تهیه آنتی بادی پلی کلونال علیه پروتئین فعال کننده ی سلول های B

پروتئین فعال کننده ی سلول های B (BAFF) عضوی مهم از خانواده ی فاکتور نکروزدهنده تومورها می باشد. بیان بیش از اندازه ی این پروتئین در برخی بیماری های خودایمنی و سرطان ها مشاهده شده است بنابراین این پروتئین می تواند به عنوان یک نشانگر تشخیصی و نیز یک هدف درمانی احتمالی مورد استفاده قرار گیرد. هدف مطالعه حاضر تولید پلی کلونال آنتی بادی شتری برای شناسایی بخش خارج سلولی پروتئین BAFF می باشد.

سازه ژنی بیانی حاوی بخش خارج سلولی پروتئین BAFF انسانی تهیه و به باکتری اشرشیاکولی (E.coli BL21 (DE3)) منتقل شد. بیان این پروتئین توسط ایزوپروپیل تیوگالاکتوزید القاء و تخلیص با استفاده از ستون کروماتوگرافی تمایلی -NTA نیکل انجام شد. پروتئین به صورت زیرجلدی در چند مرحله به همراه ادجوانت فروند به شتر تزریق شد. عملکرد آنتی بادی های پلی کلونال در شناسایی پروتئین BAFF سرم جدا شده شتر با تست های الایزا، وسترن بلاتینگ و فلوسایتومتری بررسی شد.

ایمن سازی شتر پس از تزریق پروتئین BAFF نوترکیب با استفاده از تست الایزا اثبات شد. تست های فلوسایتومتری وسترن بلات نشان داد که آنتی بادی پلی کلونال حاصله قادر به شناسایی پروتئین در سطح سلول می باشد.

باتوجه به نتایج بدست آمده، آنتی بادی پلی کلونال حاصل از سرم شتر قادر به تشخیص و اتصال اختصاصی به پروتئین BAFF بوده و قابلیت استفاده به عنوان یک عامل تشخیصی و درمانی را دارد.