتیین G1 در آزمایشهای ایمونوبلات، الایزا (ELISA) و خنثی سازی ویروس (VN) مورد استفاده قرار گرفت. مقادیر چگالی نوری تمامی نمونههای سرمی بدست آمده از آزمایش الایزا در قالب یک طرح کاملا تصادفی با چهار تیمار و پنج تکرار با استفاده از نرم افزار SAS مورد آنالیز آماری قرار گرفت.
نتایج آزمایشهای ایمونوبلات و آنالیز آماری نمونههای سرمی بدست آمده از آزمایش الایزا نشان دادند که سازه نوترکیب pEGFPN1-G1 توانست موجب القای ایمنی و تولید آنتیبادی اختصاصی علیه آنتیژن G1 در موشها شود. با این حال، سرم موشهای تلقیح شده با این پلاسمید نتوانست ویروس تب بی دوام گاوی در حال تکثیر را خنثی کند.
از آنجایی که سازه نوترکیب pEGFPN1-G1 توانایی تولید آنتیبادیهای اختصاصی علیه آنتی ژن G1 از ویروس تب بی دوام گاوی را در مدل حیوانی داشت، نتایج این مطالعه میتواند گامی در جهت توسعه واکسنهای نوین برای بیماری تب بی دوام گاوی در آینده باشد.
- حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران میشود.
- پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانههای چاپی و دیجیتال را به کاربر نمیدهد.